DNA, o revelador da verdade by Antonio Santos https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8 Técnicas de identificação de um criminoso através da análise e comparação de amostras de DNA en-us 2018-10-13 14:23:09 UTC 2025-12-02 23:44:52 UTC hello@padlet.com antoniots784 https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292426571 Através desta atividade, pretendemos:
- Compreender a estrutura da molécula do DNA
- Entender o seu papel na regulação das características de um organismo
- Contactar com técnicas laboratoriais que permitem o reconhecimento de um indivíduo através do seu DNA
- Perceber o que realmente acontece numa cena do crime.]]> 2018-10-13 14:35:34 UTC https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292426571 antoniots784 https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292426918 2018-10-13 14:38:51 UTC https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292426918 antoniots784 https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292426920 2018-10-13 14:38:52 UTC https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292426920 antoniots784 https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292426926 2018-10-13 14:38:55 UTC https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292426926 antoniots784 https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292426929 2018-10-13 14:38:59 UTC https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292426929 antoniots784 https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292426965 2018-10-13 14:39:24 UTC https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292426965 antoniots784 https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292427073 2018-10-13 14:40:32 UTC https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292427073 Extração de DNA a partir de sangue (Método de Chelex) antoniots784 https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292427490 1- Utilizar uma zaragatoa para recolher uma amostra de sangue;

2- Cortar a ponta da zaragatoa para um microtubo;
3- Adicionar 1000 μL de água destilada e, de seguida, colocar no agitador durante 20 minutos;
4- Centrifugar a 14 000 rpm por 15 minutos;
5- Recolher, com uma pipeta, o sobrenadante e descartá-lo;
6- Adicionar ao "pellet" (depósito) de 100 μL de Solução de Chelex (5%);
7- Colocar banho térmico a 56 ºC, durante 30 minutos;
8- Após esse tempo colocar em banho a 100 ºC por 10 minutos;
9- Centrifugar a 14 000 rpm por 15 minutos;
10- Recolher o sobrenadante, através do uso de uma pipeta;
11- Armazenar a 4 ºC para preservar o ADN.


 
]]> 2018-10-13 14:44:33 UTC https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292427490 Preparação das amostras de DNA antoniots784 https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292430025 1- Cada grupo possuí um microtubo colorido e um frasco de vidro com DNA de um suspeito;
2- Adicionar 10 μL de amostra de ADN em cada microtubo;
3- Colocar 10 μL da mistura de enzimas(EcoRI/PstI); 
4- Pôr os microtubos na estufa a 37ºC, durante 45 minutos;
5- Retirar os microtubos da estufa e proceder à etapa seguinte;]]> 2018-10-13 15:10:12 UTC https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292430025 Eletroforese e observação dos resultados antoniots784 https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292434062 1- No gel de agarose(1%), que se encontra na tina de eletroforese, carregar as amostras com o DNA da cena do crime, do supeito 1, do 2, do 3, do 4 e do 5;
2-fechar a tina de eletroforese e ligar a fonte de alimentação;
3- Programar a fonte para 100V durante 30 minutos;
4- Desligar a fonte de alimentação e proceder à revelação do gel de agarose com solução de Fast Blast DNA Stain(100x); 
5- Observar/interpretar os resultados.

]]> 2018-10-13 15:54:37 UTC https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292434062 antoniots784 https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292443170 Após este último procedimento, acabámos por descobrir que o culpado era o suspeito 3. Isto uma vez que os seus fragmentos de DNA correspondiam com os da amostra da cena do crime.]]> 2018-10-13 17:22:51 UTC https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292443170 antoniots784 https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292443995 2018-10-13 17:30:36 UTC https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292443995 antoniots784 https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292444242 Primeiramente, acerca da recolha da impressão digital, os resultados obtidos não foram os mais nítidos devido à presença de suor na nossa impressão.]]> 2018-10-13 17:33:13 UTC https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292444242 antoniots784 https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292444251 2018-10-13 17:33:21 UTC https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292444251 Recolha de Impressões Digitais antoniots784 https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292445820 1- Passar os dedos na zona do nariz e/ou testa;
2- Colocar os dedos numa superfície clara;
3- Com a ajuda de um pincel, espalhar um pó negro (carvão em pó), gentilmente, cobrindo a superfície;
4- Retirar os excessos de pó;
5- Aplicar fita-cola nas impressões de modo a que estas fiquem sem bolhas de ar;
6- Retirar a fita-cola e observar os resultados]]> 2018-10-13 17:50:08 UTC https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292445820 Discussão antoniots784 https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292447404 - Relativamente à recolha das impressões digitais, a passagem dos dedos no nariz e/ou testa deve-se ao facto de estas serem partes gordurosas, facilitando assim , a recolha das impressões. De seguida, o usou-se o pó negro, pois a superfície era clara (se essa fosse escura, recorria-se a um pó branco, como o giz ou o gesso). ]]> 2018-10-13 18:06:23 UTC https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292447404 antoniots784 https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292448156 - Quanto à recolha do DNA do sangue, foi cortada uma porção de zaragatoa para que esta coubesse no microtubo. Por outro lado, a adição da água destilada deveu-se à necessidade de aumentar volume da amostra, visto que a quantidade de sangue na zaragatoa era muita pequena. Após isto, de modo a separar os conteúdos do microtubo, foi preciso colocá-lo na centrifugadora, pelo que, para balançar o peso, colocou-se outro microtubo  no lado oposto ao do original. Depois, descartou-se o liquido sobrenadante, uma vez que para extrair o DNA, usamos os leucócitos, que devido a sua elevada densidade, afundaram. Para concluir, usou-se o banho térmico para incubar esta solução e guardá-la a 4 ºC para impedir mudanças na amostra.

]]> 2018-10-13 18:14:52 UTC https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292448156 antoniots784 https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292450286 - Na preparação das amostras, são usadas duas enzimas distintas para minimizar a chance de erro. Estas têm a capacidade de reconhecer uma sequência específica de nucleótidos do DNA, fragmentando-a. As enzimas encontram-se, como se sabe, no nosso corpo. Daí, elas foram colocadas na estufa a 37ºC para simular a temperatura corporal humana.]]> 2018-10-13 18:37:26 UTC https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292450286 antoniots784 https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292451246 - Antes da eletroforese, preparou-se uma solução de 1% de agarose e, enquanto que esta solidificava, colocou-se um "pente", de modo a formar-se poços. Estes encontravam-se próximos do polo negativo, contendo os fragmentos de DNA tingidos (corados pelo brometo). Estes, quando recebem energia, migram do polo negativo para o positivo, uma vez que existe repulsão entre os fragmentos de DNA e o polo negativo da máquina. Para além da repulsão, existe uma força de atração entre os fragmentos de DNA e o polo positivo (visto que o DNA apresenta carga negativa, devido ao grupo fosfato). Tendo isto em conta, quanto maior for o fragmento, mais dificuldade apresenta a atravessar o gel, percorrendo, por isso, uma menor distância.]]> 2018-10-13 18:47:34 UTC https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292451246 Conclusão antoniots784 https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292459434 - Esta atividade permitiu estabelecer a ponte entre a teoria e a prática, pelo que, os objetivos iniciais foram alcançados.]]> 2018-10-13 20:04:27 UTC https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292459434 antoniots784 https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292460941 2018-10-13 20:19:02 UTC https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292460941 antoniots784 https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292461020 2018-10-13 20:20:08 UTC https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292461020 antoniots784 https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292461255 2018-10-13 20:22:42 UTC https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292461255 antoniots784 https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292461681 2018-10-13 20:28:40 UTC https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/292461681 antolifer https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/294600271 2018-10-18 20:14:28 UTC https://padlet.com/antoniots784/n2z2xu7ar0l8/wish/294600271