• Procesamiento de las muestras

• Diagrama para procesamiento de muestras

• Jerarquización de las muestras

• Streptococcus B hemolíticos

• Stahphylococcus Aureus

• Enterococcus spp.

• Pseudomona Aeruginosa

• Enterobacterias

Los que son parte de la microbiota de la piel

• Corynobacterium spp

• Stphylococcus Coagulasa negativo

• Mirococcus spp.

• Neisseria spp. no Gonorrhoeae

• Streptococcus a hemolítico

Patogenos anaerobios subcutaneos

• Bacteroides

• Propionibacterium spp.

• Peptostreptococcus spp.

Tipos de infecciones de la piel

• Máculas

• Pústulas

• Celulitis

• Hericida abierta

• Angioderma

Infecciones eritematosas superficiales

• Erisipelas (erysipeloides rhusiopathiae)

• Celulitis (sthaphylococcus grupo A)

• Impétigo (sthaphy. Aureus y Enterococcus del grupo A)

Mionecrosis

• Causadas por clostridium spp.

• clorhexidina al 2% o etanol al 70%

• providona iodada al 10%

• etanol

toma de muestra

• en caso de abscesos cerrados: aspiración con jeringa

• en heridas abiertas: con una torunda y muestrear un área de aproximadamente 1 cm2 del tejido celular subcutaneo y si es en heridas secas se impregna con solución salina.

• en el caso de tejidos: con un sacabocados y también punción o aspiración

• quemaduras: realizar 2 incisiones paralelas de unos 1-2cm de longitud, es importante recoger 2 muestras de diferentes zonas de la herida.

Las bacterias se tiñen por ósmosis, al añadir Violeta cristal, tanto gram negativas y positivas. 

Luego se añade Yodo Lugol, este actúa como mordiente, es decir, fijador y forma el complejo, peptidoglicano – Lugol, haciendo que el peptidoglicano sea más fuerte. 

Luego se añade el alcohol acetona, por 3-5 segundos, las Gram positivos se mantienen morados por su peptidoglicano, y el alcohol degrada los lípidos, y en las Gram – se destiñe el Violeta cristal. 

Para Observar se debe Observar en 100+ aceite de inmersión, con el condensador elevado.

• citológicos

• bioquímicos

• microbiológicos

tipos de análisis de líquidos y su matriz de trabajo

• en muestra total: se hacen análisis citológicos y contra muestra de estudios genétcios

• en sobrenadante: se le hacen los análisis químicos y pruebas inmunológicas

• sedimento: coloraciones y preparaciones microbiológicas, cultivos bacterias aerobios y anaerobios, micobacterias y hongos.

dato importante: en toma de muestra de cualquier líquido corporal es importante tomar más de un tubo con cantidad mínima de 3cm3

en exámen físico y citológio:

• color: incoloro, Xantocrómico

• aspecto: límpido, lig turbio, turbio, sangunolento, coagulado

• recuento celular: se realiza en cámara de neubauer

• recuento diferencial: se hace un frotis, se tiñe con wright y se hace recuento de 100 células

• exámen químico: determinación de glucosa y proteínas

• también se le hace coloración de gram, tinta china

• en cultivos: se realiza en cultivo de Agar sangre, MackConckey, Agar chocolate.

HEMOCULTIVO

El hemocultivo de anaerobios es un procedimiento microbiológico que se realiza para detectar la presencia de bacterias anaerobias en la sangre. Las bacterias anaerobias son organismos que pueden crecer en ausencia de oxígeno. Este tipo de hemocultivo es importante porque algunas infecciones causadas por bacterias anaerobias pueden ser graves y requerir un tratamiento específico.

Procedimiento de muestra:

1. Obtención de la muestra: Se toma una muestra de sangre del paciente utilizando técnicas asépticas. Generalmente, se extrae la sangre mediante venopunción, y se utiliza un par de frascos de hemocultivo para maximizar la detección de bacterias.

2. Inoculación del medio de cultivo: La muestra de sangre se inocula en un medio de cultivo especial para anaerobios. Este medio se caracteriza por tener condiciones de cultivo que favorecen el crecimiento de bacterias anaerobias, como la ausencia de oxígeno y la presencia de nutrientes específicos.

   
   

Tinción Gram: La tinción Gram es una técnica de laboratorio utilizada para clasificar bacterias en función de las características de su pared celular. Las bacterias pueden ser Gram-positivas (retienen el color violeta) o Gram-negativas (se tiñen de color rojo).

Para realizar la tinción Gram en el contexto del hemocultivo de anaerobios, se podrían seguir los siguientes pasos:

1. Se realiza un extendido de la muestra en un portaobjetos.

2. Se fija la muestra con calor suave.

3. Se aplica cristal violeta para teñir todas las bacterias.

4. Se lava el exceso de cristal violeta y se aplica yodo, formando un complejo con el cristal violeta.

5. Se lava nuevamente y se aplica alcohol o acetona para descolorar.

6. Se vuelve a lavar y se aplica safranina para teñir las bacterias restantes.

Patógenos que se pueden encontrar: En los hemocultivos de anaerobios, se pueden encontrar diversos patógenos, siendo algunos de los más comunes:

1. Bacteroides spp.: Incluye diversas especies de bacterias anaerobias Gram-negativas, que pueden causar infecciones en distintas partes del cuerpo.

2. Clostridium spp.: Otra familia de bacterias anaerobias Gram-positivas, algunas de las cuales pueden producir toxinas que causan enfermedades graves.

3. Peptococos y Peptostreptococos: Estos son microorganismos anaerobios Gram-positivos que pueden causar infecciones en diferentes sitios del cuerpo.

4. Fusobacterium spp.: Bacterias anaerobias Gram-negativas que están asociadas con infecciones de la cavidad oral y otras áreas.

• interpretación: amarillo pajizo= normal

• amarillo: presencia de bilirrubina

• verde: contaminación con meconio

• castaño: hemólisis severa

• rojizo: presencia de eritrocitos

  Aspecto:

• turbio: normal

• transparente: puede ser orina

  exámen químico

• calcio, cloruro, CO2, creatinina, glucosa, pH, K, Na, proteínas, albumina, urea, ácido úrico.

infecciones en líquido amniotico

vías de entrada

• hemtógenas

• ruptura de membrana

• en el proceso de amniocentesis

• o trabajo de parto prolongado

microorganismos usuales

• treponema pallidum

• listeria monocytogenes

• micobacterium tuberculosis

• toxoplasma gondii

• virus herpes o rubéola o VIH

• citomegalovirus.

coloracíon y cultivo

se le realiza tincón gram

• se trabaja mas que todo el sedimento líquido

• conteo de bacterias y células inmunologicas por crueces

• cultivo: agar sangre, agar chocolate, agar MacConkey y caldo nutritivo o tioglicolato

• incubación de 72 horas a 35 C°

• si hay sospecha de hongos enn agar saboraud

• sospecha de micobacterium: agar de lowestein-jensen o caldo middlebrook 7H9 o caldo ogawa

• acumulacion de liquidos en organos cercanos

  • asociados: a neoplasias, infecciones, embolia pulmonar, infarto, pancreatitis, artritis reumatoide, lupus eritematoso.

  agentes etiologicos frecuentes

• S. pheumoniae

• S. aureus

• enterobacterias

• h. influenzae

• p. aeruginosa

• anaerobios

• m. tuberculosis

líquido pericardico

proceso es la pericardocentesis

se le realiza exámen físico, no se debe realizar exámen químico ni celular porque no están muy definidos los parametros

agentes etiologicos:

virus: coxasackie A y B, influenza, adenovirus

hongos: Aspergillus, Candida sp

bacterias: S. viridans, M. tuberculosis, S. aureus, S. pneuoniae, enterobacterias

parasitos: entamoeba hystolitica, toxoplasma gondii

procedimiento: artroscentesis

contiene: glucosa, proteínas, electrolitos, ácido hialurónico

función: nutrir y lubricar

características físicas:

• incoloro

• transparente

• recuento de células: 100 a 200 células

• viscosidad: filamentos largos de ácido hialurónico

estudio microbiologico

muestra: tubo seco o jeringa sin heparina

coloración: gram, exudado directo

siembra: aerobios hongos, TBC

reporte de cultivo: negativo a las 72 horas, positivo para (nombre del microorganismo)

sobrenadante: factor reumatoide, anticuerpos, antinucleares, niveles de complemento.

líquido peritoneal

ultrafiltrado de plasma

procedimiento: paracentesis

tipos: exudado y trasudado

características físicas

color amarillo pálido

aspecto: transparente

exámenes químicos:

analitos, proteinas, albúmina, glucosa, triglicéridos, colesterol, amilasa, LDH

peritonitis primaria en niños y adultos

niños: S. pneumoniae, S. grupo A, enterobacterias, Saureus

adultos: enterobacterias, S. pneumoniae, N. gonorrhoeae, M. tuberculosis, Candida sp.

peritonitis secundaria niños y adultos

Enterobacterias(E. coli)

Streptococcus sp.

anaerobios (bacteroides, peptostreptococos, Clostridium)

se clasifican en:

líquidos, sólidos y semisólidos

pueden ser: nutritivos, enriquecidos, selectivos y diferenciales

su origen: sinteticos o naturales

medios líquidos de enriquecimiento

tioglicolato, o caldo nutritivo

medios de transporte

medio de cary blair y medio amies con carbón

Agar sangre: es un agar diferencial y enriquecido

Agar columbia: medio selectivo y diferencial y permite mejor crecimiento a microorganismos como S. pneumoniae, E. faecalis entre otros

Agar chocolate: es una variante de sangre agar, puede presentar variante de antibióticos (medio de thayerin martin)

Agar MacConkey: es un medio selectivo, con sales biliares y cristal violetta y es de diferenciacion para los microorganismos lactosa positivo y negativo

Agar MacConkey sorbitol: recomendado para aislamiento de echerichia coli O157:H7, es como agar MacConkey pero la lacotsa es sustituida por el sorbitol

Agar XLD xilosa, lisina, dexosicolato: para la diferenciacion primarioa de shiguella y salmonella

Agar salmonella/Shigella: selectivo diferencial para el aislamiento de bacilos entéricos patógenos que pertenecen al género salmonella

Agar TCBS (tiosulfato, citrato, sales biliares): favorecen el crecimiento de Vibrio Cholerae

Los priones son agentes infecciosos únicos y atípicos compuestos principalmente por proteínas mal plegadas. A diferencia de los virus, no contienen material genético, pero tienen la capacidad de inducir mal plegamiento en proteínas normales, llevando a la formación de estructuras anómalas. Este proceso conduce a trastornos neurodegenerativos graves, como la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob en humanos y la encefalopatía espongiforme bovina en ganado. La resistencia a métodos convencionales de desinfección y la falta de tratamiento efectivo hacen que los priones sean una preocupación significativa en la salud pública y la agricultura.

• SACCHAROMYCES CEREVISIAE

  • La levadura más conocida. Tiene la facultad de crecer en forma anaeróbica realizando la fermentación alcohólica.

LEVADURAS DE IMPORTANCIA

• Candida (se puede ver mucho en vías urinarias, tropismo a esa área)

• Cryptococcus neoformans (se ve en LCR, tiene tropismo)

• Malassezia furfu

• Geotrichum

• Trichosporon

• Rhodotorula spp (Imagen: R. Glutinis) 

• INFECCIONES POR LEVADURAS

  • Superficial: Limitada a la capa más externa de la piel y pelo.

  • Infecciones en mucosas: Oral, vulvovaginal, glande (Candidiasis oral)

Sistémicas:Órganos, cerebro

distribución mundial

• predominan en zonas tropicales 

• queratinofilicos 

• asociados al suelo, animales e humanos 

infecciones cutáneas

• dermatofitos, dermatofitomicosis, tiñas o tiñas, 

dermatofitomicosis o epidemoficas llamadas tambien tiñas o tiñas 

afecta areas superficiales, piel y sus anexos uñas pelos, 

son causadas por hongos parasitos de la queratina llamados dermatofitos, tambien afecta el cuero cabelludo, pie de atleta , producen casos clinicos muy variados, desde sintomas leves hasta lesiones inflamatorias intensas

agentes: microsporum, trichophyton, epidermophyton 

MICROSPORUM:

macronidios (abundantes)

paredes rugosas gruesas, fusiforme de tamaño variable multiseptadas (1-15 septos)

micronidios: sésiles, pedicilados o clavados, escasos o ausentes 

TRICHOPYTON 

macroconidios 

microconidios (abundantes)

racimos de uvas 

EPIDERMOPHYTON
macronidios ampliamente clavados extremos clavadas extremas redondeadas y no tendran microconidias 

se clasifican en

• micosis sitemicas por hongos

• micosis oportunistas

las micosis sistemicas son producidad por hongos verdaderos

• histoplasmosis

• blastomicosis norteamericana

• paraccocidioidomicosis

• coccidioidomicosis

especímes clínicos,

• secreción vías respiratorias bajas

• secrecíon heridad

• biopsias

• orina

muestras de piel: método de raspado

método de cinta, tinción con azul de lactofenol o azul algodón.

muestras de uñas: utilización de bisturís o pinzas, recuperando la mayor cantidad de material posible de las uñas.

lesiones den la piel o nódulos: toma de muestra drealizada por un médico, se puede utilizar bisturís, cucharillas para ir extrayendo el material del sitio de la lesión.

muestras de fluidos biólogicos

• liquidos biologicos: sedimento

• tejidos: cortes de tejido

• exudado: aspiración directo, hisopado: directo.

técnicas de tinción en micología

• tinta china

• preparación de KOH

• coloración Giemsa

Cultivo: agar glucosado Sabouraud

• agar mycosel

• agar sangre

• fonsecaea pedroso: cromomicosis

• phialosphora verrucosa

• cladosporium carrionii

• exophiala

• E. jeanselmei patógeno: es un hongo oportunista.

  1. esporotricosis: enfermedad ocupacional para granjeros, cultivadores de rosas, trabajadores de viveros.

agente: Sporothrix schenckii.

1. Eumicetomas:

   • Agentes Causales: Diversos hongos, como Madurella, Scedosporium, Pseudallescheria, entre otros.

   • Características: Son infecciones crónicas que afectan principalmente las extremidades, causando la formación de masas granulomatosas. Las eumicetomas suelen resultar de la implantación traumática de esporas fúngicas en la piel.

2. Feohifomicosis:

   • Agentes Causales: Diversos hongos dematiáceos, como Exophiala, Cladophialophora, y Bipolaris.

   • Características: Infecciones cutáneas o subcutáneas causadas por hongos pigmentados. Pueden presentar una variedad de manifestaciones clínicas, desde lesiones cutáneas hasta enfermedad sistémica en casos más graves, especialmente en individuos inmunocomprometidos.

3. Hialohifomicosis:

   • Agentes Causales: Hongos de características hialinas, como Fusarium, Scopulariopsis, y Acremonium.

   • Características: Infecciones causadas por hongos que presentan hifas hialinas. Estas pueden afectar la piel, las uñas o incluso invadir tejidos más profundos. Las manifestaciones clínicas varían según el agente causal y la inmunidad del huésped.

4. Zigomicosis:

   • Agentes Causales: Hongos del filo Zygomycota, como Rhizopus, Mucor, y Absidia.

   • Características: Infecciones invasivas causadas por hongos que suelen afectar a personas inmunocomprometidas. Pueden presentar manifestaciones cutáneas, pulmonares o sistémicas. La enfermedad puede progresar rápidamente y tener consecuencias graves si no se trata adecuadamente.

Cromoblastomicosis:

• Agente Causal: Diversos hongos dematiáceos del género Fonsecaea, Cladophialophora, y otros.

• Características: Infección crónica de la piel, adquirida principalmente por traumatismos con material vegetal. Se caracteriza por la formación de lesiones verrugosas y nodulares, principalmente en las extremidades.