# data[].attributes.body
O mural esta estruturado em três partes, que serão indicados pelas seguintes cores:

1) Artigos, teses e dissertações - (LARANJA) : Optamos por inicialmnete abordar artigos em portugues para uma maior compreensão, para posteriormente abordarmos artigos em outras linguas.
2) Videos - (VERDE)
3) Blogs e sites informativos - (ROSA)
4) Figuras - (AZUL) : Detalhes sobre algumas figuras serão abordados durante a apresentação.
5) Materiais adicionados após a apresentação da semana (BRANCO).

# data[].attributes.attachment_link.title
Development and validation of a HILIC - UV method for the determination of nucleotides in fish samples

# data[].attributes.body
Compartilho um artigo bem recente (2020), no qual está bem alinhado com a apresentação  de hoje. O propósito deste trabalho foi rever as características, vantagens, aplicações e como a coluna HILIC aumenta o escopo de possíveis aplicações na cromatografia líquida.

# data[].attributes.attachment_link.title
Hydrophilic interaction liquid chromatography hilica_ powerful separation technique

# data[].attributes.body
Seminário apresentado pela Dra. Daniela Daniel, especialista em produtos HPLC/Biotech

# data[].attributes.attachment_link.title
seminario_LC_LCMS - Estratégias frente à escassez de acetonitrila

# data[].attributes.body
Este guia trata da teoria básica de HILIC e dos aspectos práticos desse modo de separação. Apresenta também ao leitor as fases estacionárias zwitteriônicas e contém uma variedade de exemplos de aplicação para diferentes tipos de compostos hidrofílicos.

# data[].attributes.body
Esta dissertação  apresenta o preparo de nova fase estacionária para separação de substâncias com caráter hidrofílico.

# data[].attributes.headline
Determination of acrylamide in gingerbread and other food samples byHILIC-MS/MS: A dilute-and-shoot method

# data[].attributes.subject
Determination of acrylamide in gingerbread and other food samples byHILIC-MS/MS: A dilute-and-shoot method

# data[].attributes.body
Um artigo bem recente (2020), que aborda a tecnica HILIC  desenvolvida para analisar  acrilamida em amostras de alimentos.

# data[].attributes.headline
HILIC combina as características dos três métodos principais em cromatografia líquida

# data[].attributes.subject
HILIC combina as características dos três métodos principais em cromatografia líquida

# data[].attributes.body
Essa página traz algumas definições sobre a técnica e o método.

# data[].attributes.attachment_link.readable_text
A Cromatografia Líquida de Interação Hidrofílica (HILIC) foi primeiramente descrita por Alpert (A. J. Alpert, J. Chromatogr., 499 (1990) 177);

É ideal para separação de espécies polares, incluindo analitos polares neutros e ionizados;

Esse tipo de separação tipicamente inclui fase estacionária polar e fase móvel contendo solvente orgânico;

Mecanicamente, HILIC é complexo e promove vários tipos de interação entre analito, fase estacionária, eluente e camada de água enriquecida na interface fase estacionária-eluente.

Quando devo considerar HILIC?

HILIC é capaz de reter e separar analitos hidrofílicos ou polares/muito polares que não são bem retidos em Cromatografia Líquida de Fase Reversa (RPLC);

Analitos hidrofílicos ou polares/muito polares têm valor de log P (medida de lipofilicidade) em torno de zero ou menor;

Geralmente, HILIC é uma boa alternativa para analitos polares que eluem antes da cafeína em RPLC.

HILIC oferece Seletividade e Retenção alternativas à RPLC

HILIC oferece Seletividade e Retenção alternativas à RPLC para analitos polares e muito polares;

A análise de uma mistura de seis analitos polares em RPLC e HILIC resulta em eluições invertidas.

Conclusão: As colunas ACE HILIC oferecem seletividade alternativa às colunas ACE RPLC com excelente retenção de analitos polares.

Colunas ACE HILIC - 3 opções

Foram desenvolvidas três fases estacionárias ACE HILIC para solucionar suas necessidades em separações HILIC:

Fase

Grupo Funcional

Endcapped

Partícula (µm)

Poro (Å)

Área superficial (m²/g)

Carga de Carbono (%)

Faixa de pH recomendada

ACE HILIC-A

Sílica

Não

1,7 / 3 / 5

100

300

-

2 - 7

ACE HILIC-B

Aminopropil

Não

1,7 / 3 / 5

100

300

4,0

2 - 7

ACE HILIC-N

Polihidroxi

Não

1,7 / 3 / 5

100

300

7,0

2 - 7

Desenvolvimento de método ACE HILIC

As colunas ACE HILIC possuem seletividades diferentes entre si;

O poder do monitoramento sistemático com fases diferentes para desenvolvimento de método HILIC pode ser visto abaixo;

Os Kits de Desenvolvimento de Método ACE HILIC são compostos por 03 colunas: 01 coluna ACE HILIC-A, 01 coluna ACE HILIC-B e 01 coluna ACE HILIC-N; todas com as mesmas dimensões e mesmo diâmetro de partícula.

Conclusão: As colunas ACE HILIC possuem seletividades diferentes entre si - ideal para desenvolvimento de método HILIC

# data[].attributes.attachment_link.description
A Cromatografia Líquida de Interação Hidrofílica (HILIC) foi primeiramente descrita por Alpert (A. J. Alpert, J. Chromatogr., 499 (1990) 177); É ideal para separação de espécies polares, incluindo analitos polares neutros e ionizados; Esse tipo de separação tipicamente inclui fase estacionária polar e fase móvel contendo solvente orgânico; Mecanicamente, HILIC é complexo e promove vários tipos de interação entre analito, fase estacionária, eluente e camada de água enriquecida na interface fase estacionária-eluente.

# data[].attributes.headline
CROMATOGRAFIA POR INTERAÇÕES HIDROFILICAS (HILIC): ESTADO DA ARTE E APLICAÇÕES

# data[].attributes.subject
CROMATOGRAFIA POR INTERAÇÕES HIDROFILICAS (HILIC): ESTADO DA ARTE E APLICAÇÕES

# data[].attributes.body
Este artigo trata de uma revisão sobre o assunto da semana, o mesmo foi elaborado por pesquisadores do Instituto de Quimica da Universidade de Campinas e esta em Portugues.
Este artigo aborda topicos sobre historico do HILIC, mecanismos de separação, fases estacionárias, entre outros topicos importantes para a compreensão do método.

# data[].attributes.headline
Como economizar (ou eliminar o uso de) acetonitrila em tempos de "crise"?

# data[].attributes.subject
Como economizar (ou eliminar o uso de) acetonitrila em tempos de "crise"?

# data[].attributes.body
A partir dos comentários muito pertinentes a respeito do elevado volume de acetonitrila utilizado em HILIC, principalmente pela toxicidade, trago um artigo que trata sobre as questões relacionadas à escassez deste solvente no mercado, talvez alguns de vocês desconheçam este fato também.

# data[].attributes.attachment_link.title
Como economizar (ou eliminar o uso de) acetonitrila em tempos de crise

# data[].attributes.headline
Cromatografia de interação hidrofílica na análise de matrizes de alimentos: uma revisão atualizada

# data[].attributes.subject
Cromatografia de interação hidrofílica na análise de matrizes de alimentos: uma revisão atualizada

# data[].attributes.body
Esta revisão enfoca os artigos mais recentes que tratam da análise de diferentes componentes orgânicos em alimentos, usando cromatografia líquida de interação hidrofílica (HILIC) combinada com diferentes técnicas de detecção.

# data[].attributes.attachment_link.title
Hydrophilic interaction chromatography in food matrices analysis - An updated review

# data[].attributes.headline
Interação Hidrofílica de Cromatografia Líquida

# data[].attributes.subject
Interação Hidrofílica de Cromatografia Líquida

# data[].attributes.body
Essa página aborda algumas diretrizes de desenvolvimento de métodos HILIC .

# data[].attributes.attachment_link.readable_text
O que é HILIC?

Interação Hidrofílica de Cromatografia Líquida, ou HILIC, é a cromatografia de fase normal de compostos polares iônicos sob condições de fase reversa.

O mecanismo principal de separação é constituído por uma camada aquosa construída na fase estacionária e pela partição dos analitos entre a fase estacionária muito polar e a fase móvel menos polar. Isto leva ao retardo de compostos polares e hidrofílicos, como por exemplo, o Uracilo, que é utilizado como um marcador de tempo morto não retardado em HPLC de fase reversa. Compostos polares como Tolueno, por exemplo, não são retardados e podem ser usados como um marcador de tempo morto em HILIC.

Isto resulta no método HILIC mostrar uma ordem de eluição que é muitas vezes inversa comparada com separações de fase reversa.

Força relativa do solvente no modo HILIC: Acetona < Acetonitrila < Isopropanol < Etanol < Metanol < Água

O mecanismo de retenção HILIC

Os mecanismos de retenção em HILIC são complexos e levam a diferentes padrões de retenção em diferentes fases estacionárias HILIC. Os principais mecanismos são a partição entre uma camada rica de água sobre a superfície da fase estacionária e a fase móvel orgânica enriquecida, adsorção específica de grupos funcionais polares na fase estacionária, a retenção iônica em grupos ionizados ou em grupos silanol ionizados na base sílica e retenção de fase reversa nas porções hidrofóbicas dos grupos ligantes.

Uma diferença significativa entre as colunas HILIC é se elas dependem principalmente da adsorção e da ligação de hidrogênios, ou da partição hidrofílica e de interações em diversos pontos. Todas as colunas de sílica simples apresentam seletividade de adsorção, enquanto colunas zwiteriônicas geralmente exibem o padrão de seletividade que pode ser atribuído à partição. Com as fases das colunas Eurospher II HILIC e Bluespher HILIC, a Knauer oferece uma fase HILIC modificada de ácido amônio-sulfônico. Esta é uma modificação especial zwiteriônica com superfície altamente polar mas com carga neutra. Fases de sílica, amino, diol e ciano também são muito utilizadas para separação HILIC.

O desenvolvimento do método - Informações para começar

Como no desenvolvimento de métodos de fase reversa, as primeiras informações sobre os analitos devem ser coletadas para estimar o potencial para o método HILIC e para encontrar os parâmetros iniciais corretos para o desenvolvimento do método. Quando o Coeficiente de Partição LogP está disponível para o analito, ele dá uma boa idéia da aplicabilidade do HILIC para esse caso. Se o LogP está perto ou abaixo de zero, o método HILIC vai funcionar muito bem. A Constante de Dissociação de Ácido pKa é também um fator importante. O pKa nos dá a informação sobre a habilidade da molécula em aceitar ou doar prótons quando sujeitos ao pH da fase móvel. É um fator importante escolher a fase estacionária certa.

Eluentes típicos são compostos de 40- 98% de acetonitrila em água ou um tampão volátil. É recomendável o uso de eluição isocrática com a metodologia, mas algumas vezes pode-se usar gradiente. Aqui também o gradiente vai se apresentar na direção oposta do modo de fase reversa. A polaridade da fase móvel vai ser aumentada através do decréscimo do solvente orgânico.

É importante notar que as fases HILIC são em geral menos toleráveis a gradientes rápidos e precisam de tempos de equilíbrio mais longos do que as fases de fases reversas. Este fenômeno se deve à camada aquosa na fase estacionária, que é dependente da composição da fase móvel. Por esta razão, os gradientes HILIC também não devem ser trabalhados de 0% a 100% de fase aquosa. Nunca utilize menos de 2% de fase aquosa para garantir a hidratação suficiente da fase estacionária. Se for necessário separar solutos com ampla diferença de fatores de retenção durante a mesma corrida, usar um gradiente linear de 90% a 40% de acetonitrila como um ponto de partida.

Fluxo para o desenvolvimento de uma metodologia HILIC.

Siga este guia e você terá um bom começo para a sua separação HILIC:

# data[].attributes.attachment_link.title
DCtech - Diretrizes de desenvolvimento de métodos HILIC - Interação Hidrofílica de Cromatografia Líquida -

# data[].attributes.attachment_link.description
Interação Hidrofílica de Cromatografia Líquida, ou HILIC, é a cromatografia de fase normal de compostos polares iônicos sob condições de fase reversa. O mecanismo principal de separação é constituído por uma camada aquosa construída na fase estacionária e pela partição dos analitos entre a fase estacionária muito polar e a fase móvel menos polar.

# data[].attributes.headline
Retenção e Separação de Compostos Polares Utilizando Cromatografia de Interação Hidrofílica (HILIC)

# data[].attributes.subject
Retenção e Separação de Compostos Polares Utilizando Cromatografia de Interação Hidrofílica (HILIC)

# data[].attributes.body
Este vídeo tem como objetivo abordar sobre o funcionamento da Técnica HILIC com dicas e conceitos para facilitar o desenvolvimento de método.

# data[].attributes.body
Essa página apresenta os princípios básicos bem como a diferença entre os métodos.

# data[].attributes.attachment_link.readable_text
HIC OU HILIC?

Em dúvida sobre qual a melhor coluna cromatográfica para sua necessidade de análise? Vamos tratar nesse post sobre as diferenças, vantagens e desvantagens entre as colunas HIC e HILIC. Acompanhe:

Princípios básicos:

Primeiramente, vamos relembrar os princípios básicos de cada método:

HILIC - Cromatografia de Interação Hidrofílica

"HILIC Proporciona retenção dos analitos hidrofílicos altamente polares que são difíceis de reter em métodos RP utilizando combinações simples de fase celular e fase estacionária."

"Uma fase estacionária altamente polar, muitas vezes sílica nua, é usada em grande parte com um sistema de fase móvel não polar (a água atua como um solvente muito forte em HILIC)"

É um método muito poderoso para LC-MS.

HILIC é uma tecnologia de separação importante, quando outras técnicas chegam ao limite.

HIC - Cromatografia de interação hidrofóbica

A separação de substâncias é baseada na sua força variável de interação com grupos hidrofóbicos ligados a uma matriz de gel não carregada.

Grupos hidrofóbicos em proteínas estão suficientemente expostos para se ligar aos grupos hidrofóbicos na matriz.

Vantagens HIC:

Grande volume de amostra

Amostras com fortes forças iónicas

Bom antes da filtração por gel (SEC), troca de ions

(IEX) ou cromatografia de afinidade

Amostra eluída com baixo teor de sal

HIC - parâmetros de influência

O tipo de ligando hidrofóbico afeta a absorção de proteína - a interação pode não ser estritamente hidrofóbica

A escolha do ligando é bastante empírica

A capacidade de ligação da proteína à superfície HIC aumenta com o comprimento da cadeia de alkyl (A) e o aumento do grau de substituição do ligando imobilizado (B)

Proteína pode ligar multiponto e, então, é difícil de eluir!

O tipo de matriz base também é importante - amplamente utilizados são: agarose reticulada (como BioFox) e materiais de copolímero sintético

Pode ser necessário modificar as condições de adsorção e eluição - tome conhecimento dos protocolos

A ligação de proteínas pode ser vista como "salgar". Mais sal = mais ligado a proteínas

As proteínas ligadas são separadas lavando a coluna HIC com tampão neutro, diluído ou mesmo com água

Diminuição do pH aumenta a ligação

HIC usa seções hidrofóbicas de proteínas; HILIC não é adequado para proteínas completas, mas para péptidos

Protocolos HIC e HILIC

Para compostos altamente carregados, é necessária pelo menos uma baixa concentração de sal (10mM) para compensar (supressão de íons)

Os protocolos HIC começam com concentrações de sal ainda maiores e usam um gradiente de sal decrescente para separação!

HIC - Onde ele se encaixa?

AC - SEC

AC - IEC - SEC

IEC - HIC - SEC

HIC - IEC - SEC

Agora você já sabe onde essas técnicas se complementam e não precisa ter dúvidas na hora de escolher entre elas!

Veja alguns exemplos de análises com as duas técnicas nessa apresentação.

Fonte: Mark Woodruff em LC GC a coluna. Os Ins e Outs of HILIC Chromatography 24 de janeiro de 2011, Vol.7, questão 1 | Fonte: Mark Woodruff em LC GC, a coluna. Os Encomendados da Cromatografia HILIC - 24 de janeiro de 2011, Vol.7, edição 1

# data[].attributes.attachment_link.title
DCtech - HIC ou HILIC? Ajudamos vc a escolher a coluna cromatográfica certa para análise de proteínas. -

# data[].attributes.attachment_link.description
HIC OU HILIC? Em dúvida sobre qual a melhor coluna cromatográfica para sua necessidade de análise? Vamos tratar nesse post sobre as diferenças, vantagens e desvantagens entre as colunas HIC e HILIC.

# data[].attributes.body
Este artigo foi  indicado pela professora e iremos usar como ajuda para desenvolver a nossa apresentação. O mesmo aborda termos e definições sobre o assunto e esta em português.

# data[].attributes.attachment_link.title
Cromatografia líquida com interação hidrofílica

# data[].attributes.headline
Resultados de pesquisa do SciFinder Scholar documentando a área de pesquisa em crescimento contínuo do HILIC, com base no número de publicações por ano

# data[].attributes.subject
Resultados de pesquisa do SciFinder Scholar documentando a área de pesquisa em crescimento contínuo do HILIC, com base no número de publicações por ano