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PCR PF (Reacción en cadena de la polimerasa, punto final) 

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PCR PF (Reacción en cadena de la polimerasa, punto final) 

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Practica #3
Adriana Barahona
Fabricio García
Lidia Chinchilla

Sección: 1700 Sa

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La especificidad es la capacidad que tiene la PCR estándar para identificar microorganismos con alta certeza, pues los cebadores bien diseñados se unirán únicamente a la secuencia de DNA buscada.

Sensibilidad y especificidad de la qPCR (quantitative PCR)
se basa en la PCR estándar, utiliza sondas fluorescentes para detectar y cuantificar la presencia de una secuencia específica de las macromoléculas (DNA y RNA) de la muestra. Es muy sensible y específica, consiguiendo amplificar fragmentos de DNA desde 60 pb (par de bases), por lo que permite el diagnóstico de patógenos orales y patologías genéticas.
La sensibilidad de la qPCR (93-100%) permite identificar desde un número reducido de células de un agente
patógeno.

https://www.pubtexto.com/pdf/?static-magnetic-fields-promote-the-differentiation-of-mc3t3e1-cells-via-the-transforming-growth-factorb-pathwa. (2021). JOURNAL OF ORAL AND DENTAL HEALTH RESEARCH, 3(3), 1–6. https://doi.org/10.36266/jodhr/135

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Puntas, placa de PCR, microtubos y juego de micropipetas

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La PCR se utiliza en muchas áreas de la biología y la medicina, por ejemplo detectar la expresión proteica de antígeno específico prostático en células (detección de micrometástasis o células tumorales circulantes), como la investigación en biología molecular, el diagnóstico médico (la detección del material genético de un patógeno determinado, ya sea de origen bacteriano, fúngico o viral, permite entregar un diagnóstico certero sin necesidad de tener que cultivar primero dicho patógeno) e incluso algunas ramas de la ecología. También para reconocer el ADN que coincide con el de la persona presente en una escena del crimen.

Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) (artículo). (2016). Khan Academy. https://es.khanacademy.org/science/ap-biology/gene-expression-and-regulation/biotechnology/a/polymerase-chain-reaction-pcr
[Virus]. (2019, 20 marzo). National Human Genome Research Institute. https://www.genome.gov/genetics-glossary/Polymerase-Chain-Reaction

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Abreviatura de reacción en cadena de la polimerasa o (Polymerase Chain Reaction) es una herramienta simple que puede usarse para enfocarse en un segmento de ADN y copiarlo miles de millones de veces.
Fue inventado a comienzos de los años ’80 por el bioquímico norteamericano Kary Mullis.
El concepto base que subyace a esta técnica es la utilización de la enzima denominada ADN polimerasa y que duplica el material genético en las células de todos los organismos cuando éstas se dividen

PCR. (2018). Learn Genetics. Recuperado 23 de febrero de 2022, de https://learn.genetics.utah.edu/content/labs/pcr/

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Se refiere a la obtención de un solo producto amplificado. Viene determinada por los oligos y la especificidad con la que se unen al ADN molde. De esta forma, si los oligos tienen más de un sitio al que se pueden unir aparecerá más de un producto amplificado.

La especificidad de la PCR PF, es menor a la de la PCR RT.

Langa, L. S., Sallent, L. V., & Díez, S. R. (2021). 167-173 10.1016/j.Fmc.2021.01.005 Langa Laura Soldevila LS programa de Salud internacional (PROSICS) metropolitana Norte, servicio de enfermedades infecciosas, hospital Universitari Germans Trias i Pujol. Sallent lluís Valerio LV programa de Salud internacional (PROSICS) metropolitana Norte, servicio de atención primaria, Badalona, Barcelona, España. Díez sílvia Roure SR programa de Salud internacional (PROSICS) metropolitana Norte, servicio de enfermedades infecciosas, hospital Universitari Germans Trias i Pujol. Spa journal article interpretación de las pruebas diagnósticas de la COVID-19. 2021 03 23. FMC - Formación Médica Continuada en Atención Primaria, 28(3), 167–173. https://doi.org/10.1016/j.fmc.2021.01.005

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La eficiencia de esta PCR, rondaría en 83%-86%

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Diz Mellado, O. M., & NPunto. (2020). TÉCNICAS DE BIOLOGÍA MOLECULAR EN EL DIAGNÓSTICO DE ENFERMEDADES INFECCIOSAS. TÉCNICAS DE BIOLOGÍA MOLECULAR EN EL DIAGNÓSTICO DE ENFERMEDADES INFECCIOSAS, 100(100), 1–100. https://www.npunto.es/revista/30/tecnicas-de-biologia-molecular-en-el-diagnostico-de-enfermedades-infecciosas

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La fidelidad de la PCR se encuentra directamente influenciada por los diversos componentes que integran la técnica:
1. Mezcla de reacción
2. Régimen de ciclaje
3. ADN polimerasa

Esta PCR posee alta fidelidad.

Bolivar, A. M., Rojas, A., & Garcia-Lugo, P. (2014). PCR y PCR-Múltiple: parámetros críticos y protocolo de estandarización. http://file:///C:/Users/USUARIO/Downloads/Dialnet-PCRYPCRMultiple-4796903.pdf