A técnica é muito sensível, possibilitando a amplificação de DNA a partir de uma quantidade mínima de amostra. Essa característica proporciona a aplicação da técnica não apenas na pesquisa básica, mas também na pesquisa aplicada, como nos 🤬 de identificação genética, diagnóstico de doenças infecciosas, entre outros.

O desenvolvimento da técnica de amplificação de segmentos de DNA, utilizando a PCR ampliou perspectivas em várias áreas do conhecimento. Nas experiencias iniciais de PCR, utilizou-se a enzima de DNA polimerase de E. Coli, cuja temperatura de polimerização é de 37°C. Ela era adicionada manualmente a cada ciclo de amplificação, mas era destruída toda vez que a temperatura era elevada para 95°C para promover a desnaturação do DNA molde.

O passo decisivo para a expansão da PCR foi a descoberta da enzima taq polimerase, extraída da bactéria Thermus aquaticus. Esse organismo vive em fontes termais e muitas de suas enzimas são termoestáveis (resistentes à desnaturação pelo calor). Essa característica especial tornou-a adequada para utilização em metodologias como a PCR que envolve etapas de aquecimento a temperaturas de mais de 90°C.

Um avanço importante na técnica de PCR foi o desenvolvimento de metodologias que possibilitaram o acompanhamento da amplificação do DNA em todo o processo e não somente no final (PCR convencional). A PCR em tempo real quantitativa (ou qPCR) é um método de detecção e quantificação confiável dos produtos gerados durante cada ciclo de amplificação, os quais são proporcionais à quantidade de molde disponível no início do processo de PCR. Ou seja, permite que a amplificação e detecção ocorram simultaneamente, sendo o resultado visualizado em tempo real durante a amplificação da sequência de interesse.

A técnica foi inicialmente desenvolvida por Kary Mullis, que em 1993 foi ganhador do Prêmio Nobel de Química.

Vídeo:

 https://youtu.be/-gB2WC9rUAI

   A descoberta do código genético começou em 1961, com o trabalho do bioquímico americano Marshall Nirenberg. Pela primeira vez, Nirenberg e os seus colegas foram capazes de identificar tripletos de nucleótidos específicos que correspondiam a aminoácidos em particular. 

   Primeiro, Nirenberg sintetizou uma molécula de mRNA composta unicamente pelo nucleótido uracilo (chamada poli-U). Quando adicionou o mRNA poli-U ao sistema sem células descobriu que os polipéptidos formados consistiam exclusivamente no aminoácido de fenilalanina. Utilizando a mesma abordagem, ele foi capaz de mostrar que o mRNA poli-C foi traduzido para polipétidos formados exclusivamente pelo aminácido prolina, sugerindo que o tripleto CCC iria codificar a prolina.
   Outros investigadores, tal como o bioquímico Har Gobind Khorana na Universidade de Wisconsin, continuaram as experiências de Nerinberg ao sintetizar mRNAs artificiais com sequências mais complexas. Este resultados confirmaram inequivocamente que o código genético era baseado em tripletos ou codões.

Beatriz Borges Duarte nº3 .

O método de Sanger, também chamado método de terminação de cadeia, é uma técnica que utiliza a DNA- polimerase I de Escherichia coli para sintetizar cópias complementares do DNA de cadeia simples a ser sequenciado. O método consiste na adição de nucleotídeos modificados, chamados desoxirribonucleicos. As extremidades dos fragmentos serão rotuladas com corantes que indicam o nucleotídeo final.
Em fevereiro de 1977, Gilbert e o seu aluno Allan Maxam publicaram um novo método de sequenciamento de DNA.
Em 1975, os bioquímicos britânicos Fred Sanger e Alan Coulson publicaram um artigo descrevendo o que eles chamaram método "mais e menos" de sequenciação de DNA. Fred Sanger e Walter Gilbert ganharam uma parte do Prémio Nobel de 1980 por seu trabalho em sequenciação de DNA, e os seus dois métodos foram rapidamente adotados por laboratórios em todo o mundo. 
Embora a sequenciação Maxam-Gilbert fosse inicialmente mais popular, no final, a sequenciação Sanger venceu graças à sua simplicidade e melhorias contínuas que o tornaram cada vez mais rápido, barato e seguro do que o sequenciamento Maxam-Gilbert, que acabou sendo esquecido.

Esta teoria foi baseada nas observações da Oenothera lamarckiana. Estudou esta planta em formas selvagens por muitos anos continuamente, observando certas mudanças espontâneas em algumas dessas plantas selvagens. Estas plantas diferiam consideravelmente na altura do caule, na cor das flores e nas formas das folhas. Ele observou que essas mudanças eram hereditárias e acabaram levando a várias novas variedades.

Ele conseguiu cultivar todas essas novas variedades e nomeou-as como variedades mutantes. De fato, ele selecionou para seus experimentos de reprodução duas variedades mutantes - Oenothera laevifolia, caracterizada por folhas lisas e O. brevistylis caracterizada por estilos curtos. E ele observou que essas características estavam se reproduzindo e, portanto, ele considerava essas linhagens mutantes como espécies distintas.
link de um vídeo:
(63) Biologia 11º ano - Mutações 🥼 - YouTube
Data de consulta: 1-3-2023 
Alice Soares  nº1
11ºF
TAS