Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) by Gloria Guillén https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad Realizado por: *Adolfo Amador (20181030654) *Gloria Guillen (20191001367) *Keyla Yanez (20070000274) en-us 2022-02-23 04:03:23 UTC 2022-02-24 05:31:51 UTC hello@padlet.com https://padlet.net/icons/png/1f9ec.png DESCRIPCIÓN gloriafernandag16 https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2061919140 La Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR)es una reaccion enzimatica in vitro que amplifica una secuencia de DNA mediante ciclos repetidos de separación de cadenas y replicación del DNA. Con la PCR cada DNA recién sintetizado se convierte en una molécula molde para generar más, creando así una reacción en cadena que genera copias de DNA de manera exponencial.]]> 2022-02-23 04:55:44 UTC https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2061919140 USOS/APLICACIONES gloriafernandag16 https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2062000741 Estos incluyen:
  • Análisis y manipulación del DNA.
  • Pruebas de paternidad.
  • Construcción de plantas y animales transgénicos.
  • Dentro de la ciencia forense en la identificación de cadáveres y sospechosos.
  • Diagnóstico médico de alguna enfermedad o anomalía.
  • Terapia génica.
  • Análisis ambiental e identificación de especies.

]]> 2022-02-23 06:16:32 UTC https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2062000741 SENSIBILIDAD https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2063334472 Sensibilidad:  es la cantidad mínima de DNA necesaria para que se produzca la amplificación. Hay organismos que son casi imposibles de cultivar en un laboratorio, que la PCR permite detectar en unos niveles bajos. Esto ayuda a reducir falsos negativos, ya que puede darse la posibilidad de que una muestra positiva se de por negativa porque no se dispone de cantidad suficiente para analizarla.]]> 2022-02-23 20:17:32 UTC https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2063334472 ESPECIFICIDAD https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2063339546  La especificidad: es la obtención de un solo producto amplificado. Esta depende, fundamentalmente, de la temperatura empleada en la fase de hibridación y de la cantidad de iones divalentes que se incorporan a la reacción (además de depender de la secuencia de los cebadores). Por una parte, cuanto mayor sea la temperatura utilizada en la fase de hibridación, más específica es la reacción. Esto se debe a que a mayor temperatura más dificultada se ve la unión entre el cebador y la cadena molde; en condiciones de temperaturas de hibridación elevadas el cebador sólo se unirá a la cadena molde si son complementarios en todos sus nucleótidos.]]> 2022-02-23 20:20:51 UTC https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2063339546 EFICIENCIA https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2063367289  La Eficiencia es la amplificación máxima que se puede obtener con un número determinado de ciclos, se refiere a la cantidad de producto obtenido.
 Factores que pueden llevar al plateau: 
• La disminución de sustratos, cebadores o dNTPs (degradación de los reactivos: enzima, etc.) 
• La estabilidad de los reactivos‐ estabilidad de la enzima 
• Inhibición por productos finales (formación de PPi) 
• Competencia por reactivos, por productos no específicos o dímeros de los primers 
• Re‐anillado del producto a altas concentraciones las cuales previenen la extensión del proceso (10nM) 
• Incompleta desnaturalización en concentraciones altas de producto ]]> 2022-02-23 20:41:54 UTC https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2063367289 FIDELIDAD https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2063730576  La fidelidad de la replicación del ADN está basada en el reconocimiento molecular de sus componentes, los nucleótidos, durante la síntesis de secuencias complementarias en la doble hélice.

Para mejorar la fidelidad del la PCR se necesita:
• Seleccionar una enzima con actividad 3’-5’ exonucleasa. 
• Utilizar iniciadores con más de 15 nucleótidos.
• Incrementar la temperatura de alineamiento. 
• Reducir el tiempo de desnaturalización y alineamiento en el ciclo. 
• Reducir la concentración de iniciadores. 
• Reducir el número de ciclos. 
• Reducir la concentración de Mg2+. 
• Revisar que el termociclador funcione adecuadamente. ]]> 2022-02-24 02:20:16 UTC https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2063730576 VENTAJAS (Díaz, Rentería, Cortez, Sierra. 2013) https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2063733347 *Permite generar millones de copias de la   región de interés a partir de una o muy pocas copias del ADN molde.
 *Es una técnica muy confiable debido, en gran medida, a la gran capacidad de los oligonucleótidos, en este caso de los iniciadores de unirse con firmeza.
 *La unión de oligonucleótidos se da específicamente a sus secuencias complementarias de ADN.
 *Discrimina fácilmente entre centenares de millares de sitios de unión.]]> 2022-02-24 02:22:31 UTC https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2063733347 DESVENTAJAS https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2063735776 *Es necesario de estandarizar la técnica para el Organismo que se va ha estudiar en específico.
*Depende de la técnica de interés y requiere una estandarización en base a la técnica elegida.
 *La cantidad de tiempo que el proceso de estandarización requiere puede hacer que sea tardado.
 *Puede resultar mas costosa que otras técnicas debido a los materiales y tecnología que requiere.]]> 2022-02-24 02:24:33 UTC https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2063735776 PCR EN COVID-19 https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2063747822 2022-02-24 02:35:00 UTC https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2063747822 BIBLIOGRAFIA https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2063797099 -Díaz A., Rentería L., Cortez J. Sierra E. (2013). PCR: reacción en cadena de la polimerasa. Departamento de Hidrobiología. Universidad Autónoma Metropolitana-Iztapalapa. Instituto de Ecología, Universidad Nacional Autónoma de México. Laboratorio de Biología Molecular, Centro Nacional de Investigación y Capacitación. Ambiental, Instituto Nacional de Ecología. Universidad Autónoma de la Ciudad de México. http://www2.inecc.gob.mx/publicaciones2/libros/710/pcr.pdf
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-Biogenetix Lab. Que es la reacción en cadena de la polimerasa (PCR en punto final). (2020). Disponible en: https://www.biogenetixlab.com/blog/que-es-pcr-reaccion-cadena-polimerasa/#:~:text=Blog-,%C2%BFQu%C3%A9%20es%20la%20Reacci%C3%B3n%20en%20Cadena%20de,Polimerasa%20(PCR%20punto%20final)%3F&text=La%20Reacci%C3%B3n%20en%20Cadena%20de%20la%20Polimerasa%20(PCR%2C%20Polymerase%20Chain,cadenas%20y%20replicaci%C3%B3n%20del%20DNA.
- Dios L, Tamay. Ibarra, C. Velasquillo, C. Fundamentos de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y de la PCR en tiempo real. (2013). Disponible en: https://www.medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2013/ir132d.pdf


]]> 2022-02-24 03:16:42 UTC https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2063797099 https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2063798812 2022-02-24 03:18:08 UTC https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2063798812 https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2063799644 2022-02-24 03:18:50 UTC https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2063799644 https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2063801446 2022-02-24 03:19:59 UTC https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2063801446 https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2063830214 2022-02-24 03:43:50 UTC https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2063830214 MATERIALES gloriafernandag16 https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2063916506 Los ingredientes clave para una reacción de PCR son Taq-polimerasa, cebadores, ADN molde y nucleótidos. Los ingredientes se colocan en un tubo, junto con los cofactores que necesite la enzima, y se someten a ciclos repetidos de calentamiento y enfriamiento que permiten la síntesis del ADN.]]> 2022-02-24 05:00:25 UTC https://padlet.com/gloriafernandag16/88cyx0clfybyy9ad/wish/2063916506