PCR ANIDADA by Giselle Marquina https://padlet.com/marquinalujan03/i7kmjs0ve43mcccs Laboratorio de Genetica en-us 2022-02-23 23:52:41 UTC 2022-02-24 06:07:34 UTC hello@padlet.com PCR Anidada. marquinalujan03 https://padlet.com/marquinalujan03/i7kmjs0ve43mcccs/wish/2063570508 Es una variante de la PCR básica que utiliza dos pares de cebadores. En un primer paso, se realiza la amplificación de la región genómica, seguida de una segunda amplificación más específica para especificar aún más esta región. 
Aunque la PCR es muy sensible, en ocasiones hay muy poco ADN específico (el que queremos 
detectar) en la muestra a analizar, y hay que hacer una segunda amplificación empleando el 
primer producto de amplificación como molde. Esta técnica se llama PCR anidada y emplea dos 
parejas de primers, una externa y otra interna a la primera. Una característica de esta técnica es 
que tras la primera amplificación (20 ciclos), el producto se diluye, pudiendo eliminar así 
inhibidores presentes en la muestra original. Por otra parte, tiene el inconveniente de que, al 
necesitar mayor manipulación, hay mayor riesgo de contaminación con ADN extraño.]]> 2022-02-24 00:06:51 UTC https://padlet.com/marquinalujan03/i7kmjs0ve43mcccs/wish/2063570508 Usos y Aplicaciones marquinalujan03 https://padlet.com/marquinalujan03/i7kmjs0ve43mcccs/wish/2063851982 La PCR anidada evaluada en este estudio es una herramienta valiosa y complementaria para el diagnóstico de la histoplasmosis en pacientes con SIDA, utilizando muestras de médula ósea. Los resultados obtenidos deben ser interpretados tomando en cuenta aspectos epidemiológicos y la sintomatología clínica del paciente, siendo útil para predecir con éxito la ausencia de la enfermedad, sobre todo en regiones con elevada prevalencia.]]> 2022-02-24 04:02:46 UTC https://padlet.com/marquinalujan03/i7kmjs0ve43mcccs/wish/2063851982 ¿Qué se necesita para hacer un PCR Anidada? marquinalujan03 https://padlet.com/marquinalujan03/i7kmjs0ve43mcccs/wish/2063872937 1.Buffer de amplificación
2. Mezcla de dNTP
3.Cebadores oligonucleotidos externos
4.ADN polimersa termoestable
5. H2O
6. Plantilla ADN ]]> 2022-02-24 04:21:41 UTC https://padlet.com/marquinalujan03/i7kmjs0ve43mcccs/wish/2063872937 Sensibilidad y Especifidad marquinalujan03 https://padlet.com/marquinalujan03/i7kmjs0ve43mcccs/wish/2063926842
  • Sensibilidad: se refiere a la cantidad mínima de ADN necesaria para que se produzca la amplificación, es decir, para obtener una banda. Se relaciona con los falsos negativos, ya que puede que una muestra sea positiva pero sea dada como negativa porque no se ha amplificado por no tener suficiente cantidad de ADN.
  • Especificidad: se refiere a la obtención de un solo producto amplificado. Viene determinada por los oligos y la especificidad con la que se unen al ADN molde. De esta forma, si los oligos tienen más de un sitio al que se pueden unir aparecerá más de un producto amplificado. Se relaciona con los falsos positivos, ya que puede que una muestra sea negativa pero sea dada como positiva porque se ha amplificado una región de ADN no diana o que no se buscaba amplificar.

    • ]]>     2022-02-24 05:09:46 UTC https://padlet.com/marquinalujan03/i7kmjs0ve43mcccs/wish/2063926842     Eficiencia y Fidelidad marquinalujan03 https://padlet.com/marquinalujan03/i7kmjs0ve43mcccs/wish/2063929173
  • Eficiencia: se refiere a la amplificación máxima que se puede obtener en un número determinado de ciclos.
  • Fidelidad: se refiere a los errores que comete la ADN polimerasa durante la amplificación. Este concepto es de especial importancia en la secuenciación, pero en otros casos no es tan importante. Una buena fidelidad permite evitar falsos positivos y/o negativos.

    • ]]>     2022-02-24 05:12:09 UTC https://padlet.com/marquinalujan03/i7kmjs0ve43mcccs/wish/2063929173     Desventajas y Ventajas de su uso. marquinalujan03 https://padlet.com/marquinalujan03/i7kmjs0ve43mcccs/wish/2063938659 En este tipo de PCR tiene la ventaja de brindar alta sensibilidad y especificidad.
    La desventaja de esta técnica es que no nos permiten cuantificar la muestra.]]>     2022-02-24 05:21:44 UTC https://padlet.com/marquinalujan03/i7kmjs0ve43mcccs/wish/2063938659     Referencias Bibliográficas marquinalujan03 https://padlet.com/marquinalujan03/i7kmjs0ve43mcccs/wish/2063952794 Aguas, I. [ Iván Aguas]. (2019, 19 octubre). EVALUACIÓN DE LA PCR ANIDADA EQUIPO 10 [Vídeo]. YouTube. https://www.youtube.com/watch?v=Y8SFP2tJHko&t=101s

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    Mauricio Ricardo Diaz Berrios 20131017159]]>     2022-02-24 05:46:47 UTC https://padlet.com/marquinalujan03/i7kmjs0ve43mcccs/wish/2063963008