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Os erros inatos do metabolismo (EIM) são distúrbios de natureza genética que geralmente correspondem a um defeito enzimático capaz de acarretar a interrupção de uma via metabólica. Ocasionam, portanto, alguma falha de síntese, degradação, armazenamento ou transporte de moléculas no organismo.

Tais erros do metabolismo são considerados a causa das Doenças Metabólicas Hereditárias (DMH) em que a ausência de um produto esperado, acúmulo de substrato da etapa anterior a interrompida ou o surgimento de uma rota metabólica alternativa podem levar ao comprometimento dos processos celulares.

Esse grupo de doenças representa cerca de 10% de todas as doenças genéticas. E ainda hoje, são tidos por muitos profissionais como casos extremamente raros de se deparar durante a prática clínica sendo, muitas vezes, a última hipótese diagnóstica.

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Nutrição nos Erros Inatos do Metabolismo - LIVE | GANuttrir

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Nutrição nos Erros Inatos do Metabolismo - LIVE | GANuttrir

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A Nutrigenética é a ciência que estuda o efeito da variação genética em resposta à dieta, ou seja, investiga especificamente os efeitos modificadores da herança (ou mutações adquiridas) em genes relacionados à nutrição. A Nutrigenômica é a ciência que estuda o papel dos nutrientes e compostos bioativos de diferentes alimentos na expressão dos genes.

A genômica nutricional é uma área muito promissora e revolucionária, pois trata o paciente dentro da sua individualidade genética, fornecendo aportes nutricionais mais adequados e fiéis às condições genéticas e uma melhor compreensão para a prevenção e tratamento de comorbidades, bem como, a promoção da saúde. Ela investiga como certos alimentos interagem com nossos genes e como podem afetar nossa saúde. É a área da nutrição em que ferramentas moleculares, como testes de DNA, são usadas para entender as respostas dos indivíduos à dieta.

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Genômica Nutricional - Você Bonita (22/07/16)

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Genômica Nutricional - Você Bonita (22/07/16)

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Doenças complexas são doenças que não apresentam um tipo de herança definido ou não possuem um erro metabólico específico que tenha sido identificado como sua causa. Contudo as suas características compartilhadas
indicam que estão sendo influenciados por alguns fatores genéticos.
Essas doenças não estão associadas a mutações em um ou dois genes, mas sim a um polimorfismo genético associado à ação de fatores extrínsecos.

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A família que ajudou a desvendar origem genética da esquizofrenia - BBC News Brasil

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Dalia Ventura

BBC News Mundo

Um dia, em 1972, em Woodmen Valley, um lugar cheio de florestas e terras agrícolas entre colinas íngremes e planaltos no Estado do Colorado, nos Estados Unidos, duas pessoas saíram de casa pela porta que levava ao quintal.

Donald, de 27 anos, de olhar profundo, cabeça raspada e o início de uma barba por fazer, caminhava com a irmã Mary, de 7, de cabelos loiros.

A cena era idílica: o quintal cheirava a pinho fresco e doce, pássaros voavam sobre o jardim enquanto o animal de estimação da família, um cachorro chamado Atholl, montava guarda.

Embora o irmão fosse mais velho, era Mary quem o levava para o topo de uma colina. Ela tinha um plano: queimá-lo na fogueira, como faziam com os hereges nos filmes que a mãe deles via.

O irmão havia sugerido que fizessem um balanço no galho de uma árvore, para o qual precisavam de uma corda, mas, uma vez que escolheram um dos pinheiros mais altos, a menina disse a Donald que o que ela queria era amarrá-lo na árvore.

Ele concordou sem problemas. Ela trouxe a lenha e a distribuiu ao redor dos pés descalços do irmão.

Meio século depois, a mesma Mary, que tinha mudado seu nome para Lindsay, contou ao jornalista e escritor Robert Kolker os fatos que marcaram aquele dia.

Ao lado da irmã Margaret, elas revelaram ao mundo a incrível história de uma família que, por um tempo, foi o retrato perfeito do sonho americano do pós-guerra, comandada por um veterano da Segunda Guerra Mundial e sua mulher, uma mãe que assava bolos e fazia as roupas para os 12 filhos (dez homens e duas mulheres).

Mas tudo não passava de fantasia - até mesmo essa história de Mary.

Não foi culpa da Mary

Donald não era um irmão comum. A vida de Mary também estava longe de ser corriqueira.

Donald a reverenciava porque estava convencido de que ela era Maria, a santa Virgem e mãe de Jesus Cristo. Ele, por sua vez, acreditava ter recebido um diploma em "exercício espiritual e teologia" das mãos de Santo Inácio.

Donald recitava em voz alta orações, como o Credo dos Apóstolos e o Pai Nosso, e uma ladainha que ele chamou de Sagrada Ordem dos Sacerdotes. Nomes e frases como "'Deo optimo maximo', Beneditino, Jesuíta, Ordem do Sagrado Coração, Imaculada Conceição, Maria Imaculada, Ordem dos Oblatos Sacerdotes..." eram entoadas dia e noite, sem cessar.

Em seus melhores dias, ele vestia um lençol marrom-avermelhado no estilo de um monge. Às vezes, completava o vestuário com um arco e flecha de plástico. Além disso, fazia caminhadas por horas, às vezes parando em lugares com pessoas - que faziam de conta que não o conheciam ou acabavam intimado ele a ir embora.

Em outros dias, permanecia nu, sentado na sala da casa, em completo silêncio.

Às vezes, Mary voltava da escola para encontrá-lo ocupado com tarefas que só ele conseguia entender, como tirar todos os móveis da casa ou jogar sal no aquário para envenenar os peixes.

A mãe, por sua vez, se comportava como se tudo fosse normal, mesmo tendo que chamar a polícia quando o filho tinha acessos de fúria e violência.

Enquanto os outros irmãos encontravam desculpas para ficar longe de Donald, Mary, a mais nova de todos, muitas vezes não tinha escolha a não ser ficar com ele.

E, apesar da pouca idade, sabia que não podia chorar nem reclamar: o irmão mais velho não era o único com comportamento estranho. Os pais sempre observavam todos os filhos, à espera de qualquer sinal preocupante.

Crédito, Arquivo pessoal

Legenda da foto,
Donald na capa do jornal Denver Post, 10 anos antes, caçando falcões para a Academia da Força Aérea dos EUA

No meio desse pesadelo, a menina de 7 anos teve a ideia do plano de se livrar do irmão queimando-o numa fogueira.

Mas tudo não passou de um grito de desespero: ela não cogitou matar Donald. Mary não era como os outros, e provaria isso para os pais e para si mesma.

Ela não sofria do mal que assolava a família, mas não conseguia escapar da sombra e dos efeitos de tudo aquilo.

Um traço comum

Toda essa história é apresentada por Robert Kolker no prefácio do aclamado livro The Boys of Hidden Valley Road: Inside the Mind of an American Family ("Os Meninos de Hidden Valley Road: Por Dentro da Mente de uma Família Americana", em tradução livre).

A obra é resultado de horas de entrevistas com os membros da família Galvin e de leituras de pesquisas e artigos científicos.

Os Galvin constituíram um caso único de uma doença desconcertante: a esquizofrenia.

Além de Donald (nascido em 1945), o primeiro a ser acometido pela enfermidade, outros cinco irmãos sofriam desse distúrbio cerebral que engloba uma ampla variedade de sintomas de maneiras completamente diferentes.

James (1947-2001), o segundo filho, brigava de forma brutal com Donald e agredia os membros mais indefesos da família, principalmente as meninas Mary e Margaret;

Matthew (1958), um ceramista talentoso que, quando não estava convencido de que era o músico Paul McCartney, acreditava que seus estados de ânimo influenciavam o clima;

José (1956-2009), o mais pacífico dos irmãos doentes, sempre ouviu vozes de épocas e locais diferentes;

Peter (1960), o menino rebelde, maníaco e violento. Durante anos, recusou toda ajuda oferecida;

Brian (1951-1973), a estrela do rock da família, que manteve os medos mais profundos em segredo - e, em uma explosão de violência, mudou a vida de todos para sempre.

"Brian foi morar na área da baía de San Francisco, se apaixonou, a família conheceu a namorada e tudo parecia estar indo bem. Mas um dia esse relacionamento terminou, e logo depois ele a matou e cometeu suicídio", lembra Lindsay.

"Foi uma grande reviravolta. Isso marcou o momento em que a família não conseguia mais esconder o que estava acontecendo. Eles não podiam mais ficar nas sombras e tiveram que pedir ajuda."

Os Galvin não tinham feito isso antes, explica o autor, porque "sabiam que, no momento em que tornassem público o que estava acontecendo, o destino de toda a família mudaria - e o futuro das crianças que não estavam doentes seria afetado". Eles então mantiveram a situação em segredo enquanto puderam.

Fim da linha

Mimi, a mãe, tinha aprendido a fingir que nada do que ocorria era estranho.

"Fazer qualquer outra coisa seria o mesmo que admitir que ela não tinha controle real sobre a situação, que não conseguia entender o que estava acontecendo na própria casa, e muito menos como controlar o problema", analisa Kolker.

"Mimi tomou muitas decisões que tiveram consequências brutais, que machucaram muitas das crianças. Mas, por outro lado, ela defendeu heroicamente os filhos doentes."

"Em outra família, eles poderiam acabar na rua e esquecidos", avalia o escritor.

Ela também teve que cuidar do marido, que sofreu um acidente vascular cerebral (AVC).

"Você pode até se perguntar por que ela não buscou ajuda de um médico - mas se pensar em como especialistas tratavam pessoas como problemas mentais na época, é possível compreendê-la. É aí que se começa a entender como a família estava presa, perdida e confusa."

Durante muito tempo, as opções terapêuticas mais comuns se limitavam a dois caminhos, informa o autor.

"Um grupo de médicos entendia que a esquizofrenia era um problema genético e tentavam curá-la com terapias de choque elétrico e lobotomias... eram colocados em hospitais psiquiátricos de onde nunca mais sairiam."

"Outra parcela dizia: 'A culpa é dos pais, então vamos tirar todas as crianças de casa, colocar as saudáveis ​​em abrigos e as doentes em hospitais psiquiátricos, para que nunca mais sejam vistas'."

Essa segunda opção devastou Mimi.

"Fiquei arrasada", revelou ela a Kolker. "Eu achava que era uma boa mãe. Assava um bolo e uma torta todas as noites. Sempre tinha gelatina com chantilly."

Do silêncio ao livro

O que então, após todos esses anos, levou os Galvin a querer tornar públicos os detalhes de uma história que havia sido mantida em silêncio por tanto tempo?

"As duas irmãs fizeram muita terapia para se recuperar dos traumas de infância e sentiram que a experiência delas poderia ser útil para outras pessoas", diz Kolker.

Além disso, Mimi já estava na casa dos 90 anos. A família então pensou: "É agora ou nunca".

No entanto, o interesse não era apenas contar o que aconteceu. "Eles também estavam genuinamente curiosos em saber se a família Galvin acabou contribuindo de alguma forma com a ciência", acrescenta Kolker.

"Eles sabiam que cientistas haviam estudado o caso deles, e que em algum momento foram vistos como um caso de grande importância, e achavam que alguém como eu poderia averiguar se isso teve alguma consequência."

O "perfil" genético da esquizofrenia tem desafiado o diagnóstico de casos até hoje, explica o autor.

Os pesquisadores sabem que um dos maiores fatores de risco para a doença é a hereditariedade, mas a enfermidade não parece ser transmitida diretamente de pais para filhos.

Psiquiatras, neurobiólogos e geneticistas achavam que havia uma mutação específica no DNA que provocava a enfermidade, mas não conseguiram encontrá-la.

Em virtude do grande número de casos, os Galvin ofereceram uma oportunidade rara: estudar seis indivíduos que compartilham uma linhagem genética idêntica, já que foram concebidos pelo mesmo pai e pela mesma mãe.

A partir da década de 1980, toda a família passou a ser objeto de pesquisas. O material genético deles foi analisado pelo Centro de Ciências da Saúde da Universidade do Colorado, pelo Instituto Nacional de Saúde Mental e por mais de uma farmacêutica.

Agora sabemos que amostras do material genético dos Galvin formaram a base de estudos científicos que ajudaram a entender melhor a esquizofrenia.

Ao analisar os DNAs deles e compará-los com amostras genéticas da população em geral, os pesquisadores ficaram ainda mais próximos de fazer avanços significativos no diagnóstico, no tratamento e até na prevenção da esquizofrenia, observa o escritor.

Por muito tempo, os Galvin não tinham ideia de que poderiam estar ajudando outras pessoas e do quanto a contribuição deles tinha sido promissora."

"Isso foi o que os deixou mais felizes", lembra Kolker.

A partir dos estudos com o DNA dos irmãos, foi possível descobrir que a esquizofrenia possui realmente um fundo genético. Isso enfraqueceu de vez as teorias de que a doença teria algo a ver com a educação ou à forma como foram criados pelos pais.

A família recebeu essas informações com alívio e satisfação. De repente, Mimi se dispôs a falar mais sobre o passado.

Vínculo inoxidável

Para o escritor, o que mais chamou a atenção foi que "os seis irmãos sem a doença mental encontraram seu caminho e levaram uma vida normal".

"Nenhum deles acabou como sem-teto ou viciado em drogas."

"Como você passa por uma infância tão complicada e encontra o próprio caminho no mundo? E como você reavalia o relacionamento com a família?", questiona.

"O simples fato de querer continuar a fazer parte daquele grupo depois de experiências tão traumáticas me surpreendeu. Por que eles não foram embora na primeira oportunidade e nunca mais voltaram?", pontua.

"Todos desenvolveram maneiras de permanecer conectados uns aos outros."

"Com Lindsay, por exemplo, pude ver como suas atitudes em relação à família foram mudando."

"Primeiro, ela quis ir embora, depois, veio a raiva. Na sequência, desejava resgatar alguns dos irmãos que ainda precisavam de ajuda e, finalmente, ela se estabeleceu em um papel de cuidadora muito semelhante ao que a mãe desempenhou por muitos anos", diz o autor.

"Quando ela era criança, não queria que os irmãos existissem. Agora, ela passa boa parte da vida cuidando deles."

Lindsay viveu décadas tentando entender a própria infância - e esse projeto continua de pé.

Ela aprendeu que a chave para entender a esquizofrenia é que essa chave continua distante e vaga.

Há uma lista de sintomas, várias formas de apresentação da doença e indicadores que se modificam de acordo com cada paciente.

Os psiquiatras dizem genericamente que a doença causa "afrouxamento das associações e pensamento desorganizado".

No entanto, quase ninguém pode explicar por que, quase meio século depois do dia em que ela e o irmão subiram a colina, Donald continua recitando a ladainha religiosa - ou por que, por quase tanto tempo, manteve a ideia fixa de que era filho de um polvo.

Mas assim que Donald vê a irmã mais nova chegar à instituição onde vive, se levanta, pronto para sair. Ele sabe que, quando Lindsay o visita, é para levá-lo para ver a família.

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A família que ajudou a desvendar origem genética da esquizofrenia - BBC News Brasil

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Em meio à beleza agreste de Colorado Springs, nos EUA, Don e Mimi Galvin eram a personificação do sonho americano no pós-guerra: uma família feliz com 12 filhos lindos e fisicamente saudáveis. O problema, porém, estava na mente (e nos genes) deles.

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Genetics of rheumatoid arthritis: a new boost is needed in Latin American populations

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A implicação genética na Artrite Reumatóide é evidente e avanços recentes têm expandido nosso conhecimento sobre os fatores genéticos que contribuem para a doença. Houve um incremento exponencial na quantidade de genes associados à doença descritos, principalmente por estudos de associação genômica ampla (GWAS) que envolveram consórcios internacionais com grandes grupos de pacientes. 

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A implicação genética na Artrite Reumatóide é evidente e avanços recentes têm expandido nosso conhecimento sobre os fatores genéticos que contribuem para a doença. Houve um incremento exponencial na quantidade de genes associados à doença descritos, principalmente por estudos de associação genômica ampla (GWAS) que envolveram consórcios internacionais com grandes grupos de pacientes. 

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A artrite reumatoide (AR) é uma doença reumática inflamatória autoimune que afeta vários órgãos e tecidos, predominantemente as articulações sinoviais. Como muitas outras doenças autoimunes, a AR é uma doença complexa, em que variantes genéticas, fatores ambientais e eventos aleatórios interagem e desencadeiam vias patológicas. A implicação genética na AR é evidente e avanços recentes têm expandido nosso conhecimento sobre os fatores genéticos que contribuem para a doença. Houve um incremento exponencial na quantidade de genes associados à doença descritos, principalmente por estudos de associação genômica ampla (GWAS) que envolveram consórcios internacionais com grandes grupos de pacientes. No entanto, há poucos estudos em populações latino-americanas. Este artigo descreve o que é conhecido sobre a genética na AR, o que vem a seguir e como isso vai desenvolver uma abordagem mais personalizada para o tratamento da doença. Os pacientes latino-americanos com AR não podem ser excluídos desse objetivo final e pode ser necessária uma maior colaboração com os consórcios internacionais para se obter um melhor conhecimento do perfil genético dos pacientes provenientes dessa região.

Palavras-chave:
Artrite reumatoide; HLA; Estudo de associação genômica ampla; Susceptibilidade genética; Polimorfismo de nucleotídeo único

Rheumatoid Arthritis (RA) is an autoimmune inflammatory rheumatic disease which affects several organs and tissue, predominantly the synovial joints. Like many other autoimmune diseases, RA is a complex disease, where genetic variants, environmental factors and random events interact to trigger pathological pathways. Genetic implication in RA is evident, and recent advances have expanded our knowledge about the genetic factors that contribute to RA. An exponential increment in the number of genes associated with the disease has been described, mainly through gene wide screen studies (GWAS) involving international consortia with large patient cohorts. However, there are a few studies on Latin American populations. This article describes what is known about the RA genetics, the future that is emerging, and how this will develop a more personalized approach for the treatment of the disease. Latin American RA patients cannot be excluded from this final aim, and a higher collaboration with the international consortia may be needed for a better knowledge of the genetic profile of patients from this origin.

Keywords:
Rheumatoid arthritis; HLA; Genome wide association studies; Genetic susceptibility; Single nucleotide polymorphism

A artrite reumatoide (AR) é uma doença reumática inflamatória autoimune que afeta muitos tecidos e órgãos, principalmente as articulações sinoviais. Essa doença leva à destruição progressiva da cartilagem articular e à anquilose das articulações. Subsequentemente, a formação de pannus pode levar à destruição da cartilagem subjacente e a erosões ósseas. O diagnóstico da AR é baseado em critérios clínicos e exames laboratoriais. Os anticorpos antiproteínas citrulinadas (ACPA) mostram alta especificidade para a AR. O teste de ACPA tornou-se um componente substancial dos atuais critérios de classificação para a AR do American College of Rheumatology (ACR)-European League Against Rheumatism (Eular). Além disso, tem sido descrito que os ACPA podem atuar na patogênese da doença.

A AR afeta aproximadamente 1% da população mundial. Nos últimos anos, foram publicados diversos estudos epidemiológicos sobre a AR que mostraram variações na incidência e prevalência da doença entre as populações. A maior parte dos estudos foi feita em países desenvolvidos do norte da Europa e da América do Norte e estimou prevalências entre 0,5 e 1,1%. Outros estudos feitos principalmente em países do sul da Europa relataram uma prevalência menor, em torno de 0,3 a 0,7%.⁻ As menores prevalências foram relatadas em áreas da África e da Ásia e as maiores em populações americanas nativas. Na verdade, a prevalência da AR é 10 vezes maior entre canadenses ou americanos nativos do que em europeus (3% e 0,3%, respectivamente)., Embora a doença possa ocorrer em qualquer idade, a AR afeta as mulheres mais frequentemente do que os homens e é diagnosticada principalmente entre os 40 e 60 anos, embora o mecanismo pelo qual o gênero influencia na susceptibilidade à AR ainda não seja claro. Outras características da AR são a heterogeneidade: os pacientes não constituem uma população homogênea e foram identificados alguns subgrupos clínicos de AR, como a doença ACPA-soropositiva versus ACPA-soronegativa, erosiva versus não erosiva, de curso progressivo versus curso leve.⁻

Como muitas doenças autoimunes, a etiologia da AR é multifatorial. A susceptibilidade genética é evidente em estudos com agrupamentos familiares e gêmeos monozigóticos, com 50% do risco de AR atribuíveis a fatores genéticos. Estimou-se que a herdabilidade da AR é de cerca de 60%. Além disso, a progressão da doença, o desfecho e o fenótipo da AR têm sido associados a fatores genéticos.,, Desse modo, é necessário compreender a base genética da AR a fim de desenvolver uma abordagem mais personalizada para o tratamento da doença. Os fatores de risco genéticos da AR podem ser classificados em dois grupos: 1) genes do complexo principal de histocompatibilidade (MHC) e 2) regiões não MHC. Curiosamente, os genes HLA e alguns não HLA têm sido associados ao desenvolvimento de anticorpos contra proteínas citrulinadas, o que diferenciou as duas entidades com características distintivas, a AR com sorologias ACPA-positiva e ACPA-negativa. Curiosamente, foram descritos vários polimorfismos genéticos associados a fatores ambientais em pacientes com AR, principalmente o tabagismo. O tabagismo e, possivelmente, outros fatores ambientais podem desencadear a produção de ACPA e o desenvolvimento de AR ACPA-soropositiva ( fig. 1)., Embora a etiologia da AR ainda não tenha sido elucidada, os seus sintomas se desenvolvem gradualmente em diferentes fases. Nesse desenvolvimento da doença, foi descrita uma "fase pré-clínica", em que vários marcadores imunológicos, como o ACPA ou o fator reumatoide (FR), às vezes tornam-se positivos anos antes do aparecimento de sintomas clínicos. Em resumo, a AR se desenvolve em indivíduos geneticamente predispostos submetidos a um obscuro conjunto de eventos de vida, especialmente o tabagismo ( fig. 1).

Região HLA

O mapa genômico do MHC humano (HLA) se estende por 7,6 Mb e contém aproximadamente 421 loci de genes em uma região contígua no cromossomo 6. Os loci de HLA clássicos, que desempenham um papel central no sistema imune, são chamados de -A, -B e -C (classe I) e -DRB1, -DQB1 e -DPB1 (classe II). Em particular, os genes de HLA de classe I e classe II codificam para proteínas que se ligam a antígenos peptídicos pequenos, carregam-nos na superfície celular e os apresentam, assim, ao sistema imunológico. Por conseguinte, essa região genômica é crucial para a resistência e susceptibilidade do organismo a fatores patogênicos.

Já se passaram 35 anos desde que foi publicado que a região HLA contribui para a susceptibilidade à AR, especificamente o alelo HLA-DR4, mas o mecanismo exato que determina a predisposição é desconhecido. Entre os genes do HLA, os alelos HLA-DRB1 com epítopos compartilhados (EC) que codificam uma sequência comum de aminoácidos são o fator de risco mais importante descrito para a susceptibilidade e progressão da AR. A presença de EC sugere que os alelos HLA que o contêm se ligam ao mesmo antígeno, postulam a apresentação de autopeptídeos artritogênicos ou o mimetismo molecular com antígenos estranhos, e/ou moldam o repertório de linfócitos T-antígeno. Os alelos HLA-DRB1 com EC estão fortemente associados à AR ACPA-positivo. Enquanto isso, os alelos HLA-DRB1 com EC contribuem com 18% para a hereditariedade da AR ACPA-positiva, ao passo que contribuem com somente 2,4% com a hereditariedade da AR ACPA-negativa. A relação entre a molécula HLA-DRB1 com EC e os ACPA na patogênese da AR tem sido explicada pela ligação do peptídeo citrulinado com o bolso de moléculas DRB1 que contêm o epítopo compartilhado e a consequente ativação de linfócitos T CD4+ e a polarização para células Th17, uma subpopulação Th envolvida principalmente em processos autoimunes. Os alelos HLA-DRB1 com EC estão presentes em 64 a 70% dos pacientes com AR e em 55% dos seus parentes de primeiro grau; essa frequência é significativamente superior à observada em populações- controle (35,8%)., Em pacientes com AR ACPA-positivos, 80% têm pelo menos um EC, enquanto 49% dos pacientes com AR ACPA-negativos têm EC. Essa interação entre os fatores de risco genéticos e a presença de autoanticorpos aumenta o risco de parentes de primeiro grau de pacientes com AR desenvolverem AR.,

A hipótese dos EC permanece controversa, porque sugere a existência de um peptídeo autoantigênico que ainda não foi identificado. Diversas outras doenças, como a diabete tipo I, a artrite psoriática, o lúpus, a leucemia linfoide crônica de início precoce e outras condições, e essa promiscuidade são incongruentes com os princípios da teoria da apresentação de antígeno restrita ao MHC. Embora os alelos HLA-DRB1 que contêm o epítopo sejam fatores de risco genético estabelecidos na AR, as implicações imunológicas precisas de sua expressão não são claras. Além disso, relatou-se que os alelos de epítopo compartilhado no locus HLA-DRB1 não explicam completamente a associação da região de MHC com a doença.⁻

Associações genéticas não HLA

A patogênese da AR tem uma base poligênica. Acredita-se que cerca de 50% do risco da AR sejam genéticos e um terço desse risco pertença ao locus HLA. Assim, a variação genética pode ser explicada por alelos de risco na AR em locus não HLA. Houve um aumento exponencial na quantidade de genes associados à AR nos últimos anos, como mostra a figura 2. Especificamente, além do locus HLA-DRB, mais de 46 loci de risco de AR não HLA surgiu a partir de estudos de associação genômica ampla (GWAS) e subsequentes metanálises de conjuntos de dados de GWAS,, todos eles em indivíduos de ascendência europeia. Descreveu-se outra metanálise de GWAS na população japonesa, que identificou nove loci novos associados à AR. O estudo citado forneceu evidências de sobreposição significativa nos riscos genéticos de AR entre as populações japonesa e europeia e contribuiu para uma maior compreensão da etiologia da AR. Os GWAS são considerados uma das principais ferramentas para determinar as ligações genéticas com uma doença. As pesquisas científicas atuais têm feito muitas dessas análises. Cada um desses estudos genotipa pelo menos 100 mil polimorfismos de nucleotídeo único (SNP), tem uma visão imparcial de todo o genoma e, portanto, tem uma maior probabilidade de detectar uma associação com um marcador genético e de fornecer potência suficiente aos estudos. A figura 2 captura as principais regiões de associações com a AR que são estatisticamente significativas. Um estudo recente descobriu 42 novos loci de risco para a AR em um nível de significância genômica amplo e elevou o total para 101. Este trabalho genotipou cerca de 10 milhões de SNP em mais de 100 mil indivíduos de ascendência europeia e asiática, 29.880 pacientes com AR e 73.758 controles. Em resumo, os pesquisadores foram capazes de estabelecer 98 genes que poderiam potencialmente contribuir para o surgimento da AR. Muitos desses genes também atuam em outras doenças, incluindo distúrbios de imunodeficiência primária humanos e cânceres de sangue. Eles descobriram muitos genes que se sobrepõem e contribuem para condições que já são alvo de fármacos existentes, mas que não eram conhecidas quando esses medicamentos foram desenvolvidos. Este estudo fornece evidências de que a genética das doenças poderia contribuir para uma maior compreensão biológica e para a descoberta de medicamentos.

O estudo da genética em populações latino-americanas não é um assunto trivial. A expressão de variantes genéticas é modificada por diversos fatores ambientais e a importância da origem étnica na genética é controversa. Os latino-americanos têm sido erroneamente designados "hispânicos" e considerados homogêneos. Na verdade, as origens e os destinos das populações não indígenas têm dependido do momento e das razões para a migração e o grau de mistura varia entre os países da América Latina de acordo com o principal componente de ascendência da população.

Existem desafios importantes para encontrar genes de susceptibilidade à AR nessas populações. A comunidade hispânica é uma população mista e as diferenças de frequências alélicas entre grupos étnicos podem interferir nos estudos de associação e levar a resultados falso-positivos. Assim, nos GWAS, estudos de genes candidatos e replicação de GWAS, as diferenças encontradas nas frequências alélicas podem ser originadas mais pelas diferenças na estrutura das populações do que pelo fenótipo da doença. No entanto, existem abordagens para superar o problema da estrutura da população, como usar marcadores informativos de ancestralidade (AIMS), ou incluir o teste de associação estruturado (Structure) e a análise de componentes principais para ajustar as estratificações da população nos estudos.,

Embora já tenha havido muito progresso em detectar os genes implicados na susceptibilidade à AR, pouco se sabe sobre a susceptibilidade genética nas populações "hispânicas" das Américas. Isso é principalmente decorrente da dificuldade de fazer estudos de associação em populações mistas e do fato de a energia necessária para identificar associações genéticas nessas populações ser maior do que nas populações mais homogêneas. São encontrados alguns estudos de associação na AR em populações hispânicas ameríndias e mistas e foi observada uma associação mais forte na região do HLA de classe II. Especificamente, foram relatadas associações genéticas da AR com os alelos HLA-DRB1 em americanos nativos, americanos de ascendência mexicana, população colombiana, população chilena, população peruana, população brasileira e população mexicana mestiça com uma maior proporção de ascendência europeia.del Rincón I, Escalante A. HLA-DRB1 alleles associated with susceptibility or resistance to rheumatoid arthritis, articular deformities, and disability in Mexican Americans. Arthritis Rheum. 1999;42:1329-38. ⁴²

El-Gabalawy HS, Robinson DB, Hart D, Elias B, Markland J, Peschken CA, et al. Immunogenetic risks of anti-cyclical citrullinated peptide antibodies in a North American Native population with rheumatoid arthritis and their first-degree relatives. J Rheumatol. 2009;36:1130-5.

Anaya JM, Correa PA, Mantilla RD, Arcos-Burgos M. Rheumatoid arthritis association in Colombian population is restricted to HLA-DRB1*04 QRRAA alleles. Genes Immun. 2002;3:56-8.

González A, Nicovani S, Massardo L, Aguirre V, Cervilla V, Lanchbury JS, et al. Influence of the HLA-DR beta shared epitope on susceptibility to and clinical expression of rheumatoid arthritis in Chilean patients. Ann Rheum Dis. 1997;56:191-3.

Castro F, Acevedo E, Ciusani E, Angulo JA, Wollheim FA, Sandberg-Wollheim M. Tumour necrosis factor microsatellites and HLA-DRB1*, HLA-DQA1*, and HLA-DQB1* alleles in Peruvian patients with rheumatoid arthritis. Ann Rheum Dis. 2001;60:791-5.

Usnayo MJ, Andrade LE, Alarcon RT, Oliveira JC, Silva GM, Bendet I, et al. Study of the frequency of HLA-DRB1 alleles in Brazilian patients with rheumatoid arthritis. Rev Bras Reumatol. 2011;51:474-83. ⁻ Uma metanálise feita em populações latino-americanas estimou a relevância dos alelos HLA-DRB1 na susceptibilidade à AR, confirmou uma associação significativa entre a AR e o gene HLA-DRB1 e revalidou a hipótese do epítopo compartilhado em populações latino-americanas. Um estudo recente examinou o loci de susceptibilidade para a AR entre indivíduos da América Latina com uma ancestralidade genética ameríndia e europeia mista. Esses estudos genotiparam 196.524 marcadores, cobriram o loci anteriormente associado a várias doenças autoimunes, em 1.475 pacientes com AR e 1.213 controles. Foi observada uma forte associação genética da AR com a região do MHC, com três efeitos independentes, provavelmente decorrente da origem diversa das amostras. No mesmo estudo, foram encontradas associações com a AR previamente relatadas em GWAS (populações europeias e asiáticas), mas com valores significativos moderados (incluindo os genes STAT4, IRF5, IL2RA, SPRED2, CCL21 e PTPN22). Além disso, foram identificadas duas novas associações putativas no gene ENOX1 do cromossomo 13 e no gene NNA25 do cromossomo 12. Os resultados desse estudo de associação em grande escala forneceram novas perspectivas para a base genética da AR em indivíduos latino-americanos. Vários desses achados precisam ser reproduzidos e fornecem um impulso para estudos futuros. Além disso, fornecem conclusões interessantes sobre a complexidade observada das associações da AR com a região HLA, provavelmente como consequência da diversidade de origem.

As análises genéticas feitas nos últimos anos revelaram uma nova imagem para a patogênese da AR e nos tornaram conscientes da heterogeneidade entre indivíduos e populações.

A pesquisa genômica avança rapidamente com a genotipagem dos SNP e com o conseguinte sequenciamento do genoma, duas técnicas que melhoram a nossa compreensão da etiopatogenia da AR. O objetivo final nos próximos anos é identificar variantes genéticas envolvidas nas diferentes manifestações clínicas e características associadas à AR e, desse modo, predizer a evolução da doença e, por fim, estabelecer novos tratamentos para a AR com base no prognóstico do indivíduo e possibilitar o desenvolvimento de tratamentos personalizados para a AR. Outros aspectos, como a epigenética e a farmacogenética,, exigem pesquisas mais aprofundadas a fim de determinar qualquer papel que possam ter na AR. Em relação a esse último ponto, o objetivo final da farmacogenética na reumatologia é definir subgrupos de pacientes geneticamente distintos, que tenham respostas diferenciadas às várias terapias usadas no tratamento de doenças reumáticas. Um vasto e crescente corpo da literatura descreve a farmacogenética dos medicamentos usados no tratamento da AR.⁻ No entanto, não existem dados sobre a farmacogenética da AR em populações latino-americanas.

Podem ocorrer variações na frequência de determinados genótipos entre os grupos étnicos; em decorrência disso, estudos de associação genética feitos na América Latina devem ter um potente "controle populacional". A grande e diversificada população da América Latina é um recurso poderoso para elucidar a base genética de traços complexos como a AR.

Estudos multicêntricos têm se mostrado altamente relevantes na compreensão de fatores de risco genético em doenças complexas. Portanto, é necessário um esforço adicional na busca por predisposições genéticas desconhecidas e para esclarecer as diferenças nas funções entre os grupos étnicos, incluindo populações latino-americanas. As pesquisas na área genômica têm avançado muito rapidamente com a genotipagem dos SNP e GWAS e avançarão ainda mais com as novas técnicas maciças de sequenciamento. Desse modo, um melhor conhecimento sobre a base genética da AR em populações latino-americanas sem dúvida contribuiria para uma melhor compreensão da patologia dessa doença.

Este trabalho foi apoiado pela Fondecyt, bolsa nº 11130198.

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Genetics of rheumatoid arthritis: a new boost is needed in Latin American populations

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ABSTRACT Rheumatoid Arthritis (RA) is an autoimmune inflammatory rheumatic disease which affects...

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O envelhecimento é um processo dinâmico, no qual ocorrem modificações do nível molecular ao morfo-fisiológico, logo após a maturidade, que induzem ao declínio orgânico, aumentando a susceptibilidade e vulnerabilidade a doenças e à morte. A genética do envelhecimento dedica-se ao estudo da contribuição hereditária da espécie e sua interação com o ambiente, que incidem no aumento de modificações biológicas ao longo do tempo. Fez-se uma revisão sobre estudos realizados na área e que sugerem que o envelhecimento está sob um controle genético-ambiental.

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GENÉTICA E ENVELHECIMENTO: Do que falamos?

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Nos dias de hoje, muito se fala sobre genética, gens, células tronco, epigenética!!!!Do que estamos falando?Qual a relação disso com envelhecimento?O que são as terapias genéticas?  Conversamos com o Prof Dr Michel Naslavsky, Geneticista, Biólogo, Prof Dr do Departamento de Genética do Instituto de Biociências  da USP, Membro do Centro de Estudos sobre o Genoma Humano e Células Tronco – CEDIP e Perquisador Visitante do Big Data do Hospital Israelita Albert Einstein.

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Nos dias de hoje, muito se fala sobre genética, gens, células tronco, epigenética!!!!Do que estamos falando?Qual a relação disso com envelhecimento?O que são as terapias genéticas?  Conversamos com o Prof Dr Michel Naslavsky, Geneticista, Biólogo, Prof Dr do Departamento de Genética do Instituto de Biociências  da USP, Membro do Centro de Estudos sobre o Genoma Humano e Células Tronco – CEDIP e Perquisador Visitante do Big Data do Hospital Israelita Albert Einstein.

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GENÉTICA E ENVELHECIMENTO: Do que falamos?

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Aspectos genéticos do envelhecimento e doenças associadas: uma complexa rede de interações entre genes e ambiente

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O organismo humano, desde sua concepção até a morte, passa por diversas fases: desenvolvimento, puberdade, maturidade ou estabilização e envelhecimento. E de maneira semelhante às outras fases do desenvolvimento, o envelhecimento também é marcado fundamentalmente por uma série de mudanças que vão desde o nível molecular até o morfofisiológico. Essas mudanças têm início relativamente cedo, ao final da segunda década da vida, perdurando por longo tempo pouco perceptível, até que surjam, no final da terceira década, as primeiras alterações funcionais e/ou estruturais atribuídas ao envelhecimento.

Em animais complexos, incluindo os seres humanos, o processo de envelhecimento é inexorável. Tal processo condiciona a um progressivo decréscimo na capacidade fisiológica e na redução da habilidade de respostas ao estresse ambiental, levando a um aumento da suscetibilidade e vulnerabilidade a doenças.

A par dessas evidências, somente na segunda metade do século passado é que o estudo do envelhecimento e doenças associadas abandonou a província das especulações, e os estudos experimentais e clínicos multiplicaram-se. Em seguida, muitos aspectos do envelhecimento e do idoso passaram a ser discutidos e mais bem conhecidos, permitindo, então, que o estudo aprofundado do fenômeno envelhecimento passasse para ramo central do desenvolvimento científico. A fisiologia celular e a compreensão da imensa rede interconectada do genoma humano têm demonstrado que o fracasso em manter a eficácia de toda a maquinaria que constitui o organismo vivo é um fator inerente ao seu desenho evolutivo, mas não impossível de ser manejado.

Neste sentido, um questionamento feito freqüentemente é se existiria diferença entre desenvolvimento e envelhecimento? Considerando que no momento da fecundação o organismo passa a se autodeterminar, em termos de crescimento e morfo-diferenciação, e assim continua ao longo do seu amadurecimento e reprodução, o envelhecimento seria a última etapa do desenvolvimento.

Entretanto, muitas vezes o termo desenvolvimento é utilizado para identificar todas as mudanças que parecem conduzir a um aumento e eficácia do funcionamento de um organismo. O termo envelhecimento, embora seja difícil estabelecer uma definição conceitual, é freqüentemente empregado para descrever as mudanças morfofuncionais ao longo da vida, que ocorrem após o período reprodutivo sexual e que progressivamente comprometem a capacidade de resposta dos indivíduos ao estresse ambiental e à manutenção da homeostasia. Finch ressalta que o envelhecimento apresenta, como única característica universal, a observação dessas mudanças ao longo do tempo, independentemente de terem ou não efeito deletério sobre a vitalidade e longevidade. O termo envelhecimento também é usado para descrever virtualmente todas as mudanças dependentes do tempo às quais as entidades biológicas, das moléculas aos ecossistemas, são sujeitas, embora os mecanismos e conseqüências para a funçãopossam ser bastante diferentes.

Em revisão sobre a biologia do envelhecimento, Troen descreveu que existiriam dois tipos de envelhecimento: o biológico normal e o usual. O envelhecimento normal envolve as mudanças biológicas inexoráveis e universais, características do processo, tais como cabelos brancos, rugas, menopausa, perda da função renal, etc. Entretanto, no envelhecimento usual, além destas alterações biológicas, observamos o aumento da prevalência de doenças crônicas. Essas doenças se originam do acúmulo de danos, ao longo da vida, oriundos sobretudo da interação entre fatores genéticos com hábitos não-saudáveis, como uma dieta desbalanceada, tabagismo, etilismo e sedentarismo. Um estilo de vida inapropriado acaba aumentando a ineficiência metabólica, que contribui substancialmente para a quebra da homeostasia corporal. Tal fato torna o indivíduo pouco a pouco mais suscetível a lesões orgânicas, culminando no desencadeamento de patologias associadas. Adicionalmente, a alteração da homeostase em indivíduos idosos é provavelmente o resultado de um programa genético que determina uma maior ou menor suscetibilidade e vulnerabilidade a doenças, e em última instância, a morte. Dentre as patologias associadas à idade, a doença cardiovascular é uma das principais representantes do cenário usual de doenças associadas ao envelhecimento. Esta constatação pode ajudar na identificação de causas intrínsecas (genes) e extrínsecas (ambiental) que afetam de maneira singular e diferencial o processo de envelhecimento em cada indivíduo.

O estudo da genética do envelhecimento surge como mais uma ferramenta imprescindível para ajudar a montar o quebra-cabeça complexo e intricado que é o processo de envelhecimento e morte de um organismo. O estudo abrange a análise de padrões de herança que determinam a variação na amplitude de tempo de vida e o desenvolvimento de doenças crônico-degenerativas associadas.

Dentro da genética do envelhecimento existem três importantes focos de estudo com abordagens inter-relacionadas, as quais podemos citar:

estudo da herança genética familiar: os estudos em genética humana são mais difíceis de serem realizados do que em animais inferiores e em plantas, devido a uma série de questões éticas e metodológicas envolvidas, mas em estudos familiares, sobretudo com gêmeos, tanto monozigóticos quanto os dizigóticos, é possível verificar que os princípios da hereditariedade também têm validade com relação ao modo de transmissão de inúmeros caracteres humanos. A hereditariedade é uma força conservadora que confere estabilidade a sistemas biológicos. Contudo, nenhum mecanismo composto de moléculas e sujeito aos impactos e interferências do ambiente pode ser perfeito. Com isso é possível produzir seqüências alteradas de DNA-Mutações que são perpetuadas ⁵ 6. Finch CE, Ruvkun G. The genetics fo aging. Annu Rev Genomics Human Genet 2001 ; 2: 435-62.

Entre os princípios mais importantes da hereditariedade estão os de que o fluxo de informações do genótipo para o fenótipo é unidirecional e que as unidades hereditárias transmissíveis mantêm sua identidade de geração para geração. Contudo, o ambiente pode interferir na transmissão dos caracteres hereditários e induzir a variação. Assim, a não-linearidade da resposta de alguns genótipos à mudança de ambiente resulta na existência de fenótipos distintos como produtos dessa interação. Isso explica por que muitas doenças crônicas (Alzheimer, doenças cardiovasculares e diabetes mellitus tipo 2) têm herdabilidade relativamente baixa, menos de 40%.6,25 Os estudos com gêmeos e de história familial fornecem informações valiosas em relação ao padrão de herança de determinada característica (ligada ao sexo, autossômica dominante ou recessiva, etc.), a distribuição das freqüências alélicas e genotípicas dentro de uma população, mas, acima de tudo, contribui imensamente para o entendimento das doenças crônico-degenerativas que afetam o segmento idoso.

1. estudo das modificações epigenéticas do envelhecimento: refere-se ao estudo de mudanças na expressão gênica que ocorrem sem uma mudança na seqüência de DNA. Pesquisas têm mostrado que mecanismos epigenéticos proporcionam um controle transcricional extra, que regulam o modo como os genes são expressos. Esses mecanismos são componentes críticos no crescimento e desenvolvimento normal das células. O genoma humano contém 23.000 genes que devem ser expressos em células específicas em tempo precisos. Mudanças estruturais da cromatina influenciam a expressão gênica: genes são inativados quando a cromatina está condensada (silenciosa); genes são ativados quando a cromatina está aberta (ativa). Estes estados dinâmicos da cromatina são controlados por padrões epigenéticos reversíveis, como metilação do DNA e modificações em histonas. ²¹22. Schachter F , Faure-Delanef L , Guenot F , et al . Genetic association with human longevity at the APOE and ACE loci . Nature Genetics 1994 , 6 : 29 - 32 . , ⁴5. Finch CE , Tanzi RE . Genetics of aging . Science 1997 ; 278 : 407 - 11 . Diversos estudos têm mostrado que anormalidades epigenéticas estão envolvidas no câncer, desordens genéticas e síndromes pediátricas, bem como contribui para doenças auto-imunes e envelhecimento. ²⁰ 21. Rountree MR , Bachman KE , Herman JG , et al . DNA methylation, chromatin inheritance, and cancer . Oncogene 2001 ; 20 : 3156 - 65 .

2. estudo da expressão de genes associados ao envelhecimento: em humanos, o estudo da expressão de genes associados ao envelhecimento está amplamente direcionado para genes mutados, que são responsáveis pela aceleração do processo de envelhecimento, do que genes que podem retardar esse processo. A existência de doenças geneticamente herdáveis que manifestam vários fenótipos do envelhecimento são conhecidas há bastante tempo. Tais distúrbios genéticos são denominados de síndromes progeróides, porque elas aceleram alguns, mas não todos, os sinais do envelhecimento normal ( Tabela 1 ). As síndromes progeróides são causadas por mutações em um gene que está envolvido em um ou mais processos de manutenção e integridade do genoma (replicação, reparo, transcrição e recombinação) para a manutenção somática durante o envelhecimento. Alguns genes são importantes candidatos associados ao envelhecimento, como mostra a tabela 1 .

Tabela 1
Características gerais de síndromes progeróides e as patologias associadas ao envelhecimento precoce em humanos. 12,13,14,15

No ser humano é muito difícil separar a genética do envelhecimento, da genética da longevidade. Isto porque os diferentes genes envolvidos para uma maior ou menor longevidade podem responder a diversos estímulos ambientais, que quando somados podem afetar diretamente no fenótipo, podendo acelerar ou retardar o processo de envelhecimento. Deste modo, estudos que estabeleçam as relações e interações entre polimorfismos genéticos, ambiente, envelhecimento e resposta adaptativa são fundamentais para o entendimento da determinação dos diferentes fenótipos ligados ao envelhecimento.

A convicção de que genes, bem como o ambiente e fatores comportamentais podem influenciar a taxa de envelhecimento dentro de uma espécie, se consolidou a partir da demonstração de que é possível selecionar linhagens de Drosophila com longevidade aumentada ou curta. Com relação à mosca-das-frutas Drosophila, cientistas têm identificado uma variedade de mutações que aumentam a expectativa de vida ou modificam a extensão da expectativa de vida, através de outras mutações ou por interações genético-ambientais. Tais genes são denominados genes da longevidade. Entretanto, camundongos também são ótimos modelos experimentais muito utilizados em estudos sobre o desenvolvimento e envelhecimento, devido a sua anatomia mais complexa e ao conhecimento a respeito de seu metabolismo e fisiologia. Alguns genes já foram identificados, e mutações nos mesmos, afetando a sua função, influenciam no desenvolvimento e na longevidade. Os genes da longevidade podem influenciar na expectativa de vida de várias formas: ,

1. a total ou parcial ablação do gene pode aumentar ou diminuir a expectativa de vida;

2. a superexpressão do gene ou um alelo particular pode aumentar ou diminuir a expectativa de vida;

3. a interação com o ambiente pode interferir na extensão da expectativa de vida.

Mas afinal, que genes seriam estes e em que rotas metabólicas estariam atuando?

Evidências científicas mais recentes sugerem que não é só o estilo de vida do indivíduo adulto que interfere na evolução de doenças na velhice. As condições de vida pré-natal e pós-natal também são importantes e precisam ser controladas, a fim de diminuir a prevalência dessas doenças na população. Estudos mostraram que condições de desnutrição detectadas pelo baixo-peso ao nascer tornam esses indivíduos mais suscetíveis a doenças cardiovasculares na fase adulta, bem como a deficiência de alguns compostos nutricionais, como é o caso do folato.

Estudos recentes têm demonstrado que, ainda que a deficiência do folato na gestação não chegue a gerar fetos malformados, a mesma modifica padrões do desenvolvimento (principalmente do cérebro) que aumentam a suscetibilidade da criança para desenvolver, na fase da adolescência e do adulto jovem, distúrbios neuropsiquiátricos como a esquizofrenia, etc. A influência da nutrição materno-infantil nas doenças adultas é explicada através da hipótese de que a deficiência do folato faz com que as células que estão sendo formadas no embrião precisem se adaptar metabolicamente à falta do composto. Tal adaptação, que não é esperada no desenvolvimento normal, é transmitida a todas as células que se originarão e, assim, permanecem na fase adulta e idosa da pessoa.

As evidências de que as condições intra-uterinas podem afetar a suscetibilidade a doenças crônicas não-transmissíveis nos idosos impulsionaram a construção de um novo conceito da "epidemiologia do curso de vida".

Segundo a hipótese de Baker et al. , fatores ambientais, principalmente a nutrição, atuam em estágios iniciais do desenvolvimento, programando os riscos para o surgimento precoce de doenças cardiovasculares e distúrbios metabólicos, bem como morte prematura (adultos jovens). A hipótese gerada por Baker et al. propunha que alterações na nutrição e no estado endócrino do feto resultariam em adaptações de desenvolvimento que modificariam permanentemente sua estrutura, fisiologia e metabolismo.

Talvez este seja o mais dramático exemplo de que a interação gene-ambiente afete o envelhecimento e a longevidade. Isto porque o desenvolvimento, em todos os estágios, obedece a um programa genético bem estabelecido, ainda que tenha alguns períodos mais flexíveis a respostas ambientais. Sendo assim, a interferência na programação genética do desenvolvimento cria uma cascata de eventos metabólicos que atuam na vida tardia do indivíduo. Talvez esta seja uma das explicações da razão pela qual muitas vezes indivíduos sem risco genético ou ambiental aparente acabam desenvolvendo tais morbidades.

A idéia de que os estados nutricionais da fase intra-uterina e do início da infância podem afetar a prevalência de doenças crônico-degenerativas atinge o Brasil de modo dramático, já que a população mais pobre, além de ser mais suscetível às doenças transmissíveis, tende a concentrar grupos mais suscetíveis a doenças crônico-degenerativas como obesidade, hipertensão, dislipidemia, doenças cardiovasculares, entre outras.

Nestes termos, o lançamento de programas de prevenção baseados no repasse de informações a indivíduos adultos ou idosos também deve ser feito de modo paralelo à implementação de um programa de educação para a saúde, a partir da idéia de que os educadores de todos os níveis e especializações precisam ser capacitados com conhecimento que permita desenvolver metodologias educacionais voltadas à formação de uma nova consciência, tanto nas novas gerações quanto nas mais idosas, com vistas a uma vida saudável.

Os conhecimentos sobre genética, biologia molecular e evolutiva do envelhecimento, aliados aos fatores ambientais, tais como nutrição, estilo de vida e características biopsicossociais, são o caminho para se começar a desvendar a rede de complexidade biológica que envolve os processo de saúde, doença, envelhecimento e longevidade humana. A partir desses conhecimentos, será possível desenvolver drogas mais eficazes e com menos efeitos adversos, bem como construir estratégias que permitirão "a personalização da prevenção" de múltiplas doenças ligadas ao envelhecimento, desde as fases mais precoces da vida.

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Aspectos genéticos do envelhecimento e doenças associadas: uma complexa rede de interações entre genes e ambiente

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Resumo O envelhecimento é um processo dinâmico, no qual ocorrem modificações do nível molecular...

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A reprodução assistida é um conjunto de técnicas médicas, como a inseminação artificial e a fertilização in vitro, que auxiliam na reprodução humana em situações específicas. Entre elas, infertilidade, idade avançada, casais homoafetivos, gestação independente e planejamento familiar visando a redução de riscos genéticos.

Segundo informações do SisEmbrio (Sistema Nacional de Produção de Embriões) da Anvisa (Agência Nacional de Vigilância Sanitária), o Brasil registrou em 2022 um total de 97.312 embriões congelados. Os estados que lideram em número de embriões congelados foram São Paulo, com 53.076; Rio de Janeiro, com 5.160; e Minas Gerais, com 5.830. Tais dados destacam a concentração da prática na região Sudeste.

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Lili Dantas e Paty Luna são mães do João e do Joaquim e criadoras do perfil “Duas Mães de Dois”. Elas compartilham detalhes do processo de reprodução assistida para um casal lésbico desde o primeiro passo, que, segundo elas, é o simples fato de querer ser mãe, até o momento em que o resultado positivo surge no teste de gravidez.

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Lili Dantas e Paty Luna são mães do João e do Joaquim e criadoras do perfil “Duas Mães de Dois”. Elas compartilham detalhes do processo de reprodução assistida para um casal lésbico desde o primeiro passo, que, segundo elas, é o simples fato de querer ser mãe, até o momento em que o resultado positivo surge no teste de gravidez.

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Neste segundo episódio do podcast Mais Abraços, mergulhamos no mundo da reprodução assistida. Nossos convidados são Lili Dantas e Paty Luna, mães de João e Joaquim e criadoras do perfil Duas Mães de Dois, que partilham a sua jornada como tentantes e os desafios encontrados no processo. Também temos…

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Aspectos legais e sociais by Fertilidade Sem Tabu

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By Grupo Huntington/Pró-Criar

Em episódios semanais, conheça histórias reais de pessoas que já passaram por tratamentos de fertilidade em busca do desejo de terem filhos. Com a participação da equipe multidisciplinar e corpo clínico do Grupo Huntington.

E confira também os principais temas da reprodução humana em diversos podcasts.

Aspectos legais e sociais

Fertilidade Sem TabuJun 23, 2023

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Aspectos legais e sociais by Fertilidade Sem Tabu

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Quais regras regem a ovodoação no Brasil, que pode ser feita de maneira anônima - que é o que acontece na maioria dos casos - ou por uma parente de até quarto grau? Quais são os principais aspectos legais, éticos e sociais da ovodoação?

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Por serem a segunda principal causa de óbitos em países desenvolvidos e em desenvolvimento, as doenças oncológicas têm sido prioridade nas iniciativas dos países, no que diz respeito à medicina genômica e à saúde de precisão.

Ao longo das últimas décadas, diversos estudos clínicos estabeleceram uma relação entre determinados genes e a predisposição a tipos específicos de câncer.

A Oncogenética surgiu da união entre as áreas da oncologia e genômica. Esta união se tornou essencial para a categorização do conhecimento sobre o câncer, uma vez que os mecanismos que governam o desenvolvimento dessas doenças estão contidos no material genético humano.

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Ciência, Tecnologia e Inovações em Oncologia | Revista Brasileira de Cancerologia

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Ciência, Tecnologia e Inovações em Oncologia | Revista Brasileira de Cancerologia

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Erros inatos do metabolismo: o que são - Teste da Bochechinha

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Entenda o que são erros inatos do metabolismo, quais são as causas e como a detecção precoce é importante e pode ser feita pelo Teste da Bochechinha.
O que são os erros inatos do metabolismo?

Os erros inatos do metabolismo são , na maior parte hereditárias, que causam o mau funcionamento de alguma via metabólica relacionada ao processamento ou armazenamento de moléculas presentes nos alimentos, como carboidratos, proteínas e ácidos graxos. Com isso, o paciente tem níveis alterados de substâncias que são importantes para o bom funcionamento do organismo.

A detecção precoce é essencial para o tratamento dessas doenças, pois ele precisa ser iniciado o mais cedo possível para evitar as consequências graves para o paciente.
Existem centenas de doenças no grupo dos erros inatos do metabolismo, o que pode tornar o diagnóstico correto desafiador.
Quais são as causas dos erros inatos do metabolismo?

Os erros inatos do metabolismo são causados por alterações em genes que produzem enzimas envolvidas em diversos processos metabólicos. Assim, com o mau funcionamento da enzima, a via metabólica é prejudicada.
As mutações que causam os erros inatos do metabolismo são na maior parte dos casos herdadas de um ou de ambos os pais, mas também podem surgir espontaneamente pela primeira vez no indivíduo (mutações de novo).
Exemplos de doenças do grupo do erros inatos do metabolismo

Os erros inatos do metabolismo podem ser classificados em grandes categorias dependendo do tipo de via metabólica afetada. Confira alguns exemplos abaixo.

Doenças do ciclo da uréia: caracterizadas pelo acúmulo de compostos nitrogenados, como a uréia. Exemplos: citrulinemia, arginemia, deficiência de ornitina transcarbamilase.

caracterizadas pelo acúmulo de ácidos orgânicos no organismo. Exemplos: acidemia propiônica, acidemia metilmalônica, Acidemias orgânicas: doença do xarope de bordo.

caracterizados pela ineficiência na oxidação dos ácidos graxos para produzir energia. Exemplos: Distúrbios da oxidação de ácidos graxos: deficiência de acil-CoA desidrogenase de cadeias médias, deficiência de carnitina-palmitoil transferase 2 (CPT II).

caracterizados pela ineficiência no processamento de aminoácidos. Exemplos: Aminoacidopatias: fenilcetonúria, tirosinemias, homocistinúria.

caracterizados pela ineficiência no processamento de carboidratos, como os açúcares. Exemplo: Distúrbios do metabolismo de carboidratos: galactosemias, frutosemia.

causadas por disfunções no funcionamento das mitocôndrias, responsáveis pela produção de energia nas células. Exemplos: deficiência da proteína trifuncional mitocondrial, deficiência de piruvato desidrogenase, Doenças mitocondriais: acidúria glutárica.

resultam no mau funcionamento do lisossomo e no acúmulo gradual de substratos dentro dele. Exemplos: Doenças lisossômicas: doença de Gaucher, doença de Fabry, doença de Pompe.

Como os erros inatos do metabolismo são herdados?

Grande parte dos erros inatos do metabolismo têm padrão de herança autossômica recessiva, ou seja, é preciso herdar cópias alteradas do gene associado à doença tanto da mãe quanto do pai.

Nesse tipo de herança, quando a pessoa possui somente uma cópia alterada (do pai ou da mãe), ela não desenvolve sintomas, mas é portadora, e tem um risco aumentado de ter filhos com doença.

Apesar de menos comum, existem erros inatos do metabolismo com padrão de herança autossômica dominante ou ligada ao cromossomo

Quais os sintomas e os tratamentos para os erros inatos do metabolismo?
A fenilcetonúria, por exemplo, pode ser manejada evitando alimentos ricos em fenilalanina, como carnes e laticínios, dentre outros. Já a deficiência de biotinidase é tratada com suplementação oral de biotina. Saiba mais sobre o tratamento nutricional para doenças raras.
Como são doenças que afetam diferentes genes, os erros inatos do metabolismo têm um grande conjunto de sintomas. Um dos sintomas mais comuns desse grupo de doenças é a presença de anormalidades neurológicas, que acontecem em cerca de 80% dos casos e incluem convulsões, não atingir os marcos de desenvolvimento e tônus muscular prejudicado. Além disso, sintomas gastrointestinais também são comuns, como vômitos, intolerância a alguns alimentos, diarreia e desidratação.
Apenas um médico pode indicar o melhor tratamento para cada paciente, com base em seu histórico de saúde. Consulte sempre um médico!
Os erros inatos do metabolismo afetam vias metabólicas causando acúmulos ou deficiências de substâncias no organismo, assim os tratamentos para essas doenças envolvem a regulação dos níveis metabólicos dessas substâncias.

Quanto antes a doença for identificada, maior é a chance do tratamento ser efetivo e de controlar os sintomas do paciente, melhorando sua qualidade de vida. Os tratamentos para os erros inatos do metabolismo são muito eficientes, principalmente se a doença foi diagnosticada precocemente.

Como é feita a detecção dos erros inatos do metabolismo?

Os erros inatos do metabolismo se manifestam geralmente logo após o nascimento ou na infância, mas muitas vezes são diagnosticados somente após meses ou anos do aparecimento dos sintomas
Em 2021 foi aprovado o Projeto de Lei nº 5043 que visa ampliar o Teste do Pezinho para abranger mais de 50 doenças raras e graves em todo o país nos próximos anos. A implementação dessas mudanças será de forma gradual (em etapas).
Como essas doenças afetam vias importantes no organismo, a detecção precoce é essencial para que o tratamento possa ser iniciado o mais cedo possível, minimizando consequências mais graves da doença.
O armazenamento inadequado das amostras de sangue do Teste do Pezinho pode prejudicar a análise de algumas enzimas, como a biotinidase, que são sensíveis ao calor e decaem com o tempo, o que pode resultar em falsos-positivos.
O Teste do Pezinho , um teste de triagem neonatal obrigatório para todos os recém-nascidos no Brasil e oferecido gratuitamente pelo Sistema Único de Saúde (SUS), avalia algumas doenças desse grupo, como a fenilcetonúria e a deficiência de biotinidase.

O Teste da Bochechinha, a triagem neonatal genética desenvolvida pela , avalia dezenas de erros inatos do metabolismo dentre as mais de 340 doenças analisadas. Todas as doenças investigadas no teste são tratáveis e se desenvolvem na infância.

O Teste da Bochechinha é um teste de triagem neonatal que avalia o DNA do recém-nascido em busca de alterações genéticas que aumentam o risco para o desenvolvimento de doenças. Por ser um teste de triagem (feito em recém-nascidos assintomáticos) não é necessário pedido médico, mas reforçamos a importância do acompanhamento de um especialista durante todo o desenvolvimento do bebê.

Exames de diagnóstico genético (feito em recém-nascidos sintomáticos), como o Painel de Doenças Tratáveis da Mendelics, precisam de pedido médico.

Por que o Teste da Bochechinha é importante para a detecção precoce dos erros inatos do metabolismo?

O Teste da Bochechinha utiliza uma amostra de saliva coletada da parte interna da bochecha do recém-nascido. A coleta é simples, rápida e indolor, feita com um cotonete .

O Teste do Pezinho e o Teste da Bochechinha são complementares . O Teste da Bochechinha não substitui o Teste do Pezinho .

O que são os erros inatos do metabolismo?

São doenças genéticas, na maior parte hereditárias, que causam o mau funcionamento de alguma via metabólica relacionada ao processamento ou armazenamento de moléculas presentes nos alimentos, como carboidratos, proteínas e ácidos graxos.
O que causa os erros inatos do metabolismo?
Os erros inatos do metabolismo são condições hereditárias causadas por alterações em genes que produzem enzimas envolvidas em diversos processos metabólicos. Assim, com o mau funcionamento da enzima, a via metabólica é prejudicada.
Como detectar os erros inatos do metabolismo?
O Teste do Pezinho, oferecido pelo SUS, detecta a fenilcetonúria e a deficiência de biotinidase, porém outros erros inatos não são detectados. Já o Teste da Bochechinha, teste de triagem neonatal genética da Mendelics, pode detectar dezenas de outras doenças desse grupo, de forma complementar ao Teste do Pezinho.

Referências

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Erros inatos do metabolismo: o que são - Teste da Bochechinha

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Entenda o que são erros inatos do metabolismo, as causas e como a detecção precoce é importante e pode ser feita pelo Teste da Bochechinha.

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As vacinas gênicas ou de terceira geração, são produzidas a partir de fragmentos do material genético (DNA ou RNA) de um patógeno, onde os genes ou fragmentos de genes que codificam antígenos potencialmente imunizantes são carreados por DNA plasmidial.

A vacina de DNA pode se tornar a maior ferramenta de combate a doenças infecciosas para as quais, até hoje, não existe prevenção segura e eficaz, como herpes, síndrome da imunodeficiência adquirida (AIDS), malária, tuberculose, hepatite, esquistossomose e dengue, dentre outras. Além disso, elas têm grande potencial de aplicação na prevenção e cura de determinados tipos de câncer.

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Como funciona o regime que usa as informações do DNA de cada um para acabar com os quilos em excesso. O que a ciência diz sobre o método e por que ele ainda causa polêmica entre os médicos

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As vacinas de RNA contra Covid-19 podem alterar o DNA?

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As vacinas de RNA contra Covid-19 podem alterar o DNA?

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Questionamentos a respeito das imunizações unem teoria da conspiração e falácia da autoridade Nas últimas semanas de 2020 viralizaram nas redes sociais trechos de uma entrevista da médica estadunidense Christiane Northrup em que ela diz que vacinas de RNA, como a da Pfizer, contra a Covid-19

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É possível uma vacina gênica auxiliar no controle da tuberculose?

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Vacina Gênica no controle da tuberculose 

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Vacina Gênica no controle da tuberculose 

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ARTIGO DE REVISÃO

É possível uma vacina gênica auxiliar no controle da tuberculose?

José Maciel Rodrigues Júnior; Karla de Melo Lima; Arlete Aparecida Martins Coelho Castelo; Vânia Luiza Deperon Bonato Martins; Sandra Aparecida dos Santos; Lucia Helena Faccioli; Célio Lopes Silva

RESUMO

Vacinas de DNA, ainda em fase de experimentação e testes clínicos, podem se tornar uma importante ferramenta de combate a doenças infecciosas para as quais, até hoje, não existe prevenção segura e eficaz, como a tuberculose. Nos últimos anos vários estudos têm sido dedicados ao desenvolvimento de vacinas de DNA que codificam proteínas de micobactérias, entre as quais destacam-se as que codificam o antígeno 85 (Ag 85) e a proteína de choque térmico de 65 kDa (hsp65). Estes dois antígenos foram os mais estudados apresentando resultados bastante satisfatórios em ensaios pré-clínicos e com grande volume de dados registrados na literatura. Além de proteger contra infecção experimental por Mycobacterium tuberculosis virulenta, a vacina DNA-hsp65 também apresenta atividade terapêutica, ou seja, é capaz de curar os animais previamente infectados, inclusive aqueles com bacilos resistentes a múltiplas drogas. Esta vacina, hoje em avaliação clínica no Brasil também para o tratamento de câncer, é capaz de induzir a produção de citocinas de padrão Th1 tal como IFN- interferon-gama, associadas ao controle da doença. Além disso, a vacina de DNA-hsp65 é capaz de estimular clones de células CD8 citotóxicos e CD4 que podem ser caracterizados como células de memória sendo responsáveis por conferir imunidade duradoura contra a infecção. Quando utilizada na terapia da infecção, a vacina de DNA-hsp65 faz com que haja uma mudança no padrão de resposta imune, induzindo a secreção de citocinas de padrão Th1 criando um ambiente favorável à erradicação do bacilo. Os resultados demonstram ainda que a via de administração e a formulação na qual a vacina é administrada exerce fundamental influência no padrão e duração da resposta imune desencadeada. O conjunto de resultados hoje disponíveis mostra que uma vacina de DNA contra a tuberculose contribuirá de maneira significativa no controle desta doença.

Descritores: Tuberculose/epidemiologia. Vacina de DNA/uso terapêutico. Proteínas do choque térmico. Auto-imunidade.

Siglas e abreviaturas utilizadas neste trabalho:

AIDS - Síndrome da imunodeficiência adquirida

Ag 85 - Antígeno 85

TB - Tuberculose

BCG - Bacilo Calmette-Guérin

RT-PCR - Reverse transcription polymerase chain reaction

AIDS - Síndrome da imunodeficiência adquirida

OMS - Organização Mundial da Saúde

Hsp65 - Proteína de choque térmico de 65 KDa

PLGA - Ácido poli-lático e glicólico

DMT - Dimicolato de trealose

MHC - Complexo principal de histocompatibilidade

IL - Interleucina

IFN - Interferon

O que é vacina de DNA

Nas últimas décadas, os avanços na tecnologia de vacinas permitiram a introdução de novas estratégias para a obtenção e produção de antígenos, assim como foram otimizadas novas maneiras de se administrar e apresentar esses antígenos para as células do sistema imune. Essas estratégias abriram caminhos para inovações, particularmente no contexto do desenvolvimento de vacinas mais seguras, eficazes e polivalentes. Entre estas estão as vacinas, consideradas de segunda geração, de sub-unidades constituídas de antígenos purificados ou recombinantes provenientes da cultura dos agentes infecciosos, ou obtidos por meios sintéticos. Mais recentemente, surgiram as vacinas gênicas ou de terceira geração, onde os genes ou fragmentos de genes que codificam antígenos potencialmente imunizantes são carreados por DNA plasmidial.

A vacina de DNA, ainda em fase de experimentação e testes clínicos, pode se tornar a maior ferramenta de combate a doenças infecciosas para as quais, até hoje, não existe prevenção segura e eficaz, como herpes, síndrome da imunodeficiência adquirida (AIDS), malária, tuberculose, hepatite, esquistossomose e dengue, dentre outras. Além disso, elas têm grande potencial de aplicação na prevenção e cura de determinados tipos de câncer.

O isolamento de genes é um processo de domínio da comunidade científica devido ao grande desenvolvimento de técnicas de biologia molecular. Para a construção da vacina de DNA, os genes, freqüentemente relacionados com a expressão de moléculas associadas com a virulência ou patogenia dos agentes infecciosos, são clonados e inseridos em um fragmento de DNA circular denominado plasmídeo. Os plasmídeos usados em vacinas gênicas devem ter: origem de replicação em bactérias, o que permite a sua eficiente duplicação, chegando a centenas de cópias por célula; um gene de seleção, que geralmente confere resistência a um antibiótico, permitindo assim a seleção dos clones de células que carregam o plasmídeo; um sítio múltiplo de clonagem que pode ser clivado com enzimas de restrição, permitindo a inserção do gene de interesse, que no caso das vacinas é um gene que codifica um antígeno; um promotor, geralmente um promotor viral, que permite a transcrição do gene de interesse em células eucariotas. Após a clonagem do gene que codifica o antígeno vacinal no plasmídeo, ele é introduzido em uma bactéria hospedeira, geralmente Escherichia coli, por um processo denominado de transformação bacteriana, com a finalidade de se produzir plasmídeos em larga escala e haver quantidade suficiente de DNA para a vacinação propriamente dita⁽¹⁾.

A administração da vacina de DNA pode ser feita em várias espécies animais e no homem por diversas vias e esquemas. Além da injeção intramuscular, que é a via mais utilizada, as vacinas gênicas também podem ser administradas por via intranasal, na forma de aerossol, por via oral ou por via intradérmica por meio de bombardeamento de micropartículas de ouro cobertas com o material genético. Embora a injeção intramuscular seja um processo simples e de baixo custo, sua utilização na maioria das vezes requer uma quantidade elevada de plasmídeo para estimular uma resposta imune adequada. Solução de glicose hipertônica para edemaciar o tecido muscular⁽²⁾, ou de anestésicos locais, como a bupivacaína, que são capazes de lesar o tecido e causar uma reação inflamatória⁽³⁻⁵⁾, têm sido empregados como alternativas para aumentar a transfecção de antígenos, para os macrófagos e células dendríticas, após a injeção intramuscular. Entretanto, tais procedimentos não são aceitáveis para utilização em clínica humana devido aos seus efeitos colaterais. A injeção intramuscular do plasmídeo é uma técnica simples, mas expõe o DNA a uma série de inconvenientes no local de administração como a presença de enzimas (nucleases) capazes de degradar o DNA plasmidial, tornando-o ineficaz para induzir a resposta imune.

Outro fato relevante refere-se ao tamanho da molécula de DNA e à sua carga negativa superficial, que limitam sua penetração na célula-alvo, sendo necessárias doses maiores de DNA para indução de uma resposta imune significativa. Um pré-requisito para a eficácia do uso de DNA como vacina ou terapia gênica está relacionado à liberação efetiva do ácido nucléico na célula-alvo. O ácido nucléico deve atingir o núcleo da célula e isto tem sido viabilizado pelo uso de vetores vivos (bacterianos e virais) e não vivos (sistemas sintéticos). Existe uma estimativa de que apenas uma em cada 1.000 moléculas de plasmídeo administradas é capaz de atingir o núcleo e expressar a mensagem para a síntese da proteína desejada, fazendo com que um tratamento usual exija a administração de doses elevadas de DNA plasmidial, da ordem de algumas centenas de microgramas a miligramas. O DNA recombinante com grau farmacêutico pode ser obtido por meio de expressão em bactérias transformadas e purificado por uma série de métodos cromatográficos, permitindo sua obtenção em grande escala⁽⁶⁾.

Perspectivas de uma vacina de dna contra tuberculose

Atenção especial vem sendo dada para o desenvolvimento de vacinas mais efetivas contra a tuberculose. A tuberculose (TB) persiste como a doença infecciosa que mais causa mortes em todo o mundo e, recentemente, atingiu a marca de 10 milhões de novos casos e 3 milhões de mortes por ano, 18,5% de todas as mortes em adultos entre 15 e 59 anos, o que corresponde à fase mais produtiva da população mundial. Segundo a Organização Mundial da Saúde (OMS) 32% da população mundial estão infectados. Na última década, 300 milhões de pessoas foram infectadas, 90 milhões de novos casos da doença foram notificados e cerca de 30 milhões morreram. Em 1993 a tuberculose foi declarada emergência global pela OMS e o M. tuberculosis é agora considerado o agente infeccioso responsável por mais mortes em adultos do que qualquer outro.

Várias vacinas candidatas ao combate à tuberculose vêm sendo estudadas. Dentre elas destacam-se as que codificam o antígeno 85 (Ag 85) e a proteína de choque térmico de 65 kDa (hsp65). Esses dois antígenos foram os mais estudados, e apresentaram resultados bastante satisfatórios em ensaios pré-clínicos, com grande volume de dados registrados na literatura. Neste artigo serão abordados os resultados obtidos com a hsp65.

Para o desenvolvimento de uma vacina de DNA contra a tuberculose, Silva et al. introduziram nos plasmídeos pCDNA3 ou pHMG o gene de um dos antígenos imunodominantes de micobactérias, a proteína de estresse hsp65 de M. leprae. Efetivamente, ambos os plasmídeos dirigem a expressão do gene hsp65 micobacteriano em células de mamíferos⁽⁷⁻⁹⁾. Os plasmídeos contendo o gene micobacteriano foram inoculados por via intramuscular em camundongos. Todos os testes de vacinação foram comparados com um grupo de animais inoculados somente com BCG intradérmico ou com plasmídeos sem o gene hsp65. A produção de anticorpos específicos no soro dos animais imunizados com o DNA hsp65 foi observada duas semanas após a terceira dose do plasmídeo. A indução da resposta imune celular foi detectada por um teste específico, que é a medida da capacidade proliferativa dos linfócitos presentes nos nódulos linfáticos, quando colocados na presença do antígeno hsp65. Mediadores e reguladores da resposta imune, como as interleucinas, também foram detectados no sobrenadante de cultura, ou nos próprios linfócitos dos animais imunizados, tanto por técnicas de ELISA quanto por RT-PCR. Nestes, estava aumentada a liberação de interferon-gama (IFN-³), e de interleucina (IL-2 e IL-12), consideradas citocinas estimulatórias da resposta imune celular do tipo Th1, mas não de IL-4, IL-10 e IL-13, que são supressoras dessa resposta. Portanto, o padrão de resposta imunológica induzida nos camundongos, pela imunização com o DNA hsp65, foi demonstrado ser do tipo Th1, o qual é altamente favorável para a eliminação de agentes infecciosos.

Proteção induzida pela vacina de DNA

A imunização de camundongos com DNA hsp65 foi altamente efetiva para proteger os animais contra posterior infecção com M. tuberculosis, sendo o efeito protetor muito semelhante àquele apresentado pelos animais vacinados com BCG⁽¹⁰⁾. Com base nestes dados, foram clonados outros antígenos micobacterianos (hsp70, hsp10, 36 KDa e ESAT6) nos plasmídeos pCDNA3 e pHMG e posteriormente testadas as suas atividades protetoras. Os DNAs que codificam os antígenos hsp70 e ESAT6 induziram proteção significativa, porém menor que aquela mostrada pela hsp65. Por outro lado, as imunizações com DNA que expressa hsp10 e 36 KDa não mostraram atividade protetora contra infecção por M. tuberculosis. Em resumo, esses estudos demonstraram que as inoculações das vacinas de DNA que codificam os genes das proteínas imunogênicas hsp65, hsp70 e 36 KDa por via intramuscular, associados aos promotores do CMV e da hidroxi-metil-glutaril-CoA redutase, conferem proteção significativa contra infecção por M. tuberculosis em camundongos⁽¹¹⁾.

Células envolvidas com a proteção e estudos sobre memória imunológica

Vários estudos foram conduzidos por Silva et al. no sentido de melhor caracterizar as sub-populações celulares associadas ao controle do processo infeccioso, bem como aos mediadores envolvidos (interleucinas) e às funções efetoras desencadeadas no decorrer do processo de ativação celular. A compreensão destes fatores contribui para o entendimento dos mecanismos imunes envolvidos na patogenia da tuberculose, permitindo novas perspectivas para o controle da enfermidade. Estudos comparando animais infectados com M. tuberculosis e vacinados com DNA-hsp65 foram realizados para estabelecer relações entre o fenótipo das sub-populações de células T, os mediadores liberados por estas células, e a expressão de moléculas relacionadas com migração celular e memória imunológica (CD44).

Células T de animais previamente vacinados foram transferidas para animais não imunizados e desafiados concomitantemente com M. tuberculosis H37Rv. Estes animais controlaram melhor a infecção quando comparados com animais que foram somente infectados com os bacilos. O fenótipo celular associado à proteção foi caracterizado por células que apresentaram elevada expressão de CD44 em sua superfície (CD44 hi). Estas células CD44 hi de animais imunizados foram capazes de controlar melhor a proliferação dos bacilos quando comparadas às células CD44 lo destes mesmos animais imunizados e às células CD44 hi ou CD44 lo de animais infectados. Verificou-se também que entre as células CD44 hi, as células CD8⁺/CD44 hi foram mais eficientes que as células CD4⁺/CD44 hi no controle da infecção, impedindo a multiplicação dos bacilos. Ainda com relação ao fenótipo celular que confere proteção na infecção pelo M. tuberculosis, foi demonstrado que as células CD44 hi produziam predominan-temente IFN-³, enquanto as células CD44 lo produziam preferencialmente IL-4(7,12).

Com a finalidade de melhor definir o fenótipo das células que conferiam proteção na infecção micobacteriana, foram selecionados clones T CD4⁺/CD44 hi, T CD4⁺/CD44 lo, T CD8⁺/CD44 hi e T CD8⁺/CD44 lo, provenientes de animais vacinados e infectados. As células T CD4⁺ e T CD8⁺ foram obtidas por seleção negativa e separadas por FACSort em sub-populações CD44 hi e CD44 lo. Por meio da técnica de diluição limite, foram selecionados 16 clones T CD4⁺ e 16 clones T CD8⁺ de animais imunizados e de animais vacinados com o DNA hsp65. Estes clones foram caracterizados quanto à expressão de CD44 (CD44 hi ou CD44 lo), produção de IFN-³ ou IL-4 e capacidade citotóxica. Os resultados mostraram que os quatro clones CD8⁺/CD44 hi, obtidos de animais imunizados, produziam IFN-³ e eram citotóxicos. Estes clones conferiam maior proteção aos animais infectados quando comparados aos clones T CD8⁺/CD44 lo. Todos os quatro clones T CD4⁺/CD44 hi também secretavam IFN-³ e três eram citotóxicos. No entanto, a capacidade de proteção destes clones foi inferior à dos clones T CD8⁺/CD44 hi. Quanto aos clones obtidos de animais infectados, verificou-se que dos quatro clones T CD8⁺/CD44 hi, somente dois produziam IFN-³ e eram citotóxicos, enquanto os outros dois produziram IL-4 e não apresentaram capacidade citotóxica(7,12,13) .

Nesse contexto, a vacinação com DNAhsp65 resultaria na formação de um conjunto de clones de células CD4 e CD8 que expressariam altos níveis de CD44. Os clones CD44 hi poderiam estar relacionados com funções de memória imunológica e, possivelmente, com uma migração mais rápida para o local de infecção, onde poderiam encontrar a célula apresentadora de antígeno adequada. Assim, estes resultados indicam que a imunização prévia, atrvés de veículos e vias adequadas, seria importante para desencadear resposta imune específica, tanto local como sistêmica, eficiente no controle da infecção micobacteriana.

Uso de carreadores na vacina gênica contra tuberculose

Em relação à vacina de DNA baseada na proteína hsp65, até então utilizada como DNA nu e administrada por via intramuscular, múltiplas doses de grandes quantidades de plasmídeo são necessárias, no mínimo 3 doses de 100 mg, para promover a proteção ou cura efetiva em modelo experimental de tuberculose em camundongos ¹⁴. Entretanto, no que diz respeito às vacinas em desenvolvimento, existe uma necessidade de simplificar os esquemas de imunização, reduzindo-se o número de doses necessárias para estimular imunidade protetora. Para isso, diferentes estratégias têm sido empregadas envolvendo a utilização de diferentes tipos de adjuvantes⁽¹⁵⁾.

A fim de otimizar a vacina visando a redução da quantidade de DNA injetada, avaliou-se a sua administração pela via intradérmica com o uso de gene gun. Entretanto, dados de estudos comparativos mostram que a injeção intramuscular de DNA induz preferencialmente um padrão Th1 de resposta imune, enquanto que o bombardeamento com gene gun apresenta uma tendência para o desencadeamento de padrão Th2 de resposta. De fato, a administração de DNA-hsp65 por gene gun estimulou ambos os tipos de resposta humoral e celular com uma dose 100 vezes menor do que a utilizada nos protocolos convencionais de injeção intramuscular. Os níveis de imunoglobulinas das subclasses IgG1 e IgG2a apresentaram diferenças, sendo que o gene gun estimulou preferencialmente anticorpos da subclasse IgG1, o que sugere uma ativação de resposta de padrão Th2. Além disso, os camundongos BALB/c imunizados com DNA-hsp65 por injeção intramuscular produziram altos níveis de IFN-³, enquanto que a imunização por gene gun não induz a produção de IFN-³, mas sim de citocinas de padrão Th2 como IL-10 e IL-4, podendo tal resposta ser associada à pequena quantidade de DNA utilizada nesta técnica. A redução na quantidade de DNA vem acompanhada da redução da quantidade de motivos CpGs. De fato, os camundongos imunizados com DNA-hsp65 por injeção intramuscular apresentaram redução da carga bacilar nos pulmões. Já os animais imunizados por gene gun não foram capazes de reduzir a carga bacilar, o que indica que esta técnica, embora permita o desencadeamento de resposta imune específica com doses significativamente menores de DNA, não é adequada para a administração da vacina de DNA-hsp5 visando ao combate à tuberculose⁽¹⁶⁾.

Uma segunda estratégia para otimizar a vacina de DNA-hsp65 consistiu no seu encapsulamento em microesferas poliméricas biodegradáveis. Os resultados demonstraram que o DNA pode ser encapsulado nas microesferas de ácido poli-lático e glicólico (PLGA) sem o comprometimento da sua funcionalidade. O método utilizado permitiu a obtenção de partículas com um tamanho adequado para promover a vetorização para células fagocitárias, além de apresentar uma boa eficiência de encapsulação do DNA. Os estudos in vitro demonstraram que células fagocitárias capturam as microesferas de PLGA, que por sua vez liberam o DNA encapsulado, o qual dirige a síntese da proteína antigênica. Então, a utilização de microesferas de PLGA pode ser uma importante ferramenta para o direcionamento do DNA para células apresentadoras de antígenos profissionais, após injeção intramuscular ou subcutânea. A capacidade de transfectar as células apresentadoras de antígeno profissionais diretamente pode ser interessante visto que vários trabalhos demonstram que peptídeos antigênicos, envolvidos na estimulação de linfócitos T citotóxicos após vacinação com DNA, são apresentados no contexto de complexo principal de histocompatibilidade (MHC) classe I de células derivadas de medula-óssea e não pelos miócitos transfectados⁽¹⁷⁻¹⁹⁾. Então, quando diretamente transfectadas in vivo, estas células que expressam moléculas co-estimulatórias na sua superfície apresentam antígenos fornecendo os sinais necessários para a estimulação de linfócitos T. Após a injeção intramuscular, as microesferas ainda formam um depósito tecidual recrutando células apresentadoras de antígeno para o sítio de administração, o que facilita a captura das partículas pelas mesmas e, conseqüentemente, a sua transfecção. As microesferas são capazes de melhorar a apresentação do antígeno, mas não apresentam nenhuma propriedade imunoestimulante. Portanto, a formulação de microesferas contendo DNA foi capaz de estimular resposta imune específica, mas esta não foi suficiente para proteger camundongos BALB/c contra infecção desafio por M. tuberculosis.

A fim de melhorar a capacidade imunogênica da formulação de microesferas, utilizou-se como estratégia a combinação de adjuvantes com propriedades imunoestimulantes e carreadoras empregando a tecnologia de microencapsulação. Foi elaborada uma nova formulação contendo a vacina de DNA-hsp65 e um composto imunoestimulante, o dimicolato de trealose (DMT), ambos encapsulados em microesferas biodegradáveis⁽²⁰⁾.

A capacidade das microesferas de PLGA de liberar o plasmídeo encapsulado lentamente sugere sua potencialidade em sustentar a expressão da proteína por um período mais prolongado sem a necessidade de doses de reforço, em comparação com a injeção intramuscular do DNA nu. Dados de RT-PCR mostraram a expressão do RNA mensageiro para hsp65 no baço e linfonodos dos animais imunizados com uma única dose de DNA em microesferas, 15 dias após a imunização. Entretanto, não se verificou a mensagem para hsp65 nestes órgãos linfóides secundários onde ocorre a estimulação dos linfócitos em animais imunizados com três doses de DNA nu.

No que concerne à resposta imune, observou-se uma mudança significativa na qualidade dos anticorpos após imunização com microesferas contendo DNA-hsp65/DMT. Nestes animais, a resposta humoral foi caracterizada por altos níveis de IgG2a, enquanto que animais imunizados com DNA nu apresentaram um padrão misto com altos níveis de IgG1 e IgG2a. A resposta imune celular foi caracterizada pela produção de altos níveis de IFN-³. Trinta dias após o desafio, os animais imunizados com microesferas contendo DNA-hsp65 e DMT apresentavam altos níveis de IFN-³ no pulmão⁽²¹⁾. Este perfil pode ter sido favorecido pelo DMT. Ryll et al. (2001) mostraram que o DMT pode estimular uma resposta imune evidenciada pela proliferação de células NK e que ele também pode iniciar uma resposta imune precoce com liberação de IFN-³ levando à ativação de macrófagos com regulação positiva da expressão de moléculas de MHC classe II e CD1⁽²²⁾. Portanto, o DMT pode fornecer as condições ótimas para iniciar a resposta imune, o que o torna um bom componente estimulador de resposta Th1 em uma formulação candidata a vacina contra tuberculose.

Uma proteção significativa contra infecção com M. tuberculosis H37Rv foi alcançada quando camundongos foram vacinados com DNA-hsp65 nu por injeção intramuscular ou com DNA-hsp65 e DMT encapsulados em microesferas. Porém, cabe ressaltar que a formulação composta por microesferas contendo DMT e DNA-hsp65 foi capaz de estimular a resposta imune protetora após uma única administração, enquanto que a injeção intramuscular do DNA nu requer três doses para conferir a mesma proteção. Esta vacina baseada em microesferas permitiu ainda a redução da dose de plasmídeo em dez vezes quando comparada àquela com DNA nu. Estes dados demonstram que a resposta imune para um determinado antígeno, utilizando-se uma cepa particular de camundongo, é diretamente influenciada pelo método de administração do DNA. O desenvolvimento de formulações envolvendo a combinação de adjuvantes com diferentes mecanismos de ação pode representar uma alternativa para a obtenção de vacinas mais efetivas.

Explorando a estratégia prime-boost

A duração da proteção conferida por uma vacina tem sido associada com a permanência do antígeno no organismo. Desta forma, em alguns esquemas de vacinação se faz necessária a administração de doses de reforço para sustentar a imunidade estimulada pela dose inicial. Recentemente, o princípio de "dose inicial-reforço" ( prime-boost) tem sido bastante explorado dentro de um conceito de reforço heterólogo. Neste caso, o mesmo antígeno é apresentado de forma diferente para o sistema imune durante a dose inicial e a de reforço. Nesse tipo de estratégia é fundamental que a formulação utilizada na dose inicial induza a resposta com o padrão requerido para conferir proteção ao indivíduo vacinado. Já a dose de reforço tem como função apenas a expansão e manutenção da resposta inicialmente estimulada. Os protocolos mais comuns envolvem a utilização de vacinas de DNA ou sub-unidade durante a dose inicial, e carreadores vivos, tais como vírus ou bactérias recombinantes expressando o antígeno em questão, nas doses de reforço. Apesar de haver alguns resultados bem sucedidos, este tipo de protocolo traz de volta os vetores vivos, cujo uso se tentou evitar com o desenvolvimento das vacinas de DNA e sub-unidades. A estratégia de vacinação prime-boost envolve o uso de duas vacinas diferentes, cada uma codificando o mesmo antígeno, administrado em intervalos de algumas semanas. Tal estratégia tem sido capaz de aumentar a resposta imune celular em diferentes modelos animais de infecções ²³. Como dito anteriormente, a maioria dos protocolos para imunização por prime-boost em desenvolvimento inclui a indução da resposta imune com um vetor gênico, como um DNA plasmidial, utilizando vetores vivos virais ²⁴. Na prevenção da tuberculose, a estratégia prime-boost tem sido avaliada combinando-se a dose de indução da resposta imune com DNA com a manutenção da resposta imune com BCG atenuado ou proteínas recombinantes 25,26. Esses protocolos normalmente requerem mais de uma dose de DNA para a indução da resposta imune, que serão seguidas das doses de reforço.

Com o intuito de tornar vacinas gênicas produtos viáveis, o vetor gênico deve atingir as células alvo na sua forma ativa, o que significa que este tem que vencer as diferentes barreiras do organismo. O encapsulamento do plasmídeo em microesferas poliméricas biodegradáveis é uma das estratégias que têm sido propostas com sucesso para resolver esse desafio 27,28. Entretanto, utilizando-se um modelo experimental murino, observou-se que a resposta imune induzida por microesferas contendo DNA-hsp65 diminui 90 dias após a vacinação. A fim de aumentar a duração da resposta imune desencadeada pelo DNA encapsulado em microesfera, avaliou-se o efeito do reforço com proteína recombinante também encapsulada em microesferas e administrada conjuntamente com o DNA. Entretanto, numa formulação de microesferas contendo DNA e proteína, a liberação do DNA antes da liberação da proteína é fundamental para assegurar o sucesso na prevenção da tuberculose devido à sua capacidade de estimular resposta Th1, o que não se dá com as microesferas contendo hsp65 recombinante. Além disso, o co-encapsulamento do DMT como imunoestimualnte favorece o desenvolvimento do padrão Th1 de resposta, uma vez que é capaz de induzir a secreção de citocinas, como IL-12, contribuindo para criar um microambiente favorável à diferenciação de linfócitos Th1 durante a apresentação do antígeno⁽²⁰⁾.

A hsp65 recombinante foi inicialmente encapsulada em microesferas de PLGA 75:25, que sustentam sua liberação por um período de 90 dias. Esta capacidade pode ser atribuída ao maior número de monômeros de ácido lático na cadeia polimérica, o que a torna menos hidrofílica, reduzindo sua degradação hidrolítica se comparada às microesferas de PLGA 50:50 que encapsulam o DNA. A combinação de microesferas de PLGA 50:50 contendo DNA-hsp65 e DMT com microesferas de PLGA 75:25 contendo hsp65 recombinante ( prime-boost) foi capaz de induzir a produção de altos níveis de anticorpos anti-hsp65. Os níveis séricos desses anticorpos são mantidos elevados por 90 dias após a vacinação. Observou-se também alta produção de IFN-³ pelas células esplênicas dos animais vacinados durante todo o período avaliado (90 dias). Esses resultados sugerem o promissor potencial deste sistema de prime-boost baseado em vetores não vivos para aumentar a duração da resposta imune e transpor riscos relacionados à toxicidade.

Terapia gênica na tuberculose: Atividade terapêutica da vacina dna hsp65

Até recentemente, não havia perspectivas de se eliminar o bacilo da tuberculose do grande número de indivíduos infectados - um terço da população mundial. O bacilo aloja-se com maior freqüência no pulmão, por tempo indefinido, mas pode infectar outros órgãos permanecendo contido pelas células de defesa do organismo. Em decorrência da diminuição da resistência orgânica (desnutrição, subnutrição, estresse ou associação de outras doenças), o bacilo tende a se reproduzir intensamente e pode levar o indivíduo à morte, caso não seja devidamente tratado. A partir dessa fase de reprodução, considera-se instalada a doença, podendo ocorrer a contaminação de outras pessoas. A doença pode provocar graves lesões que perduram mesmo após o extermínio do bacilo, causando grande sofrimento ao paciente.

Desenha-se um quadro de aumento da letalidade da tuberculose, que precisa ser equacionado com rapidez nos próximos anos. Assim, a evolução de um modelo adequado de combate ou controle da tuberculose é uma necessidade iminente.

Os experimentos têm mostrado que a administração da vacina DNAhsp65, em animais previamente infectados com M. tuberculosis virulenta, não só previne o desenvolvimento da doença como também elimina a infecção⁽²⁹⁾. Este fato torna-se realmente relevante quando se considera que cerca de dois bilhões de pessoas já estão infectadas pelo bacilo da TB. No Brasil são cerca de 60 milhões de pessoas. Além disso, a vacina tem a propriedade de cura mesmo quando administrada em estados mais avançados da doença ou após sua disseminação por todo o organismo do animal. A infecção por M. tuberculosis faz com que o sistema imunológico dos animais passem a não responder contra o agente agressor e permite o crescimento acelerado dos bacilos e o estabelecimento da doença. Nessas condições a terapia gênica com a vacina de DNA hsp65 permitiu uma mudança radical e profunda da resposta imunológica, passando do padrão Th2 para o Th1, criando condições para o organismo combater os bacilos e curar a doença, mesmo sem a administração de quimioterápicos antimicobacterianos⁽²⁹⁾. Esta foi a primeira demonstração de que uma vacina gênica seja capaz de curar uma doença infecciosa.

Imunoterapia da tuberculose multi-droga resistente

Um dos problemas mais sérios relacionados com o controle da TB é o aparecimento de bacilos que apresentam resistência a vários medicamentos utilizados no tratamento como a isoniazida, a pirazinamida, a estreptomicina e a rifampicina, dentre outros. Já foram isolados bacilos que são resistentes não só a um desses medicamentos como também a combinações de dois, três e mesmo a todos ao mesmo tempo. Esses pacientes, portadores de bacilos denominados multidroga-resistentes, contam com poucas alternativas de tratamento e, às vezes, com nenhuma opção. Trabalhos recentes mostraram que animais infectados com bacilos resistentes a essas drogas também são curados pela administração da vacina gênica⁽²⁹⁾.

Imunoterapia da tuberculose latente

Outro problema associado ao alto índice de indivíduos infectados correlaciona-se com o alto grau de adaptação dos bacilos ao homem. A infecção normalmente se estabelece após a inalação dos bacilos e entrada dos mesmos nas células de defesa do organismo. Dentro dos macrófagos, que são células com alto potencial microbicida, os bacilos têm a habilidade de desativar seus sistemas de defesa e conseguem sobreviver e se multiplicar no seu interior. O sistema de defesa imune do homem identifica a presença dos bacilos e estabelece uma resposta contra os mesmos, caracterizada por uma reação inflamatória crônica e granulomatosa que tem a finalidade de circunscrever e delimitar a infecção. Nestas condições os bacilos podem sobreviver por anos em estado de latência ou dormência e o indivíduo infectado pode não manifestar a doença. A doença manifesta-se quando há um desequilíbrio dessa relação mútua e está freqüentemente associada com estados de supressão da resposta imunológica. Entre os casos mais comuns de imunossupressão associados com a tuberculose estão os indivíduos com a síndrome da imunodeficiência adquirida (AIDS), estressados, que utilizam fármacos imunossupressores, dependentes químicos (como os dependentes de álcool) e desnutridos, dentre outros.

O estado de latência ou dormência das micobactérias, que podem sofrer uma reativação e manifestar a doença em estados de imunossupressão, também foi analisado com o uso da terapia gênica. Foi desenvolvido um modelo experimental em camundongos que mimetiza as condições observadas no desenvolvimento da doença humana em indivíduos imunossuprimidos. Nos grupos de animais controle, que não foram vacinados (infectados, tratados com fármacos antibacterianos para estabelecer um estado de latência e tratados com corticosteróide para causar imunossupressão), observou-se reativação da infecção e estabelecimento da doença. Nos grupos experimentais que foram tratados com a vacina de DNA, não foram observados reativações e desenvolvimento da doença, principalmente quando foram administradas três doses da vacina ²⁹. A eliminação das bactérias dormentes pela vacina de DNA pode trazer benefícios significativos para o controle da TB e mesmo a sua erradicação.

A vacina gênica foi utilizada no tratamento da doença, em conceito diferente em relação às vacinas convencionais, que são utilizadas somente como prevenção à instalação da doença. Essa vacina de DNA cura a infecção, cura a doença estabelecida e impede que ocorra a reativação da doença, sem perder a sua característica profilática. Os benefícios práticos e estratégicos resultantes do desenvolvimento dessa vacina com atividade terapêutica contra a tuberculose são inúmeros. Ela é segura, eficaz, pode ser dada em uma única dose, estimula amplamente a resposta imunológica, tem efeito protetor duradouro e pode contribuir significativamente para a diminuição da incidência da doença.

redução do período de tratamento da tuberculose com o uso de drogas e vacina de DNA

Fármacos bactericidas eliminam os bacilos susceptíveis que estão se multiplicando normalmente, mas a alteração da imunidade na tuberculose clínica impede a destruição adequada dos bacilos remanescentes. Estes organismos seriam responsáveis pela reativação da doença, prolongando o período de tratamento. A associação da imunoterapia com vacina de DNA à quimioterapia convencional tem como objetivo o restabelecimento das funções do sistema imune após a remoção da maior parte dos bacilos. Os mecanismos imunes devem reconhecer e destruir os bacilos persistentes, reduzindo desta forma o período de tratamento da quimioterapia a ser administrada para prevenção de uma re-incidência. Vários protocolos e esquemas terapêuticos foram usados com quimioterápicos e imunoterápicos como o DNA-hps65, concomitantemente, na tentativa de reduzir o período de tratamento contra a tuberculose. Animais foram infectados por via intravenosa, com aerossol e por via intratraqueal com M. tuberculosis e após estabelecimento da infecção (presença de bacilos no baço, pulmão e fígado) o tratamento consistiu na associação da vacina de DNA-hsp65 com drogas como rifampicina, estreptomicina, isoniazida e pirazinamida. A vacina BCG foi usada para comparação da resposta. A avaliação foi realizada pela contagem do número de bacilos presentes nos órgãos dos animais, principalmente no pulmão, e estudo da resposta imunológica por dosagens de citocinas. Em um experimento piloto, o uso concomitante da vacina de DNA-hsp65 juntamente com a isoniazida e a pirazinamida foi eficaz e permitiu uma redução significativa do período de tratamento dos animais infectados com M. tuberculosis.

Os benefícios práticos e estratégicos resultantes do desenvolvimento de vacinas gênicas são inúmeros e absolutamente desejáveis no contexto dos problemas de saúde pública de países em desenvolvimento. O impacto sobre o controle das doenças infecciosas que podem ser prevenidas por imunização gênica será, provavelmente, uma das aquisições mais importantes advindas do domínio desta nova tecnologia. O desenvolvimento de novas vacinas que evitem, num futuro próximo, o aumento descontrolado de doenças infecciosas é de fundamental importância para a humanidade. Uma vacina de DNA contra a tuberculose contribuirá de maneira significativa para o controle desta doença.

11. Lowrie DB, Colston MJ, Tascon RE, Silva CL. DNA encoding individual mycobacterial antigens protects mice against tuberculosis. In: Brown F, Burton D

Recebido para publicação, em 29/4/04.

Aprovado, após revisão, em 27/5/04.

Apoio financeiro: Rede Brasileira de Pesquisa em TB (REDE - TB)/Processo 62.0055/01-4-PACDT - Milenio.

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É possível uma vacina gênica auxiliar no controle da tuberculose?

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Vacinas de DNA, ainda em fase de experimentação e testes clínicos, podem se tornar uma...