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      <title>&quot;PROTEINAS&quot; / .-°BRENDA YESABEL AGUILAR OLVERA &amp; ABNER ISAAC ARELLANES CARRANZA°-. by Abner Isaac Arellanes Carranza</title>
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      <description> ANALISIS Y FUNCIONAMIENTO PRACTICO PARA EL ESTUDIO DE PROTEINAS </description>
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      <pubDate>2020-09-22 02:59:16 UTC</pubDate>
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         <title>METODOLOGIA PARA EL ESTUDIO DE LAS PROTEINAS</title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title>SEPARACION DE PROTEINAS POR ELECTROFORESIS DE SDS/PAGE</title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title>PURIFICACION DE PROTEINAS</title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title>ANTICUERPOS: INMUNODETECCION/ INMUNOHISTOQUIMICA</title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title>HERRAMIENTAS BIOINFORMATICAS</title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <description><![CDATA[<div>COMO APOYO PARA EL ANALISIS E INVESTIGACION A PROFUNDIDAD DE LAS FUNCIONES Y ESTRUCTURAS PROTEICAS</div>]]></description>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title>¿PROTEINAS?</title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <description><![CDATA[<div>Estas son&nbsp;moléculas grandes y complejas que desempeñan muchas funciones de vital importancia en el cuerpo. Realizan la mayor parte del trabajo en las células y son necesarias para la estructura, función y regulación de los tejidos y órganos del cuerpo.<br><br></div><div>Las proteínas están formadas por cientos o miles de unidades más pequeñas llamadas aminoácidos, que se unen entre sí en largas cadenas. Hay 20 tipos diferentes de aminoácidos que se pueden combinar para formar una proteína. La secuencia de aminoácidos determina la estructura tridimensional única de cada proteína y su función específica.<br><br></div>]]></description>
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         <title>PROTEINAS</title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title>TIPOS DE PROTEINAS</title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title>PASOS PARA LA OBTENCION DE PROTEINAS</title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title>DISGREGACION O FRAGMENTACION DE LA MUESTRA</title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <description><![CDATA[<div>LISIS--&gt;EXTRACTOS TOTALES<br><br>1.EXTRACTOS CITOPLASMICOS<br>2.EXTRACTOS ORGANELOS MEMBRANALES<br>3.EXTRACTOS NUCLEARES<br>4.PROTEINAS INSOLUBLES</div>]]></description>
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         <title>1.LISIS CELULAR</title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <description><![CDATA[<div>La lisis es un método en el que el límite exterior o la membrana celular se rompe o destruye para liberar materiales intercelulares como ADN, ARN, proteínas o orgánulos de una célula.<br><br>Algunos proceso de ruptura membranal son a través de estrés osmótico, digestión enzimática o mecanismos virales.<br><br>Durante la lisis, se libera el contenido celular fluido, llamado lisado. En los laboratorios, la lisis celular se usa a<br>menudo para purificar y estudiar más a fondo el contenido de una célula, como las proteínas o el ADN.&nbsp;<br><br></div>]]></description>
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         <title>2.CLASIFICACION</title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title>3.PURIFICACION</title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <description><![CDATA[<div>*La metodologia debe considerarse dependiendo de la cantidad de proteina requerida-<br>*El grado de pureza dependera del uso que se le dara a la proteina.<br>-Investigacion: bajo grado de pureza pero alto rendimiento.<br>-Grados terapeuticos: se requiere de la maxima pureza.<br>-Uso industrial: maxima cantidad, bajo costo, minima pureza.<br><br></div>]]></description>
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         <title>5.ANALISIS</title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title>METODOS QUIMICOS</title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <description><![CDATA[<div><br>Pueden ser digestiones enzimáticas, el uso de detergentes o bien el uso de tratamientos con compuestos alcalinos, orgánicos (disolución lipídica) o sustancias caotrópicas.<br><br>ENZIMATICOS: Se trata de enzimas permeables de forma selectiva las membranas tales como lisozimas, glucanasas y manazas<br><br>SALES<br><br>DETERGENTES:&nbsp; son una clase de moléculas cuyas propiedades únicas permiten la manipulación (ruptura o<br>formación) de interacciones hidrofóbicas-hidrofílicas entre moléculas en muestras biológicas; los detergentes se utilizan para lisar células (liberar proteínas solubles), solubilizar<br>proteínas y lípidos de membrana, controlar la cristalización de proteínas, evitar la unión no específica en<br>procedimientos de inmuno-ensayo y purificación por afinidad, y se utilizan como aditivos en electroforesis.<br><br><br>SOLVENTES ORGANICOS<br><br>CAOTROPICOS:  es una sustancia que desorganiza la estructura tridimensional en macromoléculas tales como las proteínas y las desnaturaliza. Lo realizan actuando sobre las<br>interacciones intramoleculares no covalentes, que tendrían un papel estabilizador en la molécula. Algunos ejemplos son la urea, la tiourea o el cloruro de guanidinio.<br><br><br></div>]]></description>
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         <title>METODOS FISICOS</title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <description><![CDATA[<div>MECANICOS: SONICACION - HOMOGENIZACION<br><strong>CUCHILLAS/EMBOLOS/ PISTONES</strong><br><br>NO MECANICOS: SHOCK OSMOTICO - CONGELACION Y DESCONGELACION</div>]]></description>
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         <title>METODOS BIOLOGICOS</title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <description><![CDATA[<div>ENZIMAS DE DIGESTION<br>PEPTIDASAS Y PROTEASAS:<br>Las enzimas proteolíticas, también conocidas como proteasas o peptidasas, son las responsables de catalizar la hidrólisis de los enlaces peptídicos de otras proteínas, dando como resultado la producción de péptidos o aminoácidos libres.<br><br>Además de estar involucradas en todo el ciclo de vida de las proteínas, desde su biosíntesis, control de destino y activación, hasta su degradación, desempeñando funciones que incluyen la división celular, la transducción de señales, la esporulación, la digestión de las proteínas de los alimentos, la regulación de la presión arterial, la síntesis de proteínas virales, la apoptosis, el procesamiento de hormonas polipeptídicas, la degradación de proteínas plegadas incorrectamente, la autolisis, la protección contra péptidos dañinos y enzimas, entre muchas otras.</div>]]></description>
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         <title>CENTRIFUGACION</title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <description><![CDATA[<div>SOBRENADASNTES&lt;---&gt;PELLET<br><br>Las partículas grandes suspendidas en líquido eventualmente se asentarán bajo la influencia del campo<br>gravitacional. Sin embargo, las partículas<br>pequeñas generalmente se separarán extremadamente despacio a menos que estén sujetas a una fuerza mucho mayor que la gravedad.&nbsp;<br><br>Esto se puede lograr por centrifugación.<br>La velocidad a la que las partículas se asientan o sedimentan depende de su tamaño, forma y densidad (la densidad es la masa de un volumen dado de una sustancia, es decir, densidad = masa/volumen), la densidad del líquido y la velocidad de rotación. de centrifugación.</div>]]></description>
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      </item>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title>GUIA PARA LA PURIFICACION DE PROTEINAS</title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title>1. CONOCIMIENTO DE LAS CARACTERISTICAS BIOLOGICAS (QUIMICAS Y FISICOQUIMICAS)</title>
         <author>abnerarellanes</author>
         <link>https://padlet.com/abnerarellanes/Bookmarks/wish/2198373738</link>
         <description><![CDATA[<div>Se de suma importancia conocer las propiedades bioquímica y físico- químicas, secuencia de aminoácidos, carga,<br>peso molecular, hidrofobicidad, función, incluso qué moléculas y parámetros físicoquímicos pueden<br>modificar estas propiedades así como los mecanismos por el cual llevan a cabo esta alteración de la molécula.<br><br><strong>• La función de la proteína de interés es determinante durante el proceso de purificación.</strong><br>• Considerando que la muestra se dividirá en fracciones a lo largo de todo el proceso de purificación, la<br>identificación de la proteína de interés será mediante su función.</div>]]></description>
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         <pubDate>2022-05-24 22:44:13 UTC</pubDate>
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      </item>
      <item>
         <title>2.SELECCION DE FUENTE DE PROTEINA</title>
         <author>abnerarellanes</author>
         <link>https://padlet.com/abnerarellanes/Bookmarks/wish/2198378277</link>
         <description><![CDATA[<div>Antes de intentar purificar una proteína hay con considerar la fuente del material de inicio.<br>• De qué tipo de célula proviene---¿dondé es mas abundante?<br>• De qué parte de la célula---¿algunas fuentes son mas accesibles que otras?<br>• En el caso de proteína intracelular puede estar a muy baja concentracion y acompañada de<br>millares de proteínas y otras macromoleculas.<br>• En el caso de proteínas extracelulares pueden estar en baja concentración y también acompañadas o ser el principal producto extracelular.<br>• Con el uso de técnicas de DNA recombinante muchas proteínas pueden expresarse en células<br>bacterianas y eucariontes y de manera subsecuente obtenerse cantidades relativamente grandes<br>de proteínas.</div>]]></description>
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         <pubDate>2022-05-24 22:52:21 UTC</pubDate>
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      </item>
      <item>
         <title>3.HOMOGENIZACION Y SOLUBILIDAD </title>
         <author>abnerarellanes</author>
         <link>https://padlet.com/abnerarellanes/Bookmarks/wish/2198379278</link>
         <description><![CDATA[<div>La proteína debe estar en solución<br>• La solubilización de proteínas es el proceso de romper las interacciones involucradas en la agregación de las<br>proteínas, que incluyen enlaces disulfuro, enlaces de hidrógeno, fuerzas de van der Waals, interacciones<br>iónicas e interacciones hidrofóbicas.<br>• Si no se evitan estas interacciones, las proteínas pueden agregarse o precipitarse, lo que da como resultado<br>artefactos o pérdida de muestras.<br><br><strong>Detergentes:</strong> Los detergentes interrumpen las interacciones<br>hidrofóbicas entre y dentro de las proteínas. Algunas proteínas, especialmente las proteínas de membrana, requieren detergentes para la solubilización durante el aislamiento, así como para mantener la solubilidad.<br>Agentes reductores: Los agentes reductores de tiol como el 2-mercaptoetanol βME y el ditiotreitol (DTT) interrumpen los enlaces disulfuro intramoleculares e intermoleculares y mantienen a las proteínas en sus estados completamente reducidos.<br><br><strong>Agentes caótropicos:</strong> Un agente caotrópico es una sustancia que desorganiza la red tridimensional del agua influyendo en la organización de sus moléculas a través de sus enlaces de<br>hidrógeno.<br><strong><br>Buffer y sales: </strong>Muchas proteínas son más solubles a un pH más alto, por lo que a menudo se incluye Tris base para elevar el pH.</div>]]></description>
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         <pubDate>2022-05-24 22:54:00 UTC</pubDate>
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      </item>
      <item>
         <title>4.ESTABILIZACION DE LA PROTEINA</title>
         <author>abnerarellanes</author>
         <link>https://padlet.com/abnerarellanes/Bookmarks/wish/2198382198</link>
         <description><![CDATA[<div>A lo largo del proceso de purificación, deben seguirse determinados pasos para asegurar que la<br>proteína de interes no se inactive o desnaturalice por factores físicos o biológicos.<br>• El pH de las soluciones debe amortiguarse a un pH el cual la proteína sea estable<br>• La temperatura debe mantenerse por debajo de los 25 C en general cerca de los 4 C para evitar su<br>desnaturalización térmica.<br>• Reducir al minimo la actividad de las proteasas</div>]]></description>
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         <pubDate>2022-05-24 22:59:01 UTC</pubDate>
         <guid>https://padlet.com/abnerarellanes/Bookmarks/wish/2198382198</guid>
      </item>
      <item>
         <title>5.ENSAYOS DE PROTEINAS</title>
         <author>abnerarellanes</author>
         <link>https://padlet.com/abnerarellanes/Bookmarks/wish/2198383053</link>
         <description><![CDATA[<div>La función de la proteína de interés es determinante durante el proceso de purificación.<br>• Considerando que la muestra se dividirá en fracciones a lo largo de todo el proceso de purificación, la identificación de la proteína de interés será mediante su función, o alguna característica que se pueda monitorear.<br>• Definir un ensayo específico que identifique a la proteína (actividad biológica) (específico, sensible, rápido y barato)<br>-Ensayos enzimáticos<br>-Efectos biológicos<br>-Inmunoensayos</div>]]></description>
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         <pubDate>2022-05-24 23:00:24 UTC</pubDate>
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      </item>
      <item>
         <title>6.METODOS DE PURIFICACION</title>
         <author>abnerarellanes</author>
         <link>https://padlet.com/abnerarellanes/Bookmarks/wish/2198383732</link>
         <description><![CDATA[]]></description>
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         <pubDate>2022-05-24 23:01:33 UTC</pubDate>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
         <link>https://padlet.com/abnerarellanes/Bookmarks/wish/2198386129</link>
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         <pubDate>2022-05-24 23:05:42 UTC</pubDate>
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         <title>**SOLUDILIDAD**</title>
         <author>abnerarellanes</author>
         <link>https://padlet.com/abnerarellanes/Bookmarks/wish/2198390772</link>
         <description><![CDATA[<div>La solubilidad es la medida de la capacidad de disolverse una cierta sustancia en un determinado medio, a una temperatura y presión determinadas.<br><br>La solubilidad de una proteína depende de los residuos de aminoácidos ionizados, regiones polares e hidrofóbicas que están en contacto con el solvente (agua), generando una capa de moléculas de agua<br>(capa de solvatación).<br><br>Cuando la interacción de la proteína con la capa de solvatación se interrumpe por un aumento en la entropía del sistema, entonces la proteína se precipita, esto se logra con solventes, sales o cambios<br>en el pH.<br><br>Altas concentraciones de sales se usan de manera común para precipitar proteínas, los iones compiten con las proteínas por las moléculas de agua en la capa de solvatación, hasta que la proteína<br>pierde la interacción con la capa de solvatación.<br><br>A este fenómeno se le llama en inglés “saltig out ”, cuando la proteína es soluble en presencia de<br>bajas concentraciones de sales, se denota “salting in ”</div>]]></description>
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         <pubDate>2022-05-24 23:13:24 UTC</pubDate>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
         <link>https://padlet.com/abnerarellanes/Bookmarks/wish/2198392893</link>
         <description><![CDATA[]]></description>
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         <pubDate>2022-05-24 23:16:40 UTC</pubDate>
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      <item>
         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
         <link>https://padlet.com/abnerarellanes/Bookmarks/wish/2198396689</link>
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         <pubDate>2022-05-24 23:22:06 UTC</pubDate>
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      </item>
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         <title>PRECIPITACION POR SULFATO DE AMONIO</title>
         <author>abnerarellanes</author>
         <link>https://padlet.com/abnerarellanes/Bookmarks/wish/2198398493</link>
         <description><![CDATA[<div>La precipitación de proteínas con alta concentración de sal es una alternativa recurrente en la purificación de<br>proteínas cuando se trata de extractos muy complejos (gran número de proteínas), o cuando se manejan volúmenes grandes de la muestra, incluso se convierte en una alternativa para clarificar extractos.<br><br>Un primer paso de separación es el de la precipitación con sulfato de amonio. Esta técnica se basa en el hecho de que la solubilidad de la mayor parte de las proteínas está disminuida en. altas concentraciones salinas.<br><br>A medida que la concentración de sal se eleva, se alcanza un punto en el cual la proteína pierde su solubilidad y precipita.<br><br>La concentración de sal que se requiere para este efecto de desplazamiento salino varia de proteína a proteína y por consiguiente es utila para usar en el fraccionaiento de una mezcla de proteínas.<br>Por ejemplo, 0.8 M de sulfato de amonio hacen precipitar la proteínafibrinogeno del suero, en tanto que 2.4 M es la cantidad requerida para precipitar albumina.</div>]]></description>
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         <pubDate>2022-05-24 23:24:25 UTC</pubDate>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <pubDate>2022-05-24 23:25:46 UTC</pubDate>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
         <link>https://padlet.com/abnerarellanes/Bookmarks/wish/2198403210</link>
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         <title>EFECTO DE LA TEMPERATURA</title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <description><![CDATA[<div>Dentro de una fluctuación limitada entre los 0 y los 40oC aproximadamente, la mayor parte de la solubilidad de<br>las proteínas globulares aumenta al aumentar la temperatura, aunque existen algunas excepciones, como<br>ocurre con los electrolitos sencillos.<br><br>Por encima de los 40 y los 50oC, la mayor parte de las proteínas aumentan en inestabilidad y comienzan a<br>desnaturalizarse, generalmente con pérdida de solubilidad en la zona neutra de pH.</div>]]></description>
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         <pubDate>2022-05-24 23:33:02 UTC</pubDate>
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      </item>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
         <link>https://padlet.com/abnerarellanes/Bookmarks/wish/2198405862</link>
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         <pubDate>2022-05-24 23:34:18 UTC</pubDate>
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         <title>***TAMAÑO***</title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <pubDate>2022-05-24 23:38:11 UTC</pubDate>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <pubDate>2022-05-24 23:58:23 UTC</pubDate>
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         <title>4.CUANTIFIACION DE PROTEINAS</title>
         <author>abnerarellanes</author>
         <link>https://padlet.com/abnerarellanes/Bookmarks/wish/2198435245</link>
         <description><![CDATA[<div>Determinar la concentración de proteínas en una muestra biológica es una técnica de rutina básica cuando se aborda un esquema de purificación de una proteína concreta, cuando se quiere conocer la actividad específica de una preparación enzimática, para el diagnóstico de enfermedades, así como para otros muchos propósitos.<br><br>Una manera de evaluar el protocolo de purificación es conociendo la cantidad de proteína total de la muestra, desde que se clarifica el extracto hasta que se obtiene pura (rendimiento expresado en porcentaje).<br><br></div>]]></description>
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         <pubDate>2022-05-25 00:06:35 UTC</pubDate>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
         <link>https://padlet.com/abnerarellanes/Bookmarks/wish/2198444414</link>
         <description><![CDATA[]]></description>
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         <pubDate>2022-05-25 00:15:04 UTC</pubDate>
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      <item>
         <title>ABSORCION UV</title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <pubDate>2022-05-25 00:16:01 UTC</pubDate>
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      </item>
      <item>
         <title>METODOS COLORIMETRICOS</title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <description><![CDATA[<div>Los ensayos colorimétricos para proteínas se basan en el hecho de que ciertos iones metales y colorantes se unen a las proteínas en una proporción de masa específica, y al unirse se vuelven intensamente coloreados.<br><br>Dentro de un rango específico de concentración de proteína, estos reactivos darán lugar a una banda de absorción cuya intensidad es linealmente proporcional a la concentración de proteína de una solución en masa/ unidades de volumen.<br><br>Los tres métodos más utilizados son:<br><br>• Ensayo de Biuret<br>• Ensayo de Lowry<br>• Ensayo de Bradford.</div>]]></description>
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         <pubDate>2022-05-25 00:16:26 UTC</pubDate>
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      </item>
      <item>
         <title>ESPECTRO UV</title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <description><![CDATA[<div>La mayoría de las proteínas muestran una<br>absorción a 280 nm, la cual se atribuye al grupo fenólico de la tirosina y al grupo indólico del triptofano.<br><br>Ya que las concentraciones de estos<br>aminoácidos en las proteínas es constante se puede utilizar la absorbancia a 280nm para estimar su concentración<br><br>Tiene la ventaja de que no es necesario utilizar reactivos y la muestra no se daña o destruye durante la determinación.<br><br>Este método se recomienda para proteínas<br>puras, ya que se considera el coeficiente de extinción molar (es un parámetro específico para cada proteína) para obtener la cantidad de proteína</div>]]></description>
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         <pubDate>2022-05-25 00:18:14 UTC</pubDate>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <author>abnerarellanes</author>
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         <author>abnerarellanes</author>
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         <author>abnerarellanes</author>
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         <author>abnerarellanes</author>
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         <author>abnerarellanes</author>
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         <author>abnerarellanes</author>
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         <title>TINCION</title>
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         <author>abnerarellanes</author>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title></title>
         <author>abnerarellanes</author>
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         <title>INMUNOPRECIPITACION</title>
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