1) Demonstração direta do parasito

 É o procedimento de primeira escolha por ser mais rápido, de menor custo e de fácil execução. São utilizados os seguintes procedimentos: escarificação do bordo da lesão, biópsia com impressão do fragmento cutâneo em lâmina por aposição e punção aspirativa. A sensibilidade desta técnica poderá ser aumentada pela repetição do exame e a leitura de várias lâminas.

 É um método de confirmação da presença do agente etiológico que permite identificar a espécie de Leishmania envolvida. Os fragmentos cutâneos ou de mucosa obtidos por biópsia da borda da úlcera são inoculados em meios de cultivo agar sangue modificado, entre 24ºC e 26ºC, nos quais o parasito cresce relativamente bem. Após o quinto dia, já podem ser encontradas formas promastigotas do parasito. Entretanto, a cultura deve ser mantida até um mês sob observação antes da liberação do resultado negativo. Pode-se utilizar material obtido diretamente das úlceras por punção com tubo selado a vácuo contendo meio de cultura. 

3) Isolamento in vivo (inoculações animais)

O material obtido por biópsia ou raspado de lesão é triturado em solução salina estéril e inoculado via intradérmica, no focinho e/ou patas de hamster; as lesões no hamster em geral desenvolvem-se tardiamente, a partir de um mês. Esses animais devem ser acompanhados por três a seis meses. Pela complexidade e pelo alto custo, esse método é pouco utilizado, apesar de apresentar elevada sensibilidade entre os demais métodos parasitológicos. 

4) Reação em cadeia da polimerase (PCR) 

A PCR é um método utilizado no diagnóstico das leishmanioses que se baseia na amplificação do DNA do parasito em diferentes tipos de amostras, tais como pele e mucosa. É um método considerado de alta sensibilidade e especificidade e utiliza diversos alvos moleculares, sendo alguns gênero-específicos e outros espécie-específicos. Uma das principais vantagens do uso da PCR é a possibilidade de detecção de DNA do parasito mesmo quando há baixa carga parasitária. As desvantagens das técnicas moleculares estão relacionadas ao seu custo elevado, à necessidade de infraestrutura laboratorial especializada e ao risco de contaminação durante a realização dos exames.

→ Apenas a fêmea consegue fazer a transmissão.

Flebotomíneo: encontram-se substâncias vasodilatadoras; Antiagregante plaquetárias; Anticoagulantes;

Duração do ciclo: 7-12 dias

Ciclo:

1. Ao se alimentarem do sangue de um hospedeiro infectado, as flebotomíneas são infectadas pela ingestão de macrófagos infectados por amastigotas.

2. No intestino médio das flebotomíneas, os amastigotas se transformam em promastigotas.

3. Se reproduzem em divisão binária (assexuada), se desenvolvem e migram para a probóscide.

4. Entrando na sua forma promastigotas metacíclicas (forma infectante).

Vertebrado:  

5. A leishmaniose é transmitida pela picada da fêmea do flebotomíneo infectado. Ao se alimentarem de sangue, os flebotomíneos injetam promastigotas metacíclicas (o estágio infeccioso) de sua probóscide.

6. Os promastigotas são fagocitados pelos macrófagos e outras células mononucleares fagocíticas.

7. Nessas células, os promastigotas se transformam em amastigotas (o estágio tecidual).

8. Os amastigotas se multiplicam por divisão binária e infectam outras células fagocíticas mononucleares.

  • É a resposta de hipersensibilidade celular retardada, ou seja, é um teste com o sistema imunológico do paciente para ver se ele reage a algum antígeno de leishmania;

 •  Intradermicamente, coloca-se antígenos de leishmania no paciente, como por exemplo, o parasita morto. Dessa forma, se o corpo já teve contato com o parasita, ele vai reagir, pois já foi anteriormente sensibilizado; 

 •  Pode ser negativo nas primeiras quatro a seis semanas após o surgimento da lesão cutânea, posto que ainda é muito recente e, também, se o sistema imunológico ainda não modulou uma resposta. Após esse período, a IDRM costuma ser positiva em mais de 90% dos pacientes; 

 •  Uma IDRM negativa em pacientes com lesões com mais de seis semanas de evolução indica a necessidade de outras provas diagnósticas para LT e diagnóstico diferencial; 

 •  Na leishmaniose cutânea difusa, a IDRM costuma ser negativa, pois como esse tipo ocorre em pacientes com o sistema imunológico debilitado, o corpo não vai reagir.

• Existe maior risco de desenvolver metástases para a mucosa em pessoas que possuem lesões cutâneas múltiplas, lesões em grande extensão e com mais de um ano de evolução, e localizadas acima da cintura, mais frequente no sexo masculino, podem apresentar lesões cutânea e mucosa ao simultaneamente.
 

• Lesão mucosa acontece por extensão de lesão cutânea adjacente ou começa na semimucosa exposta, é lesão indolor que inicia no septo nasal anterior, cartilaginoso, próximo ao introito nasal e a mucosa nasal é a mais acometida, embora possa ocorrer lesões em outros locais como no palato e lábios, por exemplo.

• Obstrução nasal, eliminação de crostas, epistaxe, disfagia, odinofagia, rouquidão, dispneia e tosse.

• Se existir infecção secundária e sinusite, pode acontecer dor local e cefaleia.

 • As lesões mucosas iniciais podem ser assintomáticas.

   •Início insidioso, lesão única e má resposta ao tratamento, evolui de maneira lenta com formação de placas e múltiplas nodulações não ulceradas recobrindo grandes extensões da pele, acontece em pacientes com anergia e deficiência específica na resposta imune celular a antígenos relacionado com Leishmania, é manifestação clínica rara e grave.

 • Sem manifestação clínica