https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk Ana Lucía Valdez García en-us 2020-09-28 03:39:01 UTC 2024-11-22 00:15:43 UTC hello@padlet.com luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783232004 Ana Lucía Valdez García]]> 2020-09-28 03:39:40 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783232004 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783233161 Utilizado para separar moléculas en función de su carga, tamaño y forma.

Medio de separación especialmente eficaz para las biomoléculas cargadas como el ADN, ARN y las proteínas.]]> 2020-09-28 03:40:33 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783233161 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783235801 1.- Se disuelve polvo de agarosa en una solución tampón hirviente.
2.- Se deja enfriar la solución a 55°C y se vierte en un soporte, donde se solidifica.
3.- Se sumerge después el soporte en un equipo de electroforesis de electrodos que contiene solución tampón.

]]> 2020-09-28 03:42:08 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783235801 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783236888 1.- Estas se mezclan con componentes que les agregan densidad, como el glicerol o la sacarosa.
2.- Las muestras se colocan por medio de una micropipeta o pipeta de transferencia en las rendijas visibles en el gel con la ayuda de una plantilla.
3.- Las muestras se sumergen en la solución tampón y permanecen en los pocillos.
4.- El equipo de electroforesis se conecta a una fuente de corriente continua directa y se somete a tensión.
5.- Las moléculas cargadas contenidas en las muestras penetran en los capilares del gel. 
6.- Las moléculas de carga neta negativa migran hacia ánodo, 
mientras que las moléculas de carga neta positiva migran hacia el cátodo.

* Cuanto más fuerte sea el campo eléctrico, mas rápido migran las moléculas. 
* El tampón sirve para conducir la electricidad y para controlar el pH. 
* El pH tiene una influencia sobre la carga y la estabilidad de las moléculas biológicas.]]> 2020-09-28 03:43:00 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783236888 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783248465 Técnica de electroforesis a través de una matriz para analizar muestras de ADN.]]> 2020-09-28 03:51:40 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783248465 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783248860 Una combinación de fuerza eléctrica y de fricción permitiría el desplazamiento y separación en función del tamaño o topología de diferentes moléculas.]]> 2020-09-28 03:52:02 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783248860 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783315511 Disuelven en el buffer a 90-95 °C.
Solidifican a 35-45 °C.]]> 2020-09-28 04:38:11 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783315511 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783316549 Disuelven a 65 °C.
Solidifican a 30-35 °C.]]> 2020-09-28 04:38:54 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783316549 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783317932 Permiten una mejor separación.
Rango inferior del tamaño de las moléculas a separar.]]> 2020-09-28 04:39:44 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783317932 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783320559 Parámetros que determinan el rango de tamaños en los qeu obtendremos una buena separación de los fragmentos de ADN]]> 2020-09-28 04:41:30 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783320559 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783321662 Tampón utilizado para aplicaciones de electroforesis en gel de agarosa que requieren una alta resolución y separación de ADN bacteriano de alto peso molecular.]]> 2020-09-28 04:42:15 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783321662 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783323821 Electrodo en la parte negativa.]]> 2020-09-28 04:43:31 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783323821 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783324261 Electrodo en la parte positiva.]]> 2020-09-28 04:43:48 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783324261 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783325805 El gel debe colocarse con las muestras en dirección al cátodo.

El ADN deberá migrar hacia el ánodo y de esa manera separar la muestra.

Es importante que para poder realizar la cuantificación se pueda colocar un marcador de peso molecular.]]> 2020-09-28 04:44:50 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783325805 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783331830 Utilizado para estimar los tamaños de los fragmentos de ADN.]]> 2020-09-28 04:48:37 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783331830 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783334033 Detecta una señal quimioluminiscente mediante una cámara CCD super-enfriada.
El ChemilDoc XRS+ le permite documentar geles de proteínas teñidos con colorante fluorescente y visibles.
Tiene una software para observar geles y tomar fotos que pueden ser editables.]]> 2020-09-28 04:50:07 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783334033 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783334518 Permite observar el gel directamente.
Primero se tiñe el gel para observar las bandas expuestas a la luz UV.]]> 2020-09-28 04:50:30 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783334518 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783343589 TAE (Tris-Acetato EDTA) o TBE (Tris-Borato EDTA)

El TAE tiene una menor capacidad de amortiguación que el TBE.

 Puede resultar en una acidificación del medio si la electroforesis se desarrolla durante un periodo muy prolongado, pero funciona muy bien con tiempos normales de electroforesis.

Además tiene una mayor capacidad de resolución que el TBE para tamaños grandes de ADN. ]]> 2020-09-28 04:56:12 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783343589 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783352307 Bromuro de Etidio (BrEt)

Agente intercalante  que se usa como colorante fluorescente para la visualización de ácidos nucleicos en geles de agarosa y  poliacrilamida.]]> 2020-09-28 05:01:51 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783352307 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783358498 1.- Preparar el gel con BrEt incorporado. 

2.-Teñir el gel una vez finalizada la electroforesis con una solución de BrEt. 

* La concentración final del BrEt en el gel o en la solución de teñido debe ser de 0.5 µg/ml (en ambos casos).

]]> 2020-09-28 05:05:29 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783358498 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783362230 Absorbe luz ultravioleta de λ ≈ 300 nm.

Emite una luz anaranjada de 590 nm, mediante la cual podemos observar la posición y cantidad relativa del ADN en el gel tras la electroforesis.]]> 2020-09-28 05:07:34 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783362230 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783364738 Se prepara a una concentración de 10 mg/ml en agua.

Se conserva a temperatura ambiente o a 4°C en un tubo envuelto en papel de aluminio. ]]> 2020-09-28 05:09:04 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783364738 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783368273 Ambos suelen prepararse como soluciones concentradas, que pueden almacenarse a temperatura ambiente.

Estas se diluyen con agua antes de cada electroforesis para lograr la concentración de uso: 1x para el TAE y 0.5x para el TBE.]]> 2020-09-28 05:11:14 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783368273 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783370532 Alta densidad que permita que la muestra se introduzca en el pocillo del gel.

Además de colorantes que nos indiquen cuando debe detenerse la electroforesis. ]]> 2020-09-28 05:12:32 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783370532 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783371654 Buffer de carga tipo I (6x):
0.25% azul de bromofenol; 0.25% xileno cianol; 40% sacarosa, en agua. Almacenar a 4°C.

Buffer de carga tipo II (6x):
0.25% azul de bromofenol; 0.25% xileno cianol; 30% glicerol, en agua. Almacenar a 4°C.

]]> 2020-09-28 05:13:12 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783371654 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783376248 Alternativas a la tinción con BrEt]]> 2020-09-28 05:16:01 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783376248 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783382171 Colorante muy sensible con una elevada afinidad por el ADN, que puede detectar cantidades de tan sólo 20 pg de ADN. 

Se utiliza en una dilución 1/10 000 en agua para el teñido del gel tras la electroforesis.

Recomendable para la deetección de cantidades muy pequeñas de ADN que no sean detectables mediante tinción con BrEt.]]> 2020-09-28 05:16:30 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783382171 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783384524 Sensibilidad similar al BrEt, pero menor capacidad mutagénica. ]]> 2020-09-28 05:17:47 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783384524 luciavaldezg27 https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783386730 Alta sensibilidad.]]> 2020-09-28 05:19:04 UTC https://padlet.com/luciavaldezg27/ubt8zqglzbwd0xmk/wish/783386730