https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y en-us 2022-11-05 19:02:36 UTC 2022-11-05 19:52:47 UTC hello@padlet.com annesophieboucher29 https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371256266 Méthode utilisée pour séparer des mélanges complexe]]> 2022-11-05 19:03:26 UTC https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371256266 annesophieboucher29 https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371256560 Chromatographie par gel-filtration (tamis-moléculaire)]]> 2022-11-05 19:04:03 UTC https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371256560 annesophieboucher29 https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371256693 Chromatographie par échange d'ions]]> 2022-11-05 19:04:21 UTC https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371256693 annesophieboucher29 https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371256803 Chromatographie d'affinité]]> 2022-11-05 19:04:35 UTC https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371256803 annesophieboucher29 https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371259320 - Grandes tailles: Déplacent vers le fond
- Petites tailles: Entrent dans les billes et se déplacent plus lentement

*molécules séparées selon leur taille et leur forme

]]> 2022-11-05 19:09:41 UTC https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371259320 annesophieboucher29 https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371260716 2022-11-05 19:12:29 UTC https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371260716 annesophieboucher29 https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371263071 1) pH de la solution: charge nette des protéines varie selon le pH
2) Nature & Concentrations des autres ions en solution: compétition pour les sites de liaisons de l'échangeur d'ions]]> 2022-11-05 19:16:57 UTC https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371263071 annesophieboucher29 https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371264016 2022-11-05 19:18:40 UTC https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371264016 annesophieboucher29 https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371264099 2022-11-05 19:18:49 UTC https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371264099 annesophieboucher29 https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371265019 - Les protéines portent à la fois des charges + et -

]]> 2022-11-05 19:20:34 UTC https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371265019 annesophieboucher29 https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371266210 2022-11-05 19:22:52 UTC https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371266210 annesophieboucher29 https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371266637 - QAE (fort)
- DEAE (faible)]]> 2022-11-05 19:23:44 UTC https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371266637 annesophieboucher29 https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371266672 - Sulfonates (fort)
- CM (faible)]]> 2022-11-05 19:23:50 UTC https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371266672 annesophieboucher29 https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371269097 2022-11-05 19:28:40 UTC https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371269097 annesophieboucher29 https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371270712 1. Liaison à la colonne: les protéines se lient aux échangeurs par des forces électrostatiques

2. Lavage: utilisation d'une solution tampon qui vient laver la colonne.

*Plus l'affinité d'une protéine est forte, plus la migration sera retardée

3. Élution: utilisation d'un gradient linéaire (KCl ou NACl)

*Le sel déplace directement la protéine; le sions occupent les sites chargés devenus disponibles et bloquent le rattachement de la protéine]]> 2022-11-05 19:32:01 UTC https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371270712 annesophieboucher29 https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371272557 Ce ne sont pas toutes les protéines qui peuvent passer dans les pores. Les protéines qui ne passent pas dans les pores traversent la colonne plus rapidemment.

Porosité dépend de:
- masse moléculaire du polymère
- nombre de liaisons croisées]]> 2022-11-05 19:35:27 UTC https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371272557 annesophieboucher29 https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371273251 2022-11-05 19:36:39 UTC https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371273251 annesophieboucher29 https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371275276 Permet de séparer les protéines selon leur taille grâce à l'utilisation de membranes semi-perméables

- petites molécules peuvent diffuser à travers la membrane
- membranes utilisées à base de Cellophane

*SALTING OUT]]> 2022-11-05 19:40:38 UTC https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371275276 annesophieboucher29 https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371275971 Filtre avec un cut-off permettant le passage de toutes les protéines plus petites que X]]> 2022-11-05 19:42:13 UTC https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371275971 annesophieboucher29 https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371277398 Liée au ligand = protéine immobilisée

Modifications:
1. Ajout un excès de ligand libre

2. Changer le pH ou la Température

*Permet de purifier la protéine en une seule étape]]> 2022-11-05 19:45:09 UTC https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371277398 annesophieboucher29 https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371278567 Quantité de ligand retenue dépend de:
- du Kd
- Concentration de protéines dans l'extrait
- Degré de liaison du ligand à la matrice]]> 2022-11-05 19:47:47 UTC https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371278567 annesophieboucher29 https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371279212 - Ca2+
-Biotin
-Amylose
-His-Tag]]> 2022-11-05 19:48:30 UTC https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371279212 annesophieboucher29 https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371280597 La matrice doit:
- etre chimiquement inerte
- avoir une grande porosité
- pérsenter de nombreus groupements fonctionnels

L'agarose est le plus souvent utilisé

Liaisons:
- Réaction d'agarose avec du bromure de cyanogène
- Produit donnée par covalence

Bras espaceur souple utilisé lorsque la matrice et le ligand ne peuvent pas se liés ensemble (ex: époxy)

]]> 2022-11-05 19:51:19 UTC https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371280597 annesophieboucher29 https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371281263 2022-11-05 19:52:40 UTC https://padlet.com/annesophieboucher29/30f03i0v066zr23y/wish/2371281263