Monosacáridos:triosas (3C), tetrosas (4C), pentosas (5C), hexosas (6C), heptosas (7C) y octosas (8C).

Tipo de enlaces:Tiene enlaces glicosídicos α-(1→4) y α-(1→6)

extremo reductor:Es el extremo de la cadena polisacarídica que contiene el C anomérico libre esto quiere decir que no forma parte de un enlace glucosídico,se conoce como extremo reductor en este caso  en el glucógeno Solo hay un extremo reductor, que se encuentra en el carbono 1 que únicamente no forma enlace con otra glucosa en la primera molécula de glucosa a partir de la cual comienza la síntesis de este glucógeno.

función:Es el proceso más veloz y completo en las células musculares y su función principal es sintetizar el glucógeno para obtener glucógeno puro.

Mediante los resultados obtenidos se indicará el rendimiento y porcentaje del glucógeno por cada gramo de tejido:

Cálculo porcentual del glucógeno puro en 25 mg del precipitado obtenido a partir de 4g de hígado utilizado como muestra:

                      mg precipitado x % glucógeno

glucógeno puro (mg) =________________________________= 9,257 mg

                                   100 mg

                                 

                mg de glucógeno puro

Rendimiento = _______________________  = 2,04 mg  glucógeno puro/g

                g de hígado muestra

Se sabe de la existencia de diversas enzimas que catalizan hidrólisis más específicas, por ejemplo, la α-amilasa de la saliva humana.Cataliza la hidrólisis rápida de los enlaces internos α(1-4). No hidrolizan, en cambio, los enlaces α(1-6) ni la maltosa. Los productos finales de la degradación del glucógeno por la α-amilasa son glucosa, maltosa e isomaltosa. Esta hidrólisis se sigue igual que la ácida, es decir, mediante la reducción de 3’-5’- dinitrosalicílico a 3-amino-5-dinitrosalicílico (producto coloreado que absorbe a 540 nm). 

El glucógeno puede separarse de los monosacáridos y de los compuestos que se precipitan con el alcohol, por que los polisacáridos son mucho menos solubles en alcohol acuoso que los monosacáridos; y mediante cada uno de estos pasos se permitió el análisis para la determinación del grado de pureza de la preparación obtenida.

La hidrólisis de estos enlaces glucosídicos pueden ser catalizados por minerales, que permiten la disyunción de los enlaces que posteriormente permitirán la posible formación de los oligosacáridos y la conversión final de estos en glucosa.

 Es una disolución azulada de cobre que se utiliza para detectar la presencia de azúcares reductores: aldehídos, alfa-hidroxi-cetonas y hemicetales.

Es una solución amortiguadora e isotónica, cuya función es mantener el pH y la presión osmótica lo más parecido al ambiente biológico natural.

Es una disolución acuosa del gas cloruro de hidrógeno (HCl). Es muy corrosivo y ácido. Se emplea comúnmente como reactivo químico y se trata de un ácido fuerte que se disocia completamente en disolución acuosa. Una disolución concentrada de ácido clorhídrico tiene un pH inferior a 1; una disolución de HCl 0,1 M da un pH de 1.

El hidróxido de sodio es un sólido blanco e industrialmente se utiliza como solución al 50 % por su facilidad de manejo. Es soluble en agua, desprendiéndose calor. Absorbe humedad y dióxido de carbono del aire y es corrosivo de metales y tejidos. 

Es usado en síntesis, en el tratamiento de celulosa para hacer rayón y celofán, en la elaboración de plásticos, jabones y otros productos de limpieza, entre otros usos.

1. Pesar 4 g de hígado de pollo, macerarlo en mortero e introducirlo a un tubo de ensayo 

2. Añadir al macerado de hígado 3 ml de solución de hidróxido de potasio al 30% 

3. Calentar la mezcla en un baño de agua hirviendo durante 20 min con MUCHO CUIDADO 

4. Enfriar el tubo una vez acabada la digestión (comprobar con el dorso de la mano) 

5. Añadir 0.2 ml de solución saturada de Na2SO4 y mezclar fuertemente

6. Reposar por 5 min 

7. Añadir 7 ml de etanol al 95% para precipitar el glucógeno 8. Agitar y dejar en hielo por 5 min 

9. Pasar la solución a un tubo cónico y centrifugar a 5000 x g durante 5 min 

10. Desechar el sobrenadante y colocar el tubo invertido sobre papel secante 

11. Añadir 5 ml de TCA al 10% y disolver totalmente el sedimento agitando fuertemente. 

12. Centrifugar a 5000 x g por 5 min 

13. Pesar un tubo cónico de plástico junto con su tapa y anotar el peso 

14. Añadir el sobrenadante obtenido en la centrifugación al tubo cónico previamente pesado 

15. Agregar 10 ml de etanol al 95% y dejar reposar por 5 min para precipitar el glucógeno 

16. Centrifugar durante 5 min a 5000 x g 

17. Desechar el sobrenadante y dejar secar en la estufa a 37oC hasta su utilización. 

18. Pesar el glucógeno purificado y determinar que % de glucógeno obtuvo, teniendo en cuenta que partió de 4 g de hígado. 

Avante Valencia Rosa Laura

Castillo Cordova Zeltzin Xochiketzalli

2. Se preparan 8 tubos de ensayo y se marcan del 1 al 8. Se añaden a cada uno de ellos el glucógeno (excepto al primero que lleva agua) y la solución de HCl 
incubación. 

3. Se colocan los tubos 3 a 8 en un baño de agua hirviendo para que 3.1.2. Se colocan los tubos 3 a 8 en un baño de agua hirviendo para que transcurra la reacción. Los tubos 1 y 2 no se meten en el baño. A los transcurra la reacción. Los tubos 1 y 2 no se meten en el baño. A los tiempos indicados en la Tabla 1, se saca cada tubo y se le añade el

tiempos indicados en la Tabla 1, se saca cada tubo y se le añade el NaOH, que neutraliza la acción del HCl, y por tanto se detiene la NaOH, que neutraliza la acción del HCl, y por tanto se detiene la hidrólisis. Se agita fuertemente. 

hidrólisis. Se agita fuertemente. 

4. Se dejan reposar los tubos en una gradilla a temperatura ambiente 3.1.3. Se dejan reposar los tubos en una gradilla a temperatura ambiente hasta que concluye la última incubación. 

3.1.4. Se añade el reactivo 3’5’DNS a todos los tubos y se introducen de nuevo en el baño hirviendo durante 5 minutos. En estas condiciones, el 3’5’DNS reacciona con los grupos reductores y se convierte en 3- amino-5-dinitrosalicílico. 

3.1.5. Pasado este tiempo, se enfrían con agua del grifo. 

hasta que concluye la última incubación. 

5. Para el siguiente paso se requiere del control positivo que es 1 ml de la solución de glucosa mezclada con la cantidad indicada del reactivo de Benedict 

6. Se añaden 2.5 ml del reactivo de Benedict a todos los tubos y se introducen de nuevo en el baño hirviendo durante 5 minutos. 7. Pasado este tiempo, se enfrían y se observan cualitativamente los tubos que presentan una reacción de Benedict positiva, esto es la formación de un precipitado rojo, naranja o verdoso