As amostras foram transferidas diretamente para meios de cultura apropriados, assegurando o transporte adequado para preservar as características bacterianas. 

Amostra de cima

Amostra de baixo

Teste de turbidez positivo também

2. Catalase: Diferencia estafilococos (positivos) de estreptococos/enterococos (negativos).  

3. Coagulase (para catalase positiva): Identifica Staphylococcus aureus.  

4. Fermentação de Manitol: Complementa a identificação de estafilococos.  

5. Bile-esculina (para catalase negativa): Diferencia estreptococos do grupo D e enterococos.  

6. Teste de NaCl 6,5%: Confirma Enterococcus spp. 

(catalase e coagulase positivas, fermentação de manitol positiva).  

• Amostra 2: Estafilococo coagulase-negativo.  

• Amostra 3: Enterococcus spp (catalase negativa, bile-esculina e teste de sal positivos).  

O ágar MH possui baixa concentração de inibidores, como timina e timidina, que podem interferir nos testes de susceptibilidade.   Permite a reprodução uniforme de halos de inibição, garantindo resultados confiáveis.

   - A suspensão bacteriana foi inoculada na superfície do ágar MH, garantindo cobertura uniforme.  

   - Foi colocado um disco de novobiocina (com concentração padronizada) no centro da placa.  

   - A placa foi incubada a 35-37°C por 24 horas.  

- Após a incubação, foi observado um halo de inibição de 25 mm ao redor do disco de novobiocina.  

- Com base nesse resultado, conclui-se que a amostra não corresponde a Staphylococcus saprophyticus, já que essa espécie seria resistente à novobiocina (halo ≤ 16 mm).  

Possível infecção do trato urinário (ITU), frequentemente causada por microrganismos como Escherichia coli, Klebsiella spp., Proteus spp., Enterococcus spp., entre outros. 

Investigação de patógenos gastrointestinais como Salmonella spp., Shigella spp., Escherichia coli enteropatogênicas, Yersinia spp. e outros agentes entéricos. 

Amostra deve ser processada rapidamente ou mantida refrigerada para preservar a viabilidade dos microrganismos.  

Ágar MacConkey (MC):  

   - Útil para diferenciar enterobactérias com base na fermentação de lactose.  

Ágar Hektoen Enteric (HE):  

   - Seletivo para patógenos entéricos como Salmonella spp. (colônias pretas devido à produção de H₂S) e Shigella spp. (colônias verdes).  

Mecanismo: Contém sais biliares para inibir o crescimento de Gram-positivas. Lactose, sacarose e salicina são os carboidratos diferenciais, com azul de bromotimol e fucsina ácida como indicadores de pH.  

    - Fermentadores produzem colônias alaranjadas (ácido).  

    - Não fermentadores produzem colônias verdes/transparentes.  

  - Tiossulfato de sódio e citrato férrico permitem a detecção de produção de H₂S (colônias pretas).  

Ágar SS (Salmonella-Shigella):  

   - Meio altamente seletivo para Salmonella e Shigella.  

   - Salmonella apresenta colônias pretas, enquanto Shigella forma colônias translúcidas.  

Mecanismo: Contém sais biliares e verde brilhante para inibir Gram-positivas e flora comensal. Lactose é o carboidrato diferencial, com vermelho neutro como indicador de pH.  

    - Fermentadores de lactose formam colônias rosa/vermelhas.  

    - Não fermentadores formam colônias transparentes.  

  - Tiossulfato de sódio e citrato férrico detectam produção de H₂S (colônias pretas).   

Ágar EMB:  

   - Complementa a análise de fermentação de lactose e crescimento de Gram-negativos.  

Ágar MacConkey (MC):  

Meio seletivo e diferencial para bactérias Gram-negativas.  Permite identificar fermentadores de lactose. 

Mecanismo: Contém sais biliares e cristal violeta, que inibem o crescimento de bactérias Gram-positivas, tornando o meio seletivo para Gram-negativas.  A lactose é o carboidrato disponível no meio, e o vermelho neutro é o indicador de pH. Bactérias que fermentam lactose produzem ácido, reduzindo o pH e resultando em colônias rosa/vermelhas. Bactérias que não fermentam lactose formam colônias incolores ou transparentes

Ágar CLED (Cystine Lactose Electrolyte Deficient)

  - Meio diferencial para isolamento de cpatógenos urinários, inibindo efeito de eletrólitos que interferem no crescimento bacteriano e no diagnóstico. Diferencia fermentadores de lactose (colônias amarelas) e não fermentadores (colônias incolores).  

Mecanismo: Lactose é o carboidrato diferencial e o azul de bromotimol é o indicador de pH. Fermentadores de lactose resultam em colônias amarelas (ácido), enquanto não fermentadores produzem colônias azuladas/incolores.  

Ágar EMB (Eosina Azul de Metileno):  

  - Meio seletivo para Gram-negativos, permitindo diferenciar fermentadores de lactose com colônias de coloração metalizada (E. coli) de outros enterobactérias.  

Mecanismo: Contém eosina e azul de metileno, que atuam como indicadores de pH e inibem o crescimento de Gram-positivas, tornando o meio seletivo para Gram-negativas. Fermentadores de lactose produzem ácido, alterando o pH e reagindo com os corantes para formar colônias coloridas. 

• Contagens abaixo de 10.000 UFC/ml são consideradas como microflora residente ou normal da uretra anterior.

• Contagens entre 10.000 e 100.000 UFC/ml são classificadas como resultado duvidoso, devendo ser confirmadas por outros parâmetros, como sintomatologia clínica, presença de piócitos e número elevado de bactérias no sumário de urina.

• Contagens superiores a 100.000 UFC/ml indicam infecção do trato urinário (ITU).

A presença de mais de um tipo de colônia no meio de cultura sugere possível contaminação da amostra.

• MC (MacConkey): Não houve crescimento.

• HE (Hektoen Enteric): A amostra 3 não apresentou coloração amarela no meio, como esperado, mas apresentou coloração verde.

• MB (Methylene Blue): No EMB, as colônias apresentaram uma coloração rosa clara, indicando que a amostra não fermenta.

• SS (Salmonella-Shigella): As colônias apresentaram coloração negra, o que indica a produção de H2S.

• MC (MacConkey) e EMB (Eosina-Azul de Metileno): Para diferenciar enterobactérias fermentadoras e não fermentadoras de lactose.

• SS (Salmonella-Shigella) e HE (Hektoen Enteric): São meios seletivos utilizados para isolar Shigella spp. e Salmonella spp., inibindo outras enterobactérias.

Todas as provas indicam a presença de Salmonella.

Para os teste se usa uma agulha bacteriológica flambada, que encostar na superfície de uma colônia e inocular no tubo  por picada central até o fundo reto ou fazendo zig-zag.

Depois os tubos foram incubados em estufa bacteriológica entre 35 a 37ºC/18 a 24h.

Fermentação de glicose: Detecta a capacidade de fermentar glicose, mudando o pH do meio (vermelho → amarelo).  

Produção de gás: Fissuras ou bolhas no meio indicam liberação de gás pela fermentação.  

Urease: A hidrólise da ureia gera amônia, aumentando o pH e mudando o meio para rosa.  

Produção de H2S: Detecta a produção de sulfeto de hidrogênio a partir de compostos sulfurados, formando um precipitado preto no fundo do tubo.

Desaminação do L-triptofano:  A desaminação do L-triptofano produz compostos como indol.

Adicionando reagente de Kovac's, a formação de um anel rosado no topo indica resultado positivo.

A1, A2 e A3 respectivamente

(positiva), de outras que não realizam essa reação, como Proteus.

Descarboxilação da lisina: Bactérias que descarboxilam lisina produzem cadaverina, um composto alcalino. Isso eleva o pH e muda a cor do meio de amarelo (negativo) para roxo (positivo).

Motilidade: Difusão do crescimento fora da linha de picada.  

 Indol: Detecta a degradação do triptofano; anel rosado com reagente de Kovac's confirma resultado positivo.  

 Ornitina: Bactérias que descarboxilam ornitina elevam o pH, mudando o meio de amarelo para roxo.  

Mecanismo: Produção de ácidos pela fermentação reduz o pH, mudando o meio de vermelho para amarelo.  

Diferencia espécies como Klebsiella (citrato positiva) de E. coli (citrato negativa). 

Mecanismo: Uso de citrato gera amônia, aumentando o pH e mudando a cor do meio de verde para azul. 

Mecanismo: O fenilpiruvato reage com cloreto férrico, formando coloração verde.  

Provas: 

Teste VM: Adiciona-se vermelho de metila; cor vermelha indica produção de ácidos mistos.  

Teste VP: Adicionam-se reagentes VP A e VP B; cor avermelhada indica produção de acetona (via butanodiol).  

Amostra 1: E. coli

Amostra 2: Proteus mirabilis

Amostra 3: Salmonella spp