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Semisólida

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-Tripteína y Peptona: Proporcionan nutrientes para el desarrollo microbiano, como fuente de nitrógeno y carbono en menor cantidad.
*Triptófano(aminoácido) puede ser metabolizado por ciertas bacterias y formar indol  (se combina con el aldehído del reactivo de Ehrlicho de Kovac´s --> compuesto rojo.
-Sulfato de hierro y amonio: Fuente de iones Fe ³⁺ , los cuales se combinan con el ácido sulfhídrico y producen sulfuro de hierro.
-Tiosulfato de sodio: A partir de este compuesto los MO pueden generar ácido sulfhídrico que reacciona con el hierro presente formándose un compuesto de color negro.
-Agar: Agente solidificante con concentración para ser semisólido y poder detectar movilidad.

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Punción profunda utilizando asa recta.
Se inocula al centro del tubo, abarcando 2 tercios de profundidad del medio de cultivo.

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Producción de acido sulfhídrico H ₂ S

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Aerobiosis a 33-37 °C, durante 18-24 horas.
-Al término de 24 horas observar la movilidad y el color del medio de cultivo luego realizar la prueba de indol.

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Medio destinado a verificar movilidad, producción de indol y sulfuro de hidrógeno por los microorganismos. Diferencia a miembros de la familia Enterobacteriace.

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Reactivo de Kovacs o de Ehrlich
(para prueba de indol)
Al finalizar el periodo:
-Añadir 5 gotas del reactivo de Kovacs por la pared interior del tubo.
Las bacterias que poseen triptofanasa son capaces de degradar el triptófano a indol. Cuando reacciona con este indol, el reactivo Kovacs se vuelve de un color rojo cereza.

-En caso de utilizar el reactivo de Ehrlich este paso debe ser precedido por la adición de 1 mL de cloroformo.

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-Movilidad
Positivo: Turbidez
Negativo
-Sulfuro
Positivo: Negro
Negativo: Incoloro
-Indol
Positivo: Rojo
Negativo: Incoloro-Amarillento

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C: tubo control
Motilidad positiva: 1,4,5,
H ₂ S positivo (color negro): 3 y 5
Indol positivo (color rojo): 1 y 5

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- Ewing. 1986. Edwards and Ewing’s identification of Enterobacteriaceae, 4th ed. Elsevier Science Publishing Co., New York, N.Y.
- Holt, Krieg, Sneath, Staley and Williams (ed.). 1994. Bergey’s Manual of determinative bacteriology, 9th ed. Williams & Wilkins, Baltimore, Md.
- Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
- MacFaddin. 2000. Biochemical tests for identification of medical bacteria, 3rd ed. Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore, Md.

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