Técnicas de Diagnóstico by Isabelle Bahri Pereira https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c en-us 2024-11-15 16:45:25 UTC 2024-11-18 17:00:12 UTC hello@padlet.com Sequenciamento de Nova Geração: Ion Torrent bahripereiraisabelle https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3219288324 Ion Torrente: Detecta mudanças de pH durante a incorporação de nucleotídeos. É um exemplo de plataforma do NGS.

]]> 2024-11-15 17:00:37 UTC https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3219288324 Aplicações do NGS bahripereiraisabelle https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3219306907

  • Medicina personalizada;

  • Pesquisa do cancêr;

  • Microbiologia;

  • Genômica populacional;

  • Descoberta de novos genes e RNAs

    • ]]>     2024-11-15 17:15:59 UTC https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3219306907     Sequenciamento de Nova Geração: Illumina bahripereiraisabelle https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3219315747 Illumina: Líder no mercado quando se trata em plataformas do NGS, conhecida pelo sequenciamento por síntese.

    ]]>     2024-11-15 17:23:29 UTC https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3219315747     Sequenciamento de Nova Geração bahripereiraisabelle https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3219322998 Passos do NGS

    1° Preparação da biblioteca;

    2° Fixação dos fragmentos;

    3° Sequenciamento;

    4° Análise computacional;


    ]]>     2024-11-15 17:30:01 UTC https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3219322998     Sequenciamento de Nova Geração bahripereiraisabelle https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220831194 É um sequenciamento do DNA que pode sequenciar simultaneamente um grande número de fitas de DNA.

    ]]>     2024-11-17 19:45:47 UTC https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220831194     Hibridização de Ácidos Nucleicos (FISH - Fluorescence In Situ) https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220859240 2024-11-17 20:38:52 UTC https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220859240 https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220861011 Passos do FISH

    1° Marcação da sonda

    2° Desnaturação

    3° Hibridização

    4° Detecção da sonda

    5° Visualização no microscópio

    ]]>     2024-11-17 20:41:36 UTC https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220861011     Descrição da técnica FISH https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220863194 É um método molecular caracterizado pela identificação e localização de ácidos nucleicos alvo, através da ligação complementar de sondas (sequências de DNA conhecidas) marcadas com moléculas fluorescentes (fluorocromos).

    ]]>     2024-11-17 20:45:48 UTC https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220863194     Vantagens do NGS bahripereiraisabelle https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220870734

  • Alto rendimento;

  • Flexibilidade;

  • Custo-Beneficio;

  • Precisão e Sensibilidade.

    • ]]>     2024-11-17 20:57:18 UTC https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220870734     Aplicações do FISH https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220883003

  • Avaliar a expressão do HER-2

  • Detectar amplificação N-MYC em tumores

  • Diagnosticar infecções virais, como o papiloma vírus humano (HPV) 

  • Analisar danos cromossomais 

  • Mapear genes

    • ]]>     2024-11-17 21:22:17 UTC https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220883003     Microarranjos (Array-CGH-Comparative Genomic Hybridization) bahripereiraisabelle https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220896905 Técnica baseada na hibridização diferencial de DNA que compara o genoma de uma amostra teste com um genoma de referência. A ideia central é identificar regiões do DNA onde há diferenças quantitativas no número de cópias, sem a necessidade de uma análise morfológica direta dos cromossomos.

    ]]>     2024-11-17 21:55:59 UTC https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220896905     Methylation-Specific PCR (MSP) samattenhauer https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220902874 O PCR específico para metilação, também conhecido como MSP, é um método usado para escanear o DNA para alterações feitas ao DNA através de ilhas CPG. Uma ilha CPG é uma citosina seguido por uma guanina.

    ]]>     2024-11-17 22:09:09 UTC https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220902874     Aplicações do Array-CGH https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220909471

  • Diagnóstico de síndromes genéticas

  • Análise de anomalias cromossômicas, como ganhos (duplicações) ou perdas (deleções) de segmentos cromossômicos.

    • ]]>     2024-11-17 22:22:33 UTC https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220909471     Aplicação do MSP samattenhauer https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220914814

  • Pesquisa em Câncer

  • Diagnóstico de Doenças Genéticas

  • Epigenética e Regulação Gênica

  • Medicina Forense

  • Pesquisa em Doenças Neurológicas

  • Avaliação de Biomarcadores

    • ]]>     2024-11-17 22:32:59 UTC https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220914814     Passo a Passo do MSP samattenhauer https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220919755 1º Isolamento de DNA

    2º Tratamento com Bisulfito de Sódio

    3º Design de Primers

    4º Amplificação por PCR

    5º Detecção e Análise



    ]]>     2024-11-17 22:44:07 UTC https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220919755     FISH https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220934945 (a) Sonda de DNA e sequência alvo são os elementos básicos do FISH.

    (b) A sonda de DNA é marcada.

    (c/d) Processo desnaturado-anelado-desnaturado para hibridizar o DNA alvo e a sonda.

    (e) O sinal alvo é visualizado por microscopia de fluorescência. Isso permite a determinação de análise qualitativa, quantitativa e de localização relativa da sequência de ácido nucleico.

    ]]>     2024-11-17 23:13:04 UTC https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220934945     Como ler o resultado samattenhauer https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220961821

  • Se a metilação ocorrer no promotor do gene alvo, isso nos dará uma banda na faixa 'M' da amostra do paciente. 

  • Se não, isso nos dará uma banda de DNA na faixa 'U' do gel, assim como a amostra normal

    • ]]>     2024-11-17 23:52:33 UTC https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220961821     Princípio da MS-PCR samattenhauer https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220969593

  • Em princípio, o tratamento com bissulfito converte a citosina não metilada em uracila, que é detectada pelo conjunto de primers específicos para DNA não metilado. 

  • Ao contrário, o DNA metilado permanece sem tratamento com o bissulfito e pode ser detectado pelo conjunto de primers específicos para DNA metilado. Usando um ensaio de eletroforese em gel de agarose convencional, ou ensaio qPCR, o estado de metilação pode ser determinado.


    • ]]>     2024-11-18 00:01:47 UTC https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3220969593     PCR em Tempo Real https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3221349376 É uma técnica molecular para amplificação e quantificação de DNA em tempo real. Amplamente utilizado em diagnóstico clínico e pesquisa, permite monitorar o progresso da evidência de amplificação ciclo a ciclo

    ]]>     2024-11-18 03:55:12 UTC https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3221349376     PCR em tempo real https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3221354337 -Obtém-se DNA ou RNA da amostra. Para RNA, realiza-se a transcrição reversa (RT-qPCR) para convertê-lo em DNA complementar (cDNA).

    -Inclui primers específicos, DNA alvo, nucleotídeos, corantes e corantes/sondas fluorescentes.

    -O DNA é amplificado em três etapas: desnaturação, anelamento e extensão.

    -Utiliza marcadores fluorescentes para monitorar o processo em tempo real.

    -Permite quantificar o DNA de forma precisa, seja de forma absoluta ou relativa

    ]]>     2024-11-18 03:58:12 UTC https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3221354337     PCR em tempo real, principais aplicações: https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3221373022 Diagnóstico Clínico

    • Detecção de doenças infecciosas:

      -SARS-CoV-2 (COVID-19) – detecção do RNA viral.

      -HIV – monitoramento da carga viral.

      -Influenza e dengue – diagnósticos rápidos e sensíveis.

    • Detecção de mutações genéticas associadas a doenças:

      -Identificação de alterações em genes do câncer de mama e câncer de pulmão

    ]]>     2024-11-18 04:14:31 UTC https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3221373022     Passo a passo do Array-CGH samattenhauer https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3222091191

  • Isolamento de DNA

  • Fragmentação do DNA

  • Marcação do DNA

  • Hibridização

  • Lavagem e Secagem

  • Leitura e Análise

    • ]]>     2024-11-18 12:21:10 UTC https://padlet.com/bahripereiraisabelle/iax97kkrfv4ffp3c/wish/3222091191