# data[].attributes.headline
Mieloma Múltiple (MM): Genética y Progresión

# data[].attributes.subject
Mieloma Múltiple (MM): Genética y Progresión

# data[].attributes.body
El mieloma múltiple es una neoplasia de células plasmáticas. Se origina a partir de estados premalignos como la gammapatía monoclonal de significado incierto (GMSI) y progresa mediante la acumulación de alteraciones genéticas.

Principales Alteraciones Genéticas:

Variaciones estructurales (SVs): translocaciones, inserciones, inversiones.

Variaciones en el número de copias: deleciones, duplicaciones.

Aneuploidías: trisomías, monosomías.

Mutaciones en genes clave: como KRAS, NRAS, FAM46C, DIS3 y TP53.

Subtipos Citogenéticos:

Mieloma hiperdiploide (HDM): ganancia de cromosomas impares (3, 5, 7, 9, 11, 15, 19).

Mieloma no hiperdiploide: presenta translocaciones del gen IGH, que activan oncogenes como NSD2, MAF, CCND1 y CCND3.

# data[].attributes.headline
Avances y desafíos en la caracterización genómica

# data[].attributes.subject
Avances y desafíos en la caracterización genómica

# data[].attributes.body
Avances con secuenciación de nueva generación (NGS):
NGS ha permitido descubrir mutaciones en genes como KRAS, NRAS, FAM46C, DIS3 y TP53, revelando la complejidad estructural del genoma del MM, desde alteraciones simples hasta variantes estructurales muy complejas, asociadas a mecanismos oncogénicos diversos.

Limitaciones actuales:
Muchas anomalías genéticas no se han integrado aún en la práctica clínica debido a:

La falta de métodos sistemáticos para su detección.

Dificultades para evaluar su impacto pronóstico y terapéutico.

Se requiere el desarrollo de técnicas más rápidas, sensibles y con enfoque pangenómico.

Pronóstico clínico actual:
Se utilizan los sistemas R-ISS y R2-ISS para estratificar el riesgo del paciente:

R-ISS: incluye translocaciones t(4;14), t(14;16) y deleción de TP53.

R2-ISS: añade la ganancia de 1q21.

Ambos combinan alteraciones citogenéticas de alto riesgo con biomarcadores séricos.

# data[].attributes.headline
Limitaciones actuales y nuevas soluciones

# data[].attributes.subject
Limitaciones actuales y nuevas soluciones

# data[].attributes.body
Uso de FISH en la clínica:
FISH en células CD138⁺ detecta translocaciones IGH (t(4;14), t(11;14), t(14;16)), deleción 17p y alteraciones en el cromosoma 1, pero no siempre identifica otras como t(14;20) o MYC.

Limitaciones de FISH:

No es pangenómica.

Está restringida a pocas sondas por costo y logística.

Su interpretación puede ser compleja.

Riesgo de falsos negativos por pérdida de secuencias cercanas al punto de ruptura en IGH (>15 % de casos).

Mapeo Óptico del Genoma (OGM):
OGM es una técnica genómica de alta resolución y cobertura total que:

Detecta SVs, CNVs y aneuploidías con precisión.

Usa ADN de ultra alto peso molecular etiquetado con fluorescencia (fragmentos de 250 kb a 1 Mb).

Genera mapas genómicos detallados y comparables en costo al FISH limitado.

Aplicación y validación de OGM:

OGM ha mostrado eficacia en neoplasias hematológicas y, en este estudio, detectó alteraciones clave del MM y reveló nuevas con valor clínico.

# data[].attributes.body
Selección de Muestras:
Se seleccionaron 20 pacientes con MM (nuevo, recaída, indolente o leucemia de células plasmáticas) que cumplieron criterios de inclusión (≥10 % células CD138⁺ en médula ósea).

Procesamiento y Conservación:
Células CD138⁺ purificadas por inmunomagnetismo y conservadas a −80 °C. Se evaluó viabilidad tras descongelación para extraer ADN.

Análisis por FISH:
Se usaron 5 sondas dirigidas (TP53, IGH/FGFR3, IGH/MAF, etc.). Se analizaron 200 núcleos por sonda. FISH sirvió como referencia para comparar con OGM.

Mapeo Óptico del Genoma (OGM):
Se extrajo ADN de ultra alto peso molecular y se analizó con el sistema Saphyr®. Se obtuvieron ~1500 Gbp por muestra.

Análisis OGM:
Se utilizó el software Bionano Access (RVA). Se validaron translocaciones IGH si coincidían con FISH y el punto de ruptura estaba cerca del oncogén. También se identificaron CNVs, aneuploidías y nuevas variantes estructurales relevantes.

# data[].attributes.headline
Selección de pacientes y calidad de muestras

# data[].attributes.subject
Selección de pacientes y calidad de muestras

# data[].attributes.body
Total de pacientes:
45 pacientes en el estudio.

Muestras incluidas:
Solo 20 pacientes tuvieron muestras válidas (ricas en células CD138+). Diagnósticos de los incluidos:

12 con mieloma múltiple de novo

6 en recaída o refractarios

1 mieloma latente

1 leucemia de células plasmáticas

Muestras excluidas (25):

19 por no cumplir criterios de inclusión o problemas en el muestreo

5 por baja recuperación de CD138+

1 por fallas con las perlas magnéticas

Problema común:
La baja cantidad de células CD138+ es una limitación frecuente en laboratorios clínicos.

Relevancia:
Aunque no aptas para FISH, muchas de estas muestras podrían aprovecharse con la técnica OGM.

# data[].attributes.body
Protocolos usados:

1. Kit de 1ra gen. sin extracción de perlas

2. Kit de 1ra gen. con extracción de perlas

3. Kit de 2da generación

Mejores resultados (2da gen):

N50 ≥ 290 kbp

Cobertura efectiva: 439x

Tasa de mapeo: 92%

Mejor calidad y reducción del tiempo de escaneo

Caso especial (muestra 45):
Excluida del cálculo por baja lectura total, pero se mantuvo por detectar translocación t(4;14) confirmada con FISH.

Conclusión:
La evolución del protocolo mejoró notablemente la calidad del análisis OGM.

# data[].attributes.headline
Capacidad diagnóstica del OGM y comparación con FISH

# data[].attributes.subject
Capacidad diagnóstica del OGM y comparación con FISH

# data[].attributes.body
Detección por OGM:

Translocaciones IGH

Deleciones 17p/TP53, 1p32/CDKN2C

Ganancias 1q21/CKS1B

Aneuploidías

Precisión comparada con FISH:

Translocaciones: 100%

Deleciones: 92.5%

Ganancias: 95%

Aporte adicional de OGM:

Identificó biomarcadores pronósticos adicionales en 6 casos

30% de aumento en capacidad pronóstica

Reveló alta complejidad en casos hiperdiploides

Casos de novo vs. recaída:

Mieloma de novo: promedio 60 SVs y 59 CNVs

Recaída: promedio 70 SVs y 68 CNVs

Conclusión:
OGM supera a FISH en precisión y detalle genómico, con un enfoque más integral.

# data[].attributes.headline
Detección de anomalías primarias y estructura genómica

# data[].attributes.subject
Detección de anomalías primarias y estructura genómica

# data[].attributes.body
Translocaciones IGH detectadas:

t(11;14): muestras 3, 24, 25, 37, 41

t(4;14): muestras 7 y 45

t(6;14): muestra 12

t(14;16): muestra 2

t(14;20): muestra 44

Variantes complejas nuevas:

t(14;16;8;8)

t(11;16;19)
Aún sin caracterizar clínicamente.

Pérdida del cromosoma 13:
14/20 casos con esta anomalía
Genes eliminados: DLEU1, DLEU2, RB1

Casos hiperdiploides (10):

Ganancias frecuentes en cromosomas 5, 9, 15

Copias adicionales: trisomías, tetrasomías, pentasomías

Variabilidad en SVs y CNVs (0 a 21 translocaciones)

Ejemplos notables:

Muestra 5: patrón clásico y moderado

Muestra 18: genoma complejo con 31 translocaciones

Conclusión:
OGM permite caracterizar tanto anomalías conocidas como nuevas y evaluar la complejidad del genoma con precisión.

# data[].attributes.headline
Limitaciones del OGM en casos no diploides

# data[].attributes.subject
Limitaciones del OGM en casos no diploides

# data[].attributes.body
Problema técnico:
El análisis RVA de OGM asume diploidía (2n) en todos los cromosomas.

Consecuencia:
En casos triploides o tetraploides, pueden interpretarse erróneamente pérdidas (monosomías falsas).

Casos no diploides detectados:
Muestras 1, 12, 33 y 44

Solución parcial:
Uso del análisis de novo para estimar niveles de ploidía impar mediante ratios alélicos.

Limitaciones del de novo:

No aplicable en ploidías pares

Requiere mayor cobertura (≥ 250x)

Afectado por subclones, mosaicismo y SVs múltiples

Conclusión:
Aunque tiene limitaciones en la estimación de ploidía, OGM ofrece ventajas significativas en precisión estructural frente a FISH.

# data[].attributes.body
Son aquellas que aparecen posteriormente durante el progreso del mieloma y suelen estar asociados a un estadio grave de la enfermedad o a resistencia a la quimioterapia.

Deleción 17p/TP53:
Marcador pronóstico clave. OGM detectó todas las deleciones vistas por FISH, aunque falló automáticamente en 2 casos (una por baja frecuencia, otra por error del software). Las deleciones fueron grandes (7–22 Mbp) y asociadas a translocaciones y a deleciones en 8p.

Deleción 1p/CDKN2C:
Detectada en muestras diploides y no diploides. Algunas abarcaron casi todo el brazo 1p. También se encontraron deleciones recurrentes en 1p12, posiblemente asociadas al gen NRAS y resistencia a fármacos.

Ganancias y amplificaciones 1q/CKS1B:
OGM identificó correctamente las ganancias. En amplificaciones, subestimó en algunos casos por ploidía o mosaicismo. Se recomienda ajustar los valores de frecuencia de copias.

Alteraciones 8q24/MYC:
OGM detectó translocaciones y deleciones en el 55% de las muestras. Algunas no fueron confirmadas por FISH por su naturaleza compleja. Estas alteraciones están ligadas a mal pronóstico.

# data[].attributes.headline
Alta variabilidad en puntos de ruptura de translocaciones en mieloma múltiple

# data[].attributes.subject
Alta variabilidad en puntos de ruptura de translocaciones en mieloma múltiple

# data[].attributes.body
El OGM permitió identificar todas las reordenaciones recurrentes y reveló una alta variabilidad en los puntos de ruptura, especialmente en las regiones IGH (14q32.33) y 8q24.21/MYC.

En IGH, los puntos de ruptura abarcaron un rango de 1.28 Mb, afectando distintas zonas (VDJ, constantes, PACS2).

En t(11;14), solo un caso tuvo ruptura directa en CCND1; los demás fueron cercanos.

En 8q24.21, los puntos se localizaron principalmente en PVT1 y CCDC26, no en MYC.

También se encontraron rupturas que afectan directamente oncogenes como CCND1, CCND3, WWOX y NSD2, lo que podría tener implicancias pronósticas.

Aunque OGM tiene una precisión de ~3 kbp, ofrece mejor resolución que FISH. Se sugiere complementar con WGS para caracterización detallada.

# data[].attributes.headline
Conclusiones sobre OGM en mieloma múltiple

# data[].attributes.subject
Conclusiones sobre OGM en mieloma múltiple

# data[].attributes.body
OGM es eficiente y accesible:

Proceso rápido (5–7 días) desde la extracción hasta el análisis.

Visión genómica integral:

Permite caracterizar mejor alteraciones conocidas (TP53, 1q), identificar puntos de ruptura y nuevas anomalías relevantes.

Mejora el valor pronóstico:

Aportó información adicional en el 30 % de las muestras, superando a métodos convencionales.

Limitaciones en regiones sensibles a la ploidía:

Las detecciones en 17p y 1q pueden verse afectadas en genomas no diploides. Se recomienda complementar con FISH.

Aplicación clínica respaldada:

OGM es útil para una caracterización genética más precisa, lo que puede personalizar el manejo del paciente.

Necesidad de actualizar las guías clínicas:

Dada la heterogeneidad del mieloma, se requiere adoptar enfoques más integrales y tecnologías genómicas avanzadas en la práctica diagnóstica.