Nesta sessão fiquei a compreender melhor a elaboração de um poster científico com a ajuda da investigadora Clara!

Na verdade, nesta sessão elaborei um poster científico novo, já que o poster que eu tinha elaborado anteriormente não me agradava e estava mal estruturado.

Que dificuldades senti?

Durante a sessão senti bastantes dificuldades em trabalhar com a plataforma Galaxy e em organizar os ficheiros na mesma da maneira que o investigador João nos pediu.

Felizmente, recebi ajuda da minha colega Helena (que faz parte do meu grupo) que me explicou o modo como deveria organizar os ficheiros! Depois da sua ajuda consegui fazer o que nos foi pedido pelo investigador João e fiquei a compreender melhor o modo de uso da plataforma.

A sessão foi dividida em duas partes, em que uma foi com a investigadora Clara e a outra com o investigador João.

No início da sessão, a investigadora Clara deu-nos dicas para a elaboração do poster científico e ajudou-nos individualmente na estrutura do mesmo.

Já com o investigador João, aprendemos a utilizar a ferramenta Bowtie na plataforma Galaxy e organizamos os ficheiros que nos foram atribuídos (que contêm a sequenciação com a informação genética de cada indivíduo) na mesma plataforma.

É com estas sequências destes indivíduos que iremos trabalhar durante o decorrer do projeto, de modo a descobrir se estes possuem agentes infecciosos.

O galaxy é uma plataforma para trabalho científico que permite a integração e análise de uma grande quantidade de dados. Além disso, a plataforma visa tornar a biologia computacional acessível a investigadores que não têm experiência em programação de computadores ou administração de sistemas. O Galaxy torna a ciência reproduzível, isto é, facilita o compartilhamento de dados e resultados, facilitando aos investigadores a reutilização de trabalhos de outros a partir das suas publicações e torna desnecessária a instalação de outras ferramentas de software por parte dos usuários.

Apoptose- morte programada de células danificadas ou com algum tipo de erro.

Artrite- doença que afeta as articulações diminuindo a amplitude de movimentos nas articulações afetadas

Artrópode- são animais invertebrados e de grande distribuição no planeta. São exemplos de artrópodes os insetos, crustáceos e aracnídeos.

Atrofia muscular- é uma doença neuromuscular que atinge os neurônios motores, trazendo perda de volume de massa muscular e enfraquecimento dos músculos.

Cefaleias- termo médico para designar dores de cabeça.

Citoesqueleto- uma estrutura celular presente em células eucarióticas, responsável por garantir a forma e a movimentação celular.

Cromossomas- molécula de DNA condensada, que carrega a informação genética.

Flagelo- longo filamento delgado que se estende externamente à parede celular e que auxilia na movimentação da célula.

Flebótomo- insecto relativamente parecido com um mosquito, mas mais pequeno.

Gene- unidade de informação genética que ocupa um determinado locus de um cromossoma.

Hemácias- também chamadas de glóbulos vermelhos, são células que estão presentes no sangue e são as responsáveis pelo transporte do oxigénio.

Insuficiência renal- acontece quando os rins perdem a sua capacidade para filtrar o sangue e eliminar substâncias que podem ser tóxicas para o organismo.

Membrana Citoplasmática- estrutura que delimita a célula, separando o meio intracelular do meio externo.

Mialgias- termo médico para dor muscular.

Organismos autotróficos- organismos capazes de sintetizar todas as substâncias necessárias para o seu metabolismo.

Organismos heterotróficos- organismos incapazes de produzir as substâncias necessárias ao seu metabolismo, necessitando assim de obter matéria no exterior.

Parasitismo- relação ecológica que ocorre entre espécies diferentes e causa prejuízo para um dos envolvidos.

Patogenecidade- capacidade de um patógeno provocar alterações nos organismos hospedeiros infectados.

Peptidoglicano- polissacarídeo ligado a péptidos presente na parede celular de procariontes.

Períneo - também designado por pavimento pélvico, é o conjunto de músculos que se encontram na base da pélvis e que sustentam os órgãos pélvicos (bexiga, uretra, útero, vagina, reto, intestino e ânus).

Período de incubação- tempo decorrido entre a exposição ao agente infecioso e o aparecimento de sintomas.

Plasmídeos- pequena molécula circular de DNA, com capacidade de replicação autónoma do cromossoma bacteriano.

Pressão Osmótica- é a pressão que se faz sobre a solução mais concentrada para impedir a passagem de solvente (no caso, a água) pela membrana citoplasmática, de uma solução mais diluída (interior da célula) para a mais concentrada.

Pseudópodes- Projeção temporária da parede celular que permite, por exemplo, a captação de alimentos e a locomoção.

Ribossoma- organelo responsável pela síntese de proteínas.

Síntese Proteica- Processo no qual são sintetizadas (formadas) as proteínas.

Úlceras cutâneas- lesões na pele.

Vacúolos pulsáteis- estruturas que controlam a saída e entrada de água.

A Hepatite E é uma inflamação do fígado causada pelo vírus HEV.

Como é transmitida?

A Hepatite E pode ser transmitido via fecal-oral, isto é, dissemina-se quando algo contaminado com fezes ou urina de um indivíduo afetado é ingerido, por exemplo, água contaminada.

Após sua ingestão, o vírus é absorvido pelo trato gastrintestinal e entra na circulação sanguínea, atingindo o fígado, onde se multiplica, causando hepatite aguda.

Além disso, também pode ser transmitido pela ingestão de carne mal cozida contaminada, transfusão sanguínea com sangue contaminado com o vírus, ou ainda ser transmitido da mãe para o bebê durante a gestação.

Sintomas:

Os sintomas surgem normalmente entre 15 e 40 dias após o contato com o vírus. Em mulheres grávidas ou pessoas com o sistema imunitário fraco, os sintomas podem ser mais graves e causar complicações.

Os principais sintomas de hepatite E são:

• Febre;

• Cansaço excessivo;

• Perda do apetite;

• Dor abdominal ou nas articulações;

• Náuseas, vômitos ou diarreia;

• Comichão pelo corpo;

• Pele e olhos amarelados;

• Urina escura e fezes claras;

• Mal estar geral.

Tratamento:

O tratamento da hepatite E geralmente envolve repouso, boa alimentação e hidratação, uma vez que é uma doença autolimitada, ou seja, é combatida pelo próprio sistema imunitário, ocorrendo a cura cerca de 6 semanas após a infecção inicial.

No entanto, pessoas com o sistema imunitário fraco e que desenvolvem hepatite crônica ou tenham coinfecção com o vírus da hepatite C ou A, pode ser indicado pelo médico o uso de medicamentos.

Prevenção:

Atualmente, apesar de existir uma vacina, disponível na China onde esta doença é mais comum, não está disponível em Portugal. Contudo, há algumas medidas que previnem a infeção:

• Um bom saneamento e higiene pessoal podem ajudar a prevenir a hepatite E.

• Pessoas que viajam para países em que o saneamento não é o ideal podem diminuir o risco de infecção ao evitar beber água não tratada. Ferver e tratar a água com cloro inativa o vírus da hepatite E.

• Cozinhar bem os alimentos também é uma medida importante para evitar esta doença.

• Não devem ser consumidas bebidas alcoólicas, já que isso poderia danificar o fígado ainda mais.

É uma doença da pele em coelhos não muito difundida, causada por um vírus similar ao do mixomatose ( Rabbit fibroma virus) , mas muito menos nocivo.

Transmissão:

Acredita-se que a transmissão ocorra através da picada de artrópodes que possuem o vírus.

Sintomas e desenvolvimento:

Nos coelhos afetados aparecem nódulos sob a pele nas patas, o focinho ou ao redor dos olhos que não costumam estender-se. Nos recém-nascidos a infeção pode provocar tumores nos órgãos. O vírus do fibroma atua diretamente nas células epidérmicas e do tecido conjuntivo causando a formação de um tumor localizado com crescimento lento.

Tratamento:

Atualmente, não há um tratamento nem prevenção para o fibroma já que se trata de uma doença autolimitada. Os fibromas podem permanecer durante 10-14 meses, regredindo após o desenvolvimento de anticorpos no coelho. Acredita-se que os animais estejam imunes á reinfeção após a regressão de um fibroma.

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC10849859/

https://www.michigan.gov/dnr/managing-resources/wildlife/wildlife-disease/wdm/rabbit-fibromatosis

https://www.tiendanimal.pt/blog/doencas-da-pele-em-coelhos/

https://www.msdmanuals.com/pt-pt/casa/doen%C3%A7as-hep%C3%A1ticas-e-da-ves%C3%ADcula-biliar/hepatite/hepatite-e

https://www.tuasaude.com/hepatite-e/

https://www.cuf.pt/saude-a-z/hepatite

https://www.hospitaldaluz.pt/pt/dicionario-de-saude/hepatite-viral

Tenho 18 anos e quero ser veterinária!

Desde pequena que tenho uma paixão enorme pela Natureza e pelos animais, sobretudo pelos cães, daí a ter escolhido Ciências e Tecnologias com Biologia. Descobri que quero ser veterinária por causa da minha cadela chamada Flor. A Flor tornou-se um membro na família quando eu tinha apenas 6 anos, crescemos praticamente juntas, e a partir daí nunca mais nos largamos. Eu ia para um lado, ela ia comigo e é assim até hoje. Ela mostrou-me qual era a minha profissão de sonho quando descobrimos que ela era diabética e iria precisar de tomar insulina todos os dias, e foi aí que percebi que adorava ser eu a tomar conta dela e era isso que eu queria fazer para o resto da minha vida, dedicar-me aos animais!

Considero-me uma pessoa bastante alegre, apesar de ser um pouco envergonhada, com o tempo vou me abrindo. Além disso, considero-me bastante trabalhadora, estudiosa e acima de tudo atenta ao que me rodeia ( ouço tudo até quando não parece eu juro).

Relativamente ao trabalho estou com bastantes expectativas, não só por ser um tema que me interessa muito mas principalmente por saber que vou trabalhar com uma senhora que é veterinária :).

As minhas publicações irão estar a azul!

Em Portugal, a média da incidência de leishmaniose em cães é de cerca de 6% (6 em cada 100 cães estão infetados), chegando alguns distritos a atingir os 17%.

A Leishmaniose é uma zoonose, ou seja, é transmissível ao ser humano. Em Portugal, a transmissão ao Homem é rara e considerada acidental.

(Os gatos também podem desenvolver leishmaniose). Algumas raças, como é o caso do Pastor Alemão, do Boxer, do Doberman e Cocker Spaniel têm maior risco de desenvolver a doença. Quando se fala de leishmaniose canina, prevenir é definitivamente o melhor remédio.

(formação de úlceras no bordo auricular e/ou entre os dedos), problemas nas unhas e, eventualmente, inflamação dos gânglios, do fígado ou do baço e perda de sangue pela via nasal.
Na verdade, os órgãos internos podem ser afetados, ocorrendo, por vezes, anemia, artrite, insuficiência renal grave( entre outros) , o que pode causar a morte do animal.

É importante ter a consciência de que, mesmo quando o animal sobrevive á doença, acaba por se tornar um doente crónico e que irá precisar de acompanhamento veterinário durante o resto da sua vida.

Além disso é necessário ter algumas precauções como por exemplo:

• reduzir o habitat de flebótomos (mosquitos);

• minimizar o contacto físico, mantendo os cães recolhidos ao entardecer e ao amanhecer (períodos em que os flebótomos estão mais ativos);

• utilizar inseticidas (por exemplo: sprays, spot-on, coleiras repelentes, etc) e reduzir a intensidade luminosa em casa (os flebótomos voam em direção da luz)

(Deve-se também evitar deixar portas e janelas abertas ou, em alternativa, utilizar mosquiteiras).

Para tal, iremos produzir meios de cultura em placas de Petri e inoculá-los com bactérias. De seguida, iremos fazer alguns testes com raios UV e alguns objetos protetores tais como lentes de óculos de sol e tecidos anti UV. A meta, é observar os resultados e entender se estes itens protegem ou não as bactérias da radiação.

Deste modo, eu e o meu grupo estamos a desenvolver o póster científico dando ênfase aos vírus, sobretudo ao vírus da mixomatose, ao da Hepatite E e ao vírus do Fibroma.

De momento, estão a ser elaborados os resultados (ainda inacabados) com recurso a mapas (sobre os países que foram alvos de estudos e as respetivas espécies capturadas) e a tabelas produzidas no Excel, como é vísivel na figura que postei acima.

• A Mixomatose;

• A Hepatite E causada pelo vírus Lepus torque teno vírus 2;

• O Fibroma;

Como já falei sobre a mixomatose anteriormente, nas próximas publicações irei explorar um pouco sobre a Hepatite E e o Fibroma!

De entre estas doenças temos por exemplo:

• Tularémia;

• Mixomatose.

A Tularémia é uma infecção causada pela bactéria Francisella tularensis.Esta doença tem vários tipos, sendo a Tularemia ulceroglandular a mais comum.

Como é transmitida?

É possivel adquirir Tularémia a fazer o seguinte:

• Manusear restos de animais infetados ou entrar em contacto com fezes e urina dos mesmos ( por ex. quando caçadores tiram a pele de coelhos/lebres ou quando talhantes, agricultores e técnicos de laboratório lidam com animais que possuíam a doença)

• Ser mordido por uma carraça, moscardo, pulga ou outro inseto infetado, geralmente durante o verão.

• Comer alimentos contaminados (como carne de coelho/lebre mal cozida)

• Inalar partículas transportadas pelo ar que contenham a bactéria.

A tularémia não é transmitida de pessoa para pessoa!

Prognóstico

Com tratamento adequado, quase toda pessoa se recupera. Sem tratamento, a taxa de mortalidade varia de 6% em pessoas com tularemia ulceroglandular chegando a 33% em pessoas com outros tipos de tularémia como a tipo tifoide, pneumônica ou septicêmica. A morte é geralmente o resultado de uma infecção grave como pneumonia, meningite, etc.

(As pessoas que sofrem de tularemia estão imunes à reinfecção).

Sintomas

O período de incubação é habitualmente de três a cinco dias (mas pode variar entre um e 21 dias). O início da doença é usualmente brusco, com febre (38-40ºC), cefaleias, arrepios de frio, rigidez da nuca, mialgias (predominantemente lombares) e sindrome tipo gripal.

A fase subsequente é caracterizada por suores, febre e arrepios de frio e perda de peso.

Na forma ulceroglandular, após a picada de um artrópode infectado a manifestação da doença consiste numa pápula cutânea no local de inoculação (picada), em simultâneo com sensação geral de mal-estar, enjoos, tornando-se esta purulenta e ulcerada poucos dias após o seu aparecimento. A úlcera é mole e geralmente tem um carácter indolor. Tipicamente, um ou mais nódulos linfáticos aferentes podem tornar-se maiores e moles poucos dias após o aparecimento da pápula.

Tratamento

A tularémia é essencialmente tratada com antibióticos, sendo a estreptomicina o antibiótico de eleição no tratamento de todas as formas de tularémia.

Prevenção

De modo a ivitar esta doença, devem ser tomados alguns cuidados como por exemplo:

• Não beber, tomar banho e nadar água não tratada que possa estar contaminada (pois a doença também se propaga pela água).

• Procurar imediatamente carraças, já que a transmissão da infecção geralmente requer que as carraças estejam agarrados por pelo menos 4 horas. Se encontrados, os carrapatos devem ser removidos imediatamente

• Ao manusear animais potencialmente infetados como coelhos, lebre e roedores, as pessoas devem usar roupas protetoras (como luvas de borracha e máscaras faciais) porque pode haver bactérias presentes.

• Cozinhar devidamente a carne destes animais antes de ser consumida.

• 
  

(Atualmente, não há nenhuma vacina disponível, mas uma está sendo avaliada).

A mixomatose é uma das doenças mais graves que ataca os coelhos, quer os domésticos quer os silvestres, ocasionando grande mortalidade e propagando-se rapidamente.

Foi descoberta pela primeira vez na América do Sul, tendo chegado ao Reino Unido e disseminando-se rapidamente a partir daí pelo resto da Europa
É uma doença provocada pelo vírus Myxoma que afeta os coelhos/lebres e é veiculada por pulgas e por mosquitos que, através da picada, inoculam o agente no corpo do animal.

(Não é transmitida aos humanos).

Como é transmitida?

A transmissão ocorre essencialmente através de picada de mosquitos e pulgas que veiculam a doença dos coelhos silvestres para os coelhos domésticos. Mais raramente, pode transmitir-se por contato direto com animais infetados, provavelmente por via respiratória e por secreções oculares. Pode também transmitir-se através de gaiolas infetadas e operadores que podem passar o vírus de um animal para outro.

Sintomas

A mixomatose pode provocar quebra dos sistema imunitário o que favorece o aparecimento de infeções bacterianas, contribuindo para a morte dos animais. A doença manifesta-se por febre, que pode atingir 42ºC, apatia, anorexia, hemorragia cutânea, convulsões, inflamação mucopurulenta das pálpebras, secreções ocular e nasal com aspeto leitoso, nódulos subcutâneos na face, orelhas, pálpebras e períneo, edema da face e dos órgãos genitais, aumento do tamanho do baço e dos gânglios linfáticos. A morte ocorre normalmente cerca de 14 dias após o início dos sintomas. Nos casos hiperagudos, os animais podem morrer em 48 horas

Tratamento

Atualmente, ainda não existe um tratamento eficaz contra a mixomatose. Ocasionalmente, alguns coelhos menos afetados poderão recuperar.

Prevenção

Devem ser tomadas algumas medidas de modo a evitar a propagação desta doença, tais como:

• Desinfeção das instalações;

• Colocação de redes mosquiteiras nas jaulas onde são colocados os animais de modo a evitar os insetos infetados;

• Utilização de desinsetizantes eficazes contra mosquitos e pulgas;

• Eliminação adequada dos cadáveres de animais afetados.

Esta noticia chamou-me á atenção já que apenas em 2019 foi descoberta a presença desta doença nas lebres. Além disso, trata-se de uma nova linhagem do vírus da doença que já tinha provocado um grande número de mortes nas populações de coelho-bravo.

chrome-extension://efaidnbmnnnibpcajpcglclefindmkaj/https://www.dgav.pt/wp-content/uploads/2023/07/Mixomatose.pdf

https://www.rtp.pt/noticias/pais/coelhos-e-lebres-com-doenca-que-ataca-humanos-alerta-federacao-cacadores_n15163

https://dica.madeira.gov.pt/index.php/2016-02-24-11-28-27/saude-animal/228-a-mixomatose

https://noticias.up.pt/2019/06/12/equipa-do-cibio-inbio-identifica-virus-que-esta-a-matar-as-lebres-ibericas/

https://www.msdmanuals.com/pt-pt/casa/infec%C3%A7%C3%B5es/infec%C3%A7%C3%B5es-bacterianas-bact%C3%A9rias-gram-negativas/tularemia

Esta dividiu-se em 3 momentos, nos quais a primeira e última foi com o investigador João, e a do meio com a investigadora Clara.

Na primeira parte, o investigador João apresentou-nos algumas mudanças que foram feitas na plataforma Galaxy e a maneira de como íamos trabalhar daqui para a frente. De seguida, os dois casestudys foram separados em salas diferentes, onde a investigadora Clara, tal como na sessão anterior, nos deu algumas dicas para a elaboração póster científico assim como alguns exemplos.

Por fim, o investigador João pediu que "corressemos" todos os indivíduos que nos foram atibuídos com a ferramenta Bowtie2 da mesma maneira que na sessão anterior, para que na sessão seguinte já tivéssemos resultados (pois esta ferramenta requer algum tempo para processar os dados completamente).

Durante esta sessão fiquei a compreender melhor a forma que os investigadores pretendem que se elabore o poster científico, mas sobretudo compreendi melhor o objetivo final do projeto.

Que dificuldades senti?

Nesta sessão em particular não senti grandes dificuldades, já que a ferramenta que utilizámos no Galaxy já nos tinha sido apresentada e explicada na sessão anterior.

1ª fase: Extração de informação de dados de WGS

2ª fase: Análise de dados obtidos

3ª fase: Divulgação de resultados alcançados

Além disso, ficamos a saber que o projeto sobre os animais, que inicialmente era mais focado na doença da Leishmaniose, vai abranger um grande número de doenças em animais selvagens e não apenas a Leishmaniose, passando a chamar-se Rastreando agentes infecciosos a partir de dados de sequenciação. Neste caso, iremos trabalhar mais precisamente com diferentes espécies de lebres.

Por fim, ainda nesta sessão, criamos os grupos com que vamos trabalhar, tendo eu ficado com a Inês Silva e a Helena Ferreira.

Primeiramente foi-nos apresentado um tutorial sobre o funcionamento da plataforma Galaxy (plataforma que iremos utilizar para análise de dados no decorrer do projeto).

Além dissso, durante esta sessão o investigador João apresentou-nos várias técnicas que vão ser utilizadas em ambos os case studys. No caso do case study rastreando agentes infecciosos a partir de dados de sequenciação iremos utilizar o método Bowtie que consiste na leitura rápida de pequenas sequências de DNA.

O case study tem como propósito criar uma base de dados de sequências de DNA de indivíduos ( que no caso são em lebres em estudo) e tentar perceber se estes possuem doenças através de um genoma referencial.

No final da sessão, o investigador João apresentou-nos alguns modelos de posters científicos, assim como algumas regras que deverão ser cumpridas durante a execução do mesmo, visto que ao longo do projeto teremos que criar um poster científico individualmente.

A Radiação Ultravioleta é um tipo de radiação eletromagnética ionizante, ou seja, possui energia suficiente para ionizar átomos e moléculas removendo eletrões deles. Deste modo, pode causar danos ao material biológico como o DNA, e pode levar a mutações genéticas, cancro e outros tipos de problemas de saúde. O seu nome "ultravioleta" vem do facto da cor violeta ser a de maior frequência no espectro visível da luz.

Quanto à radiação UV solar, podemos considerar que existem 3 tipos de raios. Os UVA que têm comprimento de onda mais longo, penetrando mais facilmente a pele e estando estes raios presentes na maioria das lâmpadas dos solários. Os UVB que têm comprimento de onda intermédio, e entrando mais dificilmente na pele, são os principais causadores das queimaduras solares. E os UVC com comprimento de onda ainda mais curto e altamente energéticos.

A camada de ozono consegue absorver completamente a radiação UVC, parcialmente a radiação UVB e praticamente nada da radiação UVA.

Aplicações de Radiação Ultravioleta são visíveis por exemplo em: lâmpadas fluorescentes, clínicas de bronzeamento artificial, produção de vitamina D ou até na eliminação de dados em chips de memória de computador.

Para reduzir os efeitos desta Radiação, o ser humano tem como hábitos: usar protetores solares, usar óculos de sol e chapéus e permanecer na sombra seja de árvores ou de outras

estruturas.

(Fontes: https://mundoeducacao.uol.com.br/fisica/radiacao-ultravioleta-uv.htm / https://conhecimentocientifico.r7.com/radiacao-ultravioleta/ , consultado a 10/03/24)

Sou um rapaz que normalmente tem muita dificuldade em falar sobre si mas vou dar o meu melhor!

Entrei para o curso de Ciências e Tecnologias pois não tinha grande ideia do que queria fazer da vida, e já que sempre me disseram que este seria o curso "com mais saídas", foi o curso que eu escolhi. Na verdade, desde sempre que gosto de Ciências Naturais (do 5º ao 9º ano) ou até de estudo do meio, e como tal, seguir este ramo da Ciência pareceu-me interessante. Escolhi a Biologia neste 12º ano pois é a área que mais me identifico e mais me sujeita curiosidade. Ainda não tenho grande ideia do que fazer depois deste ano, mas estou a tentar decidir e acho que amava fazer algo relacionado com animais, já que apesar de nunca ter tido um na minha vida, sempre os achei fofos e gostaria de ter uma maior ligação com eles.

Considero-me uma pessoa com um pouco de medo de se expor às situações, mas uma vez que as encaro, fico mais relaxado. Sou bastante ansioso e por isso tendo a estar sempre nervoso para a maior parte dos momentos, mas tenho tentado o meu melhor para conseguir ultrapassar este problema. Além disso, sou um pouco fechado com os outros mas quando sinto o "à vontade" com o próximo, sou o mais brincalhão possível. Sou uma pessoa muito "open-minded".

Gostaria de acrescentar que a minha vida não seria a mesma sem a música nem sem as minhas guitarras.

Quanto ao trabalho, estou bastante curioso para as experiências que irei enfrentar e espero conseguir aprender algo interessante. Vou dar o meu melhor!

A meu ver, é um projeto interessante já que os Raios UV (especialmente os Raios UV solares) estão em contacto connosco durante grande parte da nossa vida. Ao concluirmos este projeto, irá ser útil o facto de obtermos resultados que nos vão dar a perceber se os hábitos do ser humano combatem o efeito deletério da radiação ou não.

Efeito deletério: prejudicial à saúde e que pode destruir algo.

Os métodos de esterilização podem ser divididos em físicos (vapor, calor e radiação) e químicos usando por exemplo um ácido.

No caso do nosso projeto, usamos uma placa de aquecimento e uma panela de pressão para tal!

(Fontes: https://kasvi.com.br/esterilizacao-quais-os-tipos-e-sua-importancia-na-saude/ , consultado a 16/03/2024)

Vai ser usado por nós para produzir os nossos meios de cultura, que iremos consequentemente inocular com bactérias.

(Fontes: https://www.biopremier.com/pt-pt/produtos/lb-agar-lennox-ptpt336 , consultado a 16/03/2024)

Os microrganismos, tais como outros organismos vivos, necessitam de obter os nutrientes necessários à sua sobrevivência. Dada a diversidade e multiplicidade das necessidades metabólicas, os diferentes meios de cultura preparados em laboratório devem poder satisfazer as exigências nutricionais dos vários microrganismos, auxiliando o estudo, análise e identificação dos mesmos.

(Fontes: https://dica.madeira.gov.pt/index.php/outros-temas/diversos/1825-meios-de-cultura-utilizados-em-microbiologia , consultado a 16/03/2024 )

Já que foi a nossa primeira sessão e ainda não tínhamos grande ideia de como se exerciam os procedimentos necessários, reservamos este dia para uma sessão de treino! 

Os métodos que iriamos treinar seriam: 

• Esterilização de materiais com uma panela de pressão 

• Produção de um meio de cultura com LB Agar 

• Plaqueamento 

• Inoculação de Bactérias  

Neste caso, iriamos criar apenas 4 Placas de Petri com meios de cultura e inoculá-las com Lactobacillus (bactérias presentes no iogurte).  

Para tal, precisamos primeiro de ter a noção dos materiais que iriamos utilizar. 

Material utilizado 

• Álcool etílico 

• LB Agar 

• 1 Vareta 

• 4 Ansas de inoculação 

• 4 Placas de Petri 

• 1 Panela de pressão 

• 1 Placa de aquecimento 

• 1 Espátula 

• Algodão 

• Matraz 100ml 

• 1 Balança 

• 2 Lamparinas 

• Fósforos 

• 1 Caneta de acetato 

• 1 Pega de material 

• 1 Luva de cozinha 

• Iogurte 

• Fita parafilm 

• 1 Termómetro 

• Papel de alumímio 

• Microondas 

• Água destilada 

No recipiente do LB Agar estava presente a indicação de que deveriam ser utlizados 35mg de LB Agar para cada 1L de água destilada, produzindo 1L de meio de cultura.

Sendo assim, decidimos produzir apenas 100ml de meio de cultura, utilizando 3,5mg de LB Agar e 100ml de água destilada.

Mais informações sobre de que se trata uma esterilização na coluna "Mas o que é (...)?". 

• Para isso, colocamos alguma água na panela de pressão e colocamos esta sobre a nossa placa de aquecimento, que ligamos logo de seguida.

• Inserimos alguns utensílios na panela, tais como o matraz, espátula, vareta e a pega de material.

Esperamos algum tempo, e logo estava pronto!

Existe o caso das placas de Petri que não precisaram de passar por este processo já que teriam sido esterilizadas anteriormente.

Mais informações sobre de que se trata o LB Agar e o meio de cultura na coluna "Mas o que é (...)?". 
 

• O primeiro passo foi inserir 100ml de água destilada no matraz. 
   

• De seguida, com ajuda da espátula e da balança, medimos os 3,5mg de LB Agar que iriamos precisar para a formação do meio. Após a sua medição, juntamos os mesmos com a água destilada no matraz. 

Sabíamos que o próximo passo era dissolver bem aquela mistura e torná-la o mais homogénea possível e quase transparente.  

• Para isso, o primeiro movimento foi agitar o matraz o máximo possível, até não existirem restos de LB Agar visíveis.  
  

• De seguida, utilizamos o micro-ondas presente no laboratório para completar a dissolução do produto e ao mesmo tempo ajudar na sua esterilização. Sendo assim, colocamos o matraz no micro-ondas, e olhando com muita atenção esperamos que uma espécie de espuma subisse para rapidamente desligarmos o micro-ondas e retirarmos o matraz com ajuda da luva de cozinha. Após retirá-lo de dentro do micro-ondas, agitámo-lo o máximo possível e usamos a vareta para retirar qualquer depósito de LB Agar do fundo.  
   
  Repetimos este último procedimento várias vezes para que a mistura pudesse ficar como o desejado. 
   

• De seguida, já com a mistura homogénea e bem dissolvida, usamos um termómetro para medir a sua temperatura e então aguardar que esta atingisse uma temperatura entre os 50º e 55º. 

• Enquanto esperávamos, acendemos uma lamparina numa mesa para que o ambiente em volta pudesse ficar esterilizado.  
   

• Quando a mistura atingiu a temperatura alvo, distribuímo-la pelas 4 placas de Petri, agitámo-las ligeiramente para espalhar bem o meio pelas placas e fechamos estas rapidamente. 
   

• Esperamos um pouquinho, e assim que o meio estava sólido, viramos as placas ao contrário. 

Assim, temos o nosso meio de cultura pronto! 

• Para isso, existem algumas técnicas de plaqueamento. Entre elas, está o método quadrante.

Em anexo abaixo, é possível encontrar um power point sobre como fazer este processo.

• Para tal, usamos uma ansa de inoculação esterilizada anteriormente, de modo a conseguir captar as bactérias do iogurte e espalhá-las na placa. 

• Apenas lacramos as placas de Petri com fita Parafilm, de forma a isolá-las e de seguida colocámo-las numa estufa a 37º, a temperatura ideal para o crescimento de bactérias. 

Tendo em conta o meu fascínio pelos animais, não pensei duas vezes, optei de imediato pela segunda opção. Acresce, ainda, o facto de pretender vir a ser veterinária, tal como a investigadora, logo decidi que aquele trabalho era o ideal para mim e a minha curiosidade sobre o projeto aumentou a 200%!

Para isso, precisamos de saber que plataforma iremos utilizar, o que são agentes infecciosos e o que é o genoma!

Agentes patogénicos ou infeciosos são todos os organismos que causam algum tipo de doença.

Alguns exemplos de agentes infeciosos são:

• Vírus;

• Bactérias;

• Protozoários;

• Fungos;

• Vermes;

• Priões.

(Irei falar dos vírus, bactérias e protozoários já que são os mais comuns em animais).

São entidades não celulares que não produzem energia, logo não realizam funções metabólicas com autonomia e não possuem ribossomas.

Isto é explicado pelo facto de serem parasitas intracelulares obrigatórios, isto é, necessitam obrigatoriamente de uma célula hospedeira para se replicarem!

Como são constituídos?

São formados por material genético, DNA ou RNA, envolvidos por uma cápsula proteica e podem ou não exibir uma membrana lípica (normalmente derivada da membrana de células hospedeiras).

Como atacam?

Geralmente os vírus reprogramam as células hospedeiras de modo a trabalharem para si, ou seja, levam-nas a produzirem todos os seus componentes.

Em casos mais particulares transformam as células hospedeiras em células neoplásicas, isto é, células que podem evitar a apoptose e levar ao aparecimento de cancro.

As bactérias são organismos unicelulares procariontes, isto é, sem compartimentação interna e apresentam o seu DNA disperso no citoplasma.

Como são constituídas?

As bactérias possuem uma estrutura formada por: parede celular de peptidoglicano (fundamental para a proteção e patogenicidade) , membrana citoplasmática, ribossomas —(essencial na síntese proteica), material genético (que não é armazenado em um núcleo)

Algumas bactérias possuem outro tipo de componentes na sua estrutura, como: uma cápsula, plasmídeos e o flagelo

(auxilia na sua deslocação). Todas elas estão relacionadas com alguma função para a sobrevivência da bactseria, por exemplo: proteção, reprodução e movimentação.

Curiosidades

Ao contrário do que a maioria da população pensa, apenas 1% das bactérias causam doenças no ser humano. Além disso, o número de bactérias no nosso organismo é igual ou maior ao número de células que possuímos. Na verdade, nós possuímos o microbioma, isto é, bactérias simbiontes que nos ajudam a ter um funcionamento normal do nosso organismo como por exemplo: a digerir alimentos (os chamados probióticos) ou mesmo a prevenir o crescimento de bactérias potencialmente perigosas.

Como atacam?

As bactérias não possuem um método para atacar o nosso organismo, podem fazê-lo de maneiras diversificadas como por exemplo: quando acontece numa infeção urinária, um abcesso dentário ou uma unha encravada. Dá-se uma rutura local da nossa imunidade, que pode ser apenas uma barreira física, e que proporciona a infeção já que houve violação da nossa fisiologia normal.

Os protozoários são organismos eucariontes, unicelulares e, normalmente, microscópicos. Além disso, a maioria deles não são organismos autotróficos, uma característica importante que contribui para o parasitismo.

Como são constituídos?

Estruturalmente, a forma e a resistência apresentada por esses organismos deve-se à ação da membrana celular e do citoesqueleto. Os protozoários podem possuir estruturas responsáveis pela locomoção, como os cílios, flagelos e os pseudópodes. 

Uma estrutura importante presente em alguns protozoários são os vacúolos pulsáteis, que agem para regular a pressão osmótica, principalmente nos organismos que habitam em águas salgadas.

Como atacam?

Tal como as bactérias, os protozoários não tem uma forma específica de nos atacar.

Dando um exemplo de uma doença causada por um protozoário, temos o caso da malária. O protozoário Plasmodium (protozoário da malária) atua da seguinte forma: uma vez dentro do organismo humano, o Plasmodium pode fixar-se no fígado ou nas células sanguíneas. Atacam principalmente as hemácias, rompendo-as, causam anemia e transtornos no fígado e no baço, além de efeitos neurológicos, podendo levar o indivíduo à morte.

https://querobolsa.com.br/enem/biologia/protozoarios

https://cnnportugal.iol.pt/antivirais/antibioticos/virus-ou-bacteria-as-diferencas-como-nos-atacam-e-o-que-temos-para-lhes-fazer-frente/20220125/61e17cb80cf2cc58e7dd189c

https://www.msdmanuals.com/pt-pt/casa/infec%C3%A7%C3%B5es/infec%C3%A7%C3%B5es-bacterianas-considera%C3%A7%C3%B5es-gerais/considera%C3%A7%C3%B5es-gerais-sobre-bact%C3%A9rias

Além destes sites recorri ao PowerPoint disponibilizado pela Prof. Natália sobre agentes patogénicos na plataforma Teams.

O genoma é o conjunto completo de genes existentes num organismo ou no conjunto de cromossomas diploides nas espécies eucarióticas.

O genoma humano é o código genético do Homem, ou seja, o conjunto dos genes onde está toda a informação relativa à composição e funcionamento do organismo e está dentro de cada uma das células.

O genoma humano está distribuído por pares de cromossomas, que, por sua vez, contêm os genes. Toda a informação é codificada pelo DNA (ácido desoxirribonucleico), que se organiza numa estrutura formada por quatro bases que se unem aos pares, a adenina com a timina e a citosina com a guanima. A ordem do alinhamento dos pares ao longo da cadeia corresponde à sua sequência.

Porque é importante decifrar o genoma humano?

Decifrar o genoma humano possibilita o conhecimento da causa da maioria das doenças. Assim, muitas delas podem ser diagnosticadas ou curadas. Também se pode prevenir o risco das doenças se manifestarem em determinadas pessoas.

Já em 2003, a sequenciação do genoma humano finalizada por um outro consórcio internacional de cientistas correspondia à sequenciação de todas as partes do genoma que não são altamente repetitivas.

Apenas em 2022, máquinas de sequenciação mais sofisticadas e novos métodos de análise computacional permitiram decifrar as partes do genoma humano que tinham sido descartadas como lixo e sequenciar na totalidade, sem falhas, o material genético de células humanas, de uma ponta à outra dos cromossomas.

Esta noticia chamou-me á atenção já que esclarece como foi sequenciado o Genoma Humano completa e corretamente, coisa que se pensava já ter sido feita em 2003, porém havia diversas falhas.

https://pt.khanacademy.org/science/ap-biology/gene-expression-and-regulation/biotechnology/a/dna-sequencing

https://www.infopedia.pt/artigos/$genoma-humano

https://toolbox.eupati.eu/glossary/genoma/?lang=pt-pt

• Construir a caixa UV

• Esterilizar materiais

• Fazer o meio de cultura

• Plaquear

• Inocular

• Fazer o bio ensaio

• Observar os resultados e analisá-los

• Para tal, iríamos precisar de:

• Caixa de Madeira

• Lâmpada UV

• Material Elétrico

• 30 segundos

• 60 segundos

• 120 segundos

• 240 segundos

• Óculos de sol

• Folha de árvore

• Pedaço de t-shirt

• Pedaço de guarda-sol de praia / Pedaço de boné

  
  

Estabelecemos assim que iríamos usar 36 placas de Petri. (2 vezes cada teste; 4 testes pois usaremos 4 materiais; 4 timings por teste; 4 controlos; 2 * (4+4) + 4 = 36

Sendo assim, usaremos 500ml de água destilada e 17,5mg de LB Agar para a produção do meio de cultura necessário.

Ainda assim, existiram algumas atualizações no plano de todo o trabalho. Foram elas:

Ao nível dos timings

• 0 segundos

• 30 segundos

• 60 segundos

• 150 segundos

• 300 segundos

Quantidade de Placas

• (2 vezes cada teste; 4 testes pois usaremos 4 materiais; 5 timings por teste; 5 controlos; 2 * (4 * 5) + 5 = 45

• Porém, em prevenção, iremos usar 50 placas

Quantidade de Meio de Cultura

• Iremos fazer 650ml de Meio de Cultura

• Precisamos de 650ml de Água destilada

• Precisamos de 23mg de LB Agar

Material

• Em vez de usar matraz, iremos usar 3 frascos de vidro de 250ml cada um

Suspensão de Bactérias

• Iremos fazer 75ml de suspensão de bactérias para haver suficiente e sobrar

Informações sobre este bicho estão presentes na coluna "Escherichia coli"

Como decorreu a sessão?

A sessão começou com ambos os casestudys na mesma sala, já que o investigador João nos informou de que os pósteres científicos passarão a ser em grupo (de minímo 3 e máximo de 4 pessoas, todas da mesma turma) e que no casestudy em que faço parte irão haver 4 grupos, visto que existem 4 tipos de agentes infeciosos (vírus, bactérias, fungos e parasitas) diferentes e cada grupo irá ficar com 1 único agente infecioso.

Adicionalmente, o meu grupo ficou responsável pelos vírus, tendo em conta que somos 4 pessoas ( eu, a Inês Silva, a Andreia Costa e a Sofia Sampaio) e que os vírus possuem um "leque" mais variado de doenças.

Que doenças causadas por vírus estão em estudo?

No projeto estão em estudo as seguintes doenças causadas por vírus (e os respetivos agentes infeciosos):

• Doença hemorrágica dos coelhos- Rabbit haemorrhagic disease (RHD);

• Mixomatose- Leporipox virus ou Mixoma vírus;

• Febre por flebótomos- Phlebovirus toscanaense, Massila phlebovirus, Phlebovirus spp;

• European brown hare syndrome virus- Calicivírus, genus Lagovírus;

• Hepatite E- Heperividae sp. (HEV), Lepus torque teno vírus 2, Lepus polyomavirus;

• Fibroma- Rabbit fibroma virus

Deste modo, os resultados que serão apresentados no póster estarão relacionados com as doenças acima referidas.

Por último, a investigadora Clara ajudou-nos a concluir a nossa introdução e a começar o parte dos Objetivos.