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Maria Luísa dos Santos Barros

Caio Henrique de Lima Bezerra

Íris Santiago Paiva

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1. Coletor das amostras: Responsável por realizar a coleta com o swab e preparar o esfregaço na lâmina: Maria Luísa dos Santos Barros/ Iris Santiago: retirada da amostras da boca

2. Realizador da coloração de Gram: Conduz todas as etapas da coloração, garantindo o tempo certo de cada reagente: Maria Luisa: Etapa do preparo da lâmina, de fixar a lâmina e o processo de coloração de Gram, Caio Henrique: Registros fotográficos, auxilio no processo coloração de Gram, Iris Santiago: Relatos das etapas

3. Microscopista: Faz a observação no microscópio e registra imagens ou anotações sobre as bactérias encontradas: Caio: observou e identificou as bactérias. Maria Luisa: registrou imagens e anotações sobre as bactérias encontradas

4. Cronometrista: Controla o tempo de cada etapa para garantir que os reagentes sejam aplicados corrtetamente: Iris Santiago

5. Relator digital: Alimenta um mural digital com fotos, descrição do processo e observações: Maria Luísa dos Santos Barros (Hipóteses, registros fotográficos, descrição do passo a passo e discussão crítica) Caio Henrique (Resultados e observações, anotações sobre a morfologia, conclusão)

6. Apresentadora: Explica os resultados e conclusões do grupo para turma ao final da atividade: Maria Luísa dos Santos Barros

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Nos reunirmos e escolhemos a parte do corpo que seria coletada as amostras. A parte do corpo escolhida foi a boca

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Hipóteses das bactérias presentes na boca 

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Hipóteses das bactérias presentes na boca 

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Bactérias Streptococcus, Estafilococos e Bacilos.

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Escolhemos a boca, pois achamos que seria um local interessante para visualizar as bactérias presentes no local

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Primeiro passo: realização da pesagem dos ingredientes (Nacl - 0,5g; Caldo de carne - 0,5g; Dextrose - 1g, água - 100ml; cetoconazol - 5mg, gelatina - 12g)

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Segundo passo: colocamos água no béquer e adicionamos a gelatina aos poucos, começamos a misturar de forma que ficasse homogênea. Após chegar no ponto homogêneo, peneiramos essa mistura.

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Terceiro passo: processo de peneiração da gelatina.

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Quarto passo: Adicionamos a mistura homogênea da água e da gelatina, o cloreto de sódio, caldo de carne e dextroze. Logo após, misturamos e peneiramos essa mistura.

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Quinto passo: Após peneirar, passamos a mistura homogênea para a placa de petri e esperamos endurecer 

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Em seguida, fomos a sala do Messias para pesarmos os materiais que seriam utilizados na balança analítica/balança de precisão. Os ingredientes são Nacl - 0,5g; Caldo de carne - 0,5g; Dextrose - 1g, água - 100ml; cetoconazol - 5mg, gelatina - 12g

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Bactérias caracterizadas por terem formato arredondado. Além disso, essas bactérias possuem coloração violeta ou azul escura quando visualizadas através do microscópio, sendo, por isso, chamadas de bactérias gram-positivas. Elas podem aparecer pelo fato de ser uma das principais bácterias presentes na região da boca.

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Sexto passo: mistura solidificando para receber o swab

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Para concluir, o nosso experimento comprovou maior aparição de bactérias Gram-positivas na microbiota bucal, como Estreptococos (Enfileirados) e Estafilococos (Aglomerado). O resultado do experimento ficaram de acordo do nossas primeiras hipóteses levantadas antes da observação no microscópio, visto que a microbiota bucal é predominantemente Gram-positiva.

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São gram-positivas, com formato arredondado e agrupadas em cachos semelhantes a cachos de uva. Podem ser encontradas na pele e na mucosa, principalmente na boca e nariz.

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O desequilíbrio dessas bactérias pode levar a problemas como mau hálito, lesões na boca, formação de placa e tártaro nos dentes, e infecções dentárias.

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Sétimo passo: Coleta de amostras do local escolhido (boca), durante um minuto

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Oitavo passo: aplicação da amostra coletada no swab na placa de petri, de modo uniforme e delicado.

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No segundo dia, deveríamos ter prestado mais atenção no preparo da lâmina, ao retirar as bactéria da placa de petri e preparar a lâmina, não fixamos as bactérias em movimentos circulares, dificultando o processo de visualização.

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Nono passo: incubamos as placas em estufa bacteriológica a 35-37°C por 48 horas.

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Décimo passo: resultado da coleta de amostras da boca, 48 horas depois.

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Décimo primeiro passo: 1º etapa do preparo da lâmina, coleta das bactérias amostras na placa de petri

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Décimo segundo passo: 2º etapa do preparo de lâmina, passando as bactérias coletadas para a lâmina.

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Décimo terceiro passo: Fixar a amostra passando a lâmina rapidamente sobre a chama do bico de Bunsen.

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Décimo quarto passo: 3º etapa: processo de coloração. Adicionar cristal violeta e aguardar 1 minuto e em seguida lavar com água destilada

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Décimo quinto passo: Aplicar lugol por 1 minuto e lavar com água destilada.

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Décimo sétimo passo: Aplicar safranina por 30 segundos e lavar.

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Décimo oitavo passo: Secamos o excesso de água da lâmina embaixo e dos lados e colocamos essa placa em cima

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Décimo nono passo: observamos no microscópio 

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Após isso, colocamos os 100ml de água no béquer e fomos adicionando gelatina a água para ser dissolvida, foi utilizada a metade da gelatina e depois peneiramos a mistura homogênea

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Logo depois, adicionamos os ingredientes em pó que foram pesados Nacl - 0,5g; Caldo de carne - 0,5g; Dextrose - 1g, cetoconazol - 5mg. Seguidamente peneiramos novamente a mistura quando ela se tornou homogênea

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Imediatamente ao peneirar, passamos a mistura do béquer para a placa de petri e esperamos endurecer. Depois fizemos a coleta das amostras da boca com ajuda de um swab de um dos alunos da turma, durante um minuto.

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Quando a mistura homogênea se solidificou na placa de petri, passamos a amostra coletada no swab em toda a placa de petri suavemente e delicadamente. A professora incubou as placas em uma temperatura de 35º à 37º graus, durante 48 horas

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48 horas depois, observamos a placa de petri com as bactérias e iniciamos o preparo da lâmina, coletando as bactérias da amostra com uma espátula e em seguida passamos a coleta para a lâmina. Depois fomos para o segundo passo, a fixação da lâmina, onde passamos a lâmina rapidamente por cima da chama do bico de Busen

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E por fim, na etapa 3 o processo de coloração de Gram. Adicionamos cristal violeta e aguardamos 1 minuto, depois lavamos com água destilada. Aplicamos lugol por 1 minuto e lavamos. Descolorimos com álcool-acetona por alguns segundos e lave imediatamente. Aplicamos safranina por 30 segundos e lavamos. Por fim, secamos e observamos ao microscópio.

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Nas duas primeiras imagens, podemos observar estruturas arredondadas e agrupadas, logo, sugerimos que podem ser estruturas de cocos, além disso, pudemos observar algumas estruturas alongadas que podem ser bacilos. Entretanto, não conseguimos identificar se essas bactérias são Gram-positivas ou Gram-negativas apenas pela observação no microscópio, pois a coloração de gram não está visível nessas imagens. Já na terceira imagem é possível observar a retenção do corante cristal violeta, características de bactérias Gram-positivas, além disso, observamos estruturas de cocos enfileirados, compatíveis com Estreptococos e agrupamentos compatíveis com Estafilococos.

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Quando fizemos o levantamento das hipóteses, esperávamos encontrar Estreptococos e Estafilococos na microbiota bucal, os o resultados obtidos confirmaram a presença de cocos Gram-positivos, possivelmente Estreptococos e Estafilococos.

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Observação no microscópio, presença do corante cristal violeta