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Caldo lactosado positivo - Tubo de Durham com bolhas de ar

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Caldo lactosado positivo - Tubo de Durham com bolhas de ar

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Uma diluição seriada é basicamente uma série de diluições simples que amplifica o fator de diluição. A fonte da amostra para diluição de cada etapa vem da diluição anterior.

Todas as diluições na série têm o mesmo fator de diluição, em que a amostra da diluição anterior é usada para fazer a diluição subsequente.

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Resultados da analise microbiológica do vídeo

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Resultados da analise microbiológica do vídeo

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Caldo lactosado: positivo
Verde brilhante: coliformes totais – negativo
Caldo EC: coliformes termotolerantes – negativo
Ágar PCA: contagem de microrganismos – positivo
Ágar saboroud: fungos filamentosos- negativo

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O objetivo da técnica de semeadura em Pour Plate é obter colônias isoladas. Nesta técnica, faz-se as diluições de 10-1 a 10-8, com auxílio da pipeta retira-se 1,0 mL de cada solução diluída e adiciona-se em placas estéreis, em seguida 15 a 20 mL de ágar fundido é adicionado por cima. As placas devem ser suavemente submetidas a movimentos rotatórios, visando uma perfeita mistura da cultura com o ágar. Nesta técnica deve-se tomar cuidado para não adicionar o meio em temperatura elevada sobre o inóculo, pois isto poderá matar os micro-organismos. Esta é uma técnica mais utilizada para o isolamento de bactérias.

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De acordo com os resultados da analise microbiológica do vídeo, você faria pesquisa de algum patógeno? Se sim, qual?  

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De acordo com os resultados da analise microbiológica do vídeo, você faria pesquisa de algum patógeno? Se sim, qual?  

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Sim, pois após um período de 24 a 48 h de incubação à temperatura de 32 a 37°C, os resultados mostraram que no caldo lactosado (seletivo no cultivo de coliformes totais e Salmonella) há presença de microrganismos, confirmado com a turbidez do tubo e a formação de bolhas no tubo Durham no teste feito em triplicata.  A fermentação de lactose com formação de gás, que é um indicativo da presença de E.coli é indicado pela presença do tubo de Durham . Dessa forma, deve-se fazer a pesquisa confirmatória de patógenos, para coliformes totais, Salmonella e E.coli.

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 O analisador mostrou crescimento "incontável" na metodologia pour-plate para contagem de colônias (UFC). Qual o erro de procedimento para ter essa contagem incontável? Como corrigir? 

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 O analisador mostrou crescimento "incontável" na metodologia pour-plate para contagem de colônias (UFC). Qual o erro de procedimento para ter essa contagem incontável? Como corrigir? 

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No vídeo é possível analisar que a amostra não foi diluída, o que implicou em um resultado de colônias incontáveis.  A diluição seriada é a técnica que permite a contagem do número de microrganismos de amostras com concentrações muito elevadas. Considerando-se que cada colônia de bactérias formada sobre um meio de cultivo se origine de uma unidade formadora de colônia (cadeia ou grumo de bactéria), quando a concentração de microrganismos inoculados é muito grande, haverá o crescimento de colônias de maneira sobreposta impossibilitando a contagem. Dessa forma,  a amostra deve então ser diluída seriadamente para que a concentração de microrganismos diminua, dando origem a colônias suficientemente separadas, possibilitando assim a contagem. Para a determinação do número de microrganismos da amostra original multiplica-se o número de colônias formadas a partir da amostra diluída, pelo volume de diluição.