Dario Barreto Reino de Almeida

Turma B

Professores:

Primeiro dia - Prof. Joana - 18/11

Segundo dia - Prof. André - 25/11

Nome do laboratório: Departamento de microbiologia e parasitologia do Instituto Biomédico

A placa foi dividida em 4 áreas, com os seguintes itens colocados por cada membro da equipe:

• Fábio: Ponta da caneta do iPad (2) e haste do óculos (4)

• Dario: Aliança (1) e xuxinha de cabelo (3)

Resultados Observados

• Xuxinha de cabelo: Apresentou disparadamente a maior quantidade de colônias bacterianas.

• Aliança: Teve uma presença significativa de colônias bacterianas, além de algumas colônias fúngicas.

• Ponta da caneta do iPad: Apresentou uma baixa presença de bactérias.

• Haste do óculos: Não apresentou nenhuma colônia bacteriana.

  
  

  
  

  Análise e Suposições

Provavelmente, as bactérias encontradas na xuxinha de cabelo e na aliança são oriundas da microbiota da pele e ao acúmulo do suor.

Surpreendentemente, para nós, a xuxinha de cabelo apresentou a maior concentração de colônias bacterianas, superando até mesmo a aliança.

Já a haste do óculos, por ficar em contato com uma região mais abafada atrás da orelha, também esperávamos uma maior concentração de bactérias, mas não foi o observado.

Portanto, apesar de inicialmente supormos que os itens em contato direto com a pele, como a haste do óculos e a aliança, tenderiam a apresentar uma maior diversidade e quantidade de colônias bacterianas, devido à microbiota e ao acúmulo de suor. No entanto, a surpreendente concentração na xuxinha de cabelo merece uma investigação mais aprofundada.

1.1 Testa (microbiota residente da pele): A pele possui uma microbiota residente, composta por bactérias que naturalmente colonizam a superfície cutânea, além das secreções sudoríparas, então contaminamos meu dedo com essas bactérias.

1.2. Cano com ferrugem: A ferrugem pode abrigar uma diversidade de microrganismos, incluindo bactérias anaeróbicas, esse foi o motivo de nossa contaminação com esse objeto (obs: verificamos se havia alguma superfície rugosa ou perfurocortante e se também havia alguma lesão ou abertura no meu dedo)

1.3. Chão: O chão é um ambiente com alta carga microbiana, proveniente de diversas fontes, como sujeira, poeira e resíduos orgânicos.

2. Lavagem com água e sabão: A redução considerável da quantidade de colônias bacterianas após a lavagem com água e sabão era o resultado esperado para esse quadrante, pois a ação do sabão e da água remove grande parte da sujeira e microrganismos presentes na superfície.

3. Higienização com álcool 70%: A diminuição quase total da quantidade de colônias bacterianas após a higienização com álcool 70% também era o resultado esperado, pois o álcool possui ação antimicrobiana, sendo eficaz na inativação e eliminação de bactérias.

4. Higienização com álcool iodado: A ausência total de colônias bacterianas após a higienização com álcool iodado era o resultado esperado, pois o álcool iodado é um desinfetante ainda mais eficaz que o álcool 70%, com ação antimicrobiana mais potente.

Portanto, os resultados obtidos neste experimento estavam de acordo com o esperado, demonstrando a eficácia dos diferentes métodos de higienização na redução da carga microbiana presente em superfícies.

A maioria dos Staphylococcus aureus são resistentes a penicilinas (Grupo que inclui a Ampicilina), segundo a tabela. Havia uma medição do gênero Staphylococcus que dava colo limite de 18mm em dose de 2 μg, o disco usado tinha 10 μg e deu somente 20mm. Então, concluimos que é resistente a AMP-10.

Para a avaliação da Cefotaxima (CTX-30), segundo a tabela, também se dá baseada na da Cefoxitina, visto acima. Assim, como o halo da CTX-30 foi de 32mm, há boa sensibilidade a esse antibiótico.

A avaliação da resistência e sensibilidade de Ciprofloxacino (CIP-5) se dá de maneira curiosa, pois com nossa medição de 35mm de halo, essa cepa apresenta sensibilidade

intermediária (17-49 mm). Para ser plenamente sensível, o halo deveria ter de 50mm para mais, e para definir como resistente teria que ser de 16mm para menos.

Nossas medições:

* IPM-10: 33mm

* ⁠AMP-10: 20mm

* ⁠CTX-30: 32mm

* ⁠CIP-5: 35mm

Resultados: Após a coloração de Gram, as células de Staphylococcus aureus apresentaram-se mais roxas, enquanto as células de Escherichia coli exibiram uma coloração mais rosada a vermelha.

Discussão: A diferença na coloração observada entre as bactérias Gram-positivas (S. aureus) e as Gram-negativas (E. coli) se deve à composição de suas paredes celulares.

As bactérias Gram-positivas, como o S. aureus, possuem uma parede celular composta principalmente por peptidoglicano, um polissacarídeo que apresenta maior afinidade pelos corantes violeta de cristal e lugol utilizados na coloração de Gram. Essa afinidade resulta em uma coloração mais intensa, com tons de roxo.

Por outro lado, as bactérias Gram-negativas, como a E. coli, possuem uma parede celular com uma camada mais fina de peptidoglicano, além de uma membrana externa composta por lipopolissacarídeos. Essa estrutura apresenta menor afinidade pelos corantes violeta de cristal e lugol, sendo mais facilmente descorada pelo álcool-acetona. Consequentemente, as células Gram-negativas adquirem uma coloração mais rosada a vermelha, devido à maior afinidade pela safranina, o corante de contraste utilizado.

Conclusão: A coloração de Gram permitiu diferenciar as bactérias Gram-positivas (S. aureus) e Gram-negativas (E. coli) com base na diferença de composição e afinidade de suas paredes celulares pelos corantes utilizados. Essa técnica é uma ferramenta importante para a identificação e classificação bacteriana.