TECNICA RT-PCR by Ana Karen Cisneros Lopez https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a JAVIER ALVAREZ, ANA KAREN CISNEROS, ANTONIA FELICIANO en-us 2020-10-02 02:00:33 UTC 2024-06-02 18:47:53 UTC hello@padlet.com https://padlet.net/icons/png/1f52c.png PCR (Reacción en cadena de la polimerasa) karem98cislop https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801171767 Técnica de amplificación de DNA. En 1983, Kary Mullis]]> 2020-10-04 19:50:25 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801171767 RT-PCR karem98cislop https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801172639 Utiliza transcriptasa inversa para convertir ARN en ADN para usar en una reacción en cadena de la polimerasa.

]]> 2020-10-04 19:51:23 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801172639 karem98cislop https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801177688 La PCR depende del uso de ADN termoestable, polimerasas que pueden soportar múltiples ciclos de desnaturalización de la plantilla. ]]> 2020-10-04 19:56:34 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801177688 1. Desnaturalización karem98cislop https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801182186 Se rompen los puentes de hidrogeno y se obtienen 2 hebras. Temperatura 94°-98°C.]]> 2020-10-04 20:01:17 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801182186 PCR karem98cislop https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801186850 Kary Mullis
Recibió Premio Nobel de Química.]]> 2020-10-04 20:06:21 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801186850 Hebra Molde karem98cislop https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801193050 Las ADN polimerasas requieren una hebra molde con un cebador que contiene un hidroxilo 3 'para comenzar la extensión de la hebra ]]> 2020-10-04 20:12:51 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801193050 2. Cebadores karem98cislop https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801197841 Señala la secuencia que se requiere. Se ocupan 2 cebadores ADN polimerasa termoestable y dNTP. Proporciona un grupo hidroxilo.]]> 2020-10-04 20:18:33 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801197841 "Molécula plantilla" o simplemente "Plantilla" karem98cislop https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801198834 Calentamiento del objetivo, a cerca de 100 ° C en un tampón apropiado causa desnaturalización térmica a medida que las hebras de la plantilla se derriten aparte de cada otros.]]> 2020-10-04 20:19:48 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801198834 Enfriamiento rápido karem98cislop https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801207017  Al recocido temperatura (o T) del par cebador / plantilla y un gran molar]]> 2020-10-04 20:28:07 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801207017 karem98cislop https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801211098 El exceso de la imprimación sintética corta cinéticamente activa asegura que una molécula de cebador encuentra y hibrida apropiadamente a su secuencia dada complementaria más rápidamente que la original

]]> 2020-10-04 20:32:25 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801211098 karem98cislop https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801213720 extensión ocurrirá hasta que la polimerasa sea expulsada del
plantilla o alcanza el extremo 5 'de la molécula plantilla y efectivamente se queda sin plantilla para copiar.

]]> 2020-10-04 20:35:23 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801213720 3. Extensión karem98cislop https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801219027 Entra el ADN polimerasa y comienza a construir la nueva copia de DNA.]]> 2020-10-04 20:41:13 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801219027 Resultado karem98cislop https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801221535 1000 bases por 1 minuto.]]> 2020-10-04 20:44:15 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801221535 El ingenio de la PCR karem98cislop https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801271030 surge de incorporar simultáneamente un
cercano segundo cebador de polaridad opuesta  y luego sometiendo la mezcla de plantilla, dos cebadores,  ADN polimerasa termoestable y dNTP  que contiene tampón de polimerasa a ciclos repetidos de calor
desnaturalización, hibridación y extensión del cebador. ]]> 2020-10-04 21:40:32 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801271030 SUBIENDO LA TEMPERATURA, DESNATURALIZACION karem98cislop https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801291630 Detiene el proceso de elongación del cebador y
desplaza las polimerasas y hebras recién creadas. Las hebras de ADN simples y cortas recién formadas sirven como un sitio de hibridación por su cebador de polaridad opuesta ]]> 2020-10-04 22:05:46 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801291630 En este segundo ciclo térmico karem98cislop https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801296550 la extensión de los cebadores procede sólo hasta donde la plantilla
existe, es decir, el extremo 5 'de la secuencia del cebador opuesta. los
El proceso ahora ha hecho ambas hebras del corto, definido, precisamente secuencia de ADN de cebador a cebador ]]> 2020-10-04 22:11:30 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801296550 "Amplificación de secuencia" karem98cislop https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801300975 productos de la extensión de cada imprimación de la plantilla original
molécula con cada ciclo, estos productos se acumulan de forma lineal
y son rápidamente superados en número por el cebador a cebador definido producto, conocido como amplicón. ]]> 2020-10-04 22:16:51 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801300975 cebador a cebador (el "amplicón") karem98cislop https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801304530 . ]]> 2020-10-04 22:20:38 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801304530 Siglos impulsados por la termodinámica karem98cislop https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801306300 2020-10-04 22:22:42 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801306300 Diseño de imprimación karem98cislop https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801318567 Utilizar de una polimerasa termoestable, diferentes fuentes de enzimas con diferentes propiedades (p. ej., actividades de exonucleasa para una mayor precisión) inclusión de cationes divalentes como Mg 
 
]]> 2020-10-04 22:37:26 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801318567 Condiciones para lograr PCR bueno karem98cislop https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801332250 40 marcas de ciclos térmicos un límite efectivo para una reacción de PCR con una buena cinética en el presencia de la plantilla apropiada más allá de estos aumenta principalmente la probabilidad de producción de productos raros e incorrectos.

]]> 2020-10-04 22:53:20 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/801332250 Diferentes técnicas utilizadas para detección de productos de PCR karem98cislop https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/804722401 Las "técnicas de punto final"  incluyen electroforesis en gel y
Tinción específica de ADN. (simple pero efectiva para rápidamente visualizar se produjo un amplicón )]]> 2020-10-05 20:37:45 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/804722401 Hibridación de productos de PCR en microarrays karem98cislop https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/804764868 Las matrices de perlas de suspensión se pueden utilizar para detectar amplicones específicos ]]> 2020-10-05 20:57:54 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/804764868 Métodos para el etiquetado de Amplicones, karem98cislop https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/804785241 incluyendo quimioluminiscencia, fluorescencia y electroquímica

]]> 2020-10-05 21:07:28 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/804785241 Detección de ADN o ARN en las muestras javieralvarez1397 https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/804865741 método más simple para la detección de PCR en tiempo real es
basado en el uso de tintes que se unen selectivamente y se vuelven
fluorescente en presencia de ADN de doble hebra, como
SYBR verde. 

]]> 2020-10-05 21:56:05 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/804865741 Falso resultado javieralvarez1397 https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/804874575 2020-10-05 22:02:00 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/804874575 FRET (transferencia de energía resonante de fluorescencia) javieralvarez1397 https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/804880178 2020-10-05 22:05:28 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/804880178 Hibridación javieralvarez1397 https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/804889548 2020-10-05 22:11:41 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/804889548 Comparación y resultados de PCR javieralvarez1397 https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/804899204 la sección interna puede ser cualquier secuencia de una secuencia general

longitud, lo que conduce directamente a aplicaciones para las que un producto de PCR

para una región conocida por variar entre especies (o incluso entre individuos) pueden producirse y someterse a un análisis de secuencia para identificar la especie (o identidad individual, en el último caso) del plantilla de muestra. 
]]> 2020-10-05 22:18:39 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/804899204 PCR en la actualidad javieralvarez1397 https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/804903305 Los biólogos han hecho uso de la PCR para amplificar el ADN de
muestras conservadas, como insectos encerrados en millones de años, con posterior secuenciación y análisis filogenético,
arrojando resultados fascinantes sobre la continuidad y evolución de la vida en
Tierra. 

]]> 2020-10-05 22:21:46 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/804903305 Mutaciones en PCR javieralvarez1397 https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/804915925 Del mismo modo, durante un
Clonación dirigida por PCR de un gen o región de interés, planificada
los desajustes en la secuencia del cebador y los T s ligeramente reducidos pueden
ser utilizado para introducir mutaciones deseadas en un proceso llamado sitio-
mutagénesis dirigida. 

]]> 2020-10-05 22:31:15 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/804915925 Bacterias que aplican en el método javieralvarez1397 https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/804918141 El desempeño de este método ahora increíblemente omnipresente requiere

uso de una polimerasa termoestable que podemos encontrar en aguas termales hirviendo como los respiraderos acuáticos marinos.
]]> 2020-10-05 22:32:54 UTC https://padlet.com/karem98cislop/i09yv986982o373a/wish/804918141