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CROMATOGRAFIA

A cromatografia é uma técnica utilizada para a análise, identificar componentes em uma mistura comparando-os com padrões; acompanhar o curso de uma reação pelo aparecimento dos produtos e desaparecimento dos reagentes, e ainda para isolar componentes puros de uma mistura,  assim sendo definida como a separação de dois ou mais elementos distintos por distribuição entre fases, com uma fase estacionária e a outra móvel, onde fase móvel é aquela em que os componentes, quando ficam isolados, movem-se por um solvente fluido, que pode ser líquido ou gasoso e a fase estacionária é aquela em que o componente em seu processo de separação ou identificação irá ficar fixo na superfície de outro material líquido ou sólido.

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MATERIAIS:

Pimentão vermelho;

Folhas;

Béquer;

Sílica;

Proveta;

Giz;

Pilão.

REAGENTES:

Acetona;

Hexano.

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Para o início desse experimento, foi coletando cerca de 10 gramas de pimentão vermelho, amassado com o auxílio do almofariz e pistilo e foi adicionado cerca de 1 ml de acetona para que fosse possível extrair o máximo de líquido possível.

Após o líquido ser coletado foi reservado em um béquer de 50ml para que fosse possível realizar a transferência para a coluna cromatográfica com maior facilidade.

Para finalizar essa parte do experimento, o líquido extraído foi adicionado a coluna comatrográfica onde nela continha sílica-gel.

Utilizando um bastão de vidro, foi adaptado uma pequena quantidade de algodão na

parte inferior da coluna, de modo que não ficasse compactado demais para que não obstruísse a passagem do líquido extraído;

em um béquer de 25 mL, foi utilizado 2,5 g de sílica-gel e a ele foi adicionado 10 mL de hexano, foi-se agitado e transferido a uma coluna de vidro com o auxílio de um funil.

Após, abrimos a torneira e foi deixado o solvente escoar para o béquer que continha a sílica.

Esse processo foi repetido algumas vezes.

Com o auxílio de um bastão de vidro, foi adicionado 0,5 mL do extrato e deixado-o escorrer pelo bastão de vidro fazendo-o chegar a superfície da sílica;

Novamente, foi aberta a torneira da coluna para que ocorresse a absorção da amostra;

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(PROCEDIMENTO 1)

As substâncias extraídas pela solução do pimentão, como a clorofila e o carotenóide, foi possível de serem vistas devido a coloração que surgiu ao serem eluídas com facilidade pela fase móvel e são os que, durante a “corrida” cromatográfica, mais se distanciam do ponto de aplicação da amostra, assim como foi possível visualizar no experimento, onde devido isto o algodão no interior da coluna apresentou coloração “rosada” por conta do carotenóide e o topo da coluna onde estava coberto pela sílica apresentava  com certa dificuldade para ser notada uma coloração “esverdeada”, sendo esta cor a clorofila.

Dessa forma, é possível concluir que  com a maceração de tecidos vegetais com solventes orgânicos, como acetona, por exemplo, ocorre o rompimento das ligações entre moléculas e assim elas são liberadas das estruturas celulares, formando dois grupos de compostos com diferentes comportamento distintos quanto à polaridade, observou-se que os carotenóides (apolar) foram eluídos primeiro devido à sua afinidade com o hexano (apolar). Enquanto a fase estacionária que era a sílica de gel (polar), as clorofilas (polares) ficaram retidas por terem maior afinidade com esta fase.  Com tudo, pode se extrair estas substâncias por meio deste experimento devido a este comportamento que varia de acordo a afinidade de polaridades semelhante das substâncias com a fase estacionária ou móvel, sendo assim, polar tendo mais afinidade com polar e apolar tendo mais afinidade com apolar.

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A cromatografia é uma técnica simples que apresenta uma boa capacidade de resolução. Possibilitou compreender como o método pode ser usado para separar e identificar substâncias químicas, onde obtemos o conhecimento de como aqueles que interagem pouco com a fase estacionária são arrastados facilmente e aqueles com maiores interações ficam mais retidos, sendo essas interações: formação de sais, coordenação e ligação de hidrogênio.

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Nesse experimento II foi colhido cerca de 50g de folhas e em seguida foram transferidas para um gral. Para começar elas foram trituradas manualmente com ajuda de um pistilo e uma mistura de 50ml de hexano e acetona. Logo após ,esperamos alguns minutos e adicionamos a parte inferior do giz ,fazendo assim um mergulho dessa parte ,assim para completar essa parte foi colocado o hexano em um béquer até cobrir. O giz foi direcionado para ficar em pé para que encostasse ao extrato. E após foi coberto com um prato.

(Débora)

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(PROCEDIMENTO II)

RESULTADO E DISCURSSÃO

Esse procedimento tem como objetivo fazer a separação da clorofila do B-caroteno. Na parte do procedimento utilizamos as folhas ,aonde misturamos com o hexano e acetona na proporção 8:2. Na mistura da folha foi possível ver a substancia verde ,aonde separamos e o giz ficou aparentemente afundado. Logo após tiramos e colocamos o giz em um béquer para que a parte amarela que ficou por conta do B-caroteno se separasse da verde(clorofila).Isso ocorreu pelo fato do B-caroteno ser apolar ,fazendo com que misture a outras substancias ,EXEMPLO:hexano. Na cromatografia o B-caroteno se move junto com o hexano , isso se dá pelo fato da clorofila está na fase estacionária ,fazendo com que o giz ficasse imerso.