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Para el estudio colaborativo, cada uno de los 10 laboratorios recibió un conjunto de 18 muestras de leche cruda (9 pares de duplicados ciegos) en el que cada par representa leche de una granja. De los diez laboratorios, uno de ellos realizó dos series de análisis, uno con equipo tradicional y otro con equipo de digestor de bloques.

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Optimizar el método macro-kjeldahl para leche para equipos de digestión tradicional y en bloque, determinar el rendimiento del método (Sr y SR), y comparar el rendimiento del sistema digestor de bloque/ destilador de vapor con sistema tradicional Kjeldahl

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El método Kjeldahl es utilizado para la determinación del contenido de nitrógeno en muestras orgánicas e inorgánicas

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Tres estapas

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Práctica #6: Kjeldahl/ Cálculos y montaje del equipo de Kjeldahl.

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Estudio prelimitar ( se llevo acabo mediante 5 fases)

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Estudio prelimitar ( se llevo acabo mediante 5 fases)

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A 8 laboratorios fueron eviados 6 soluciones (3 de sulfato de amonio y 3 de glicina para determinar el porcentaje de nitrogeno
Primera fase: Involucró una evaluación de equipos y métodos que diferente personal de laboratorio utilizaron para la determinación de proteína.
4 laboratorios: catalizador de cobre
3 laboratorios: catalizador de mercurio
1 laboratorio: selenio
Metodos utilizados:
6 laboratorios: sistema macro kjedahl
2 laboratorios: sistema micro- kjedahl

CONCLUSIÓN:
Se indicó que el metodo micro-Kjeldahl no funciono tan bien como el método macro-Kjeldah. La desviacion estandar de la diferencia entre duplicados para el porcetaje de recuperación de nitrogeno, para el metodo micro fue aproximadamente 5 veces mayor que la de los sistemas macro.
No hubo diferencia en la utilización de catalizadores.

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*Determinar si hubo una diferencia en la prueba de resultados con catalizadores de mercurio o cobre.
*Las condiciones de digestion ( proporción de sulfato de potasio y acido sulfurico) constantes
CONCLUSIÓN:
Se determino que se podrian obtener recuperaciones de nitrogeno equivalente con catalizadores de cobre y mercurio
Con la optimizacion de digestion  en lugar de simplemente sustituir un catalizador por otro, se podria obtener resultados comparables con catalizadores de Hg y Cu.

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La tercera fase del trabajo preliminar optimizó los parámetros de digestión/destilación para cada tipo de equipo con
catalizador de cobre y estableció un bien documentado, claramente con su método definido para el análisis de la leche.
* La optimización del procedimiento de digestión implicó variar
la cantidad de catalizador (0 a 0,84 g CuS04-5H20) y la
relación sulfato de potasio/ácido sulfúrico (0,3 a 0,7).
CONCLUSIÓN:
La tercera fase del trabajo preliminar encontró que 0,05 g
el sulfato de cobre pentahidratado fue suficiente para producir
buenos resultados de las pruebas. La proporción óptima de sulfato de potasio al ácido sulfúrico fue determinado para estar entre 0,56 y 0,67.
Un tiempo de digestión de 1 a 2 h

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Consistió en una evaluación del óxido de titanio más sulfato de cobre , como catalizador alternativo al sulfato de cobre
CONCLUSIÓN:
La cuarta fase del trabajo preliminar encontró que  el óxido de titanio no mejoró los resultados de las pruebas ni disminuyó sustancialmente el tiempo de digestión.

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Fue una colaboración de
estudio utilizando soluciones de recuperación (sulfato de amonio y glicina) con el procedimiento optimizado de Kjeldahl para
leche. Se utilizó catalizador de cobre.
CONCLUSIÓN:
indicó que las recuperaciones de nitrógeno en todos los laboratorios eran aceptables.
se sugirió que se eliminara el peróxido de hidrógeno de
la digestión

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(a) Ácido sulfúrico
(b) Solución de catalizador de cobre.
(c) K₂SO4
(d) Solución de hidróxido de sodio
(e) Chips de ebullición
(f) Rojo de metilo/solución indicadora verde
(g) Solución de ácido bórico
(h) Solución patrón de ácido clorhídrico
(i) Sulfato de amonio.
(j) Triptófano o clorhidrato de lisina (k) Sacarosa.

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Representación de los porcentajes de proteína determinados 

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Representación de los porcentajes de proteína determinados 

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Establecimiento de parámetros AOAC en los porcentajes de proteína

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Establecimiento de parámetros AOAC en los porcentajes de proteína

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Análisis estadístico por separación de equipos 

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Análisis estadístico por separación de equipos 

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Representación de los porcentajes de proteína determinados 

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Representación de los porcentajes de proteína determinados 

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Establecimiento de parámetros AOAC en los porcentajes de proteína

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Establecimiento de parámetros AOAC en los porcentajes de proteína

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Análisis estadístico por separación de equipos

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Análisis estadístico por separación de equipos

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Verificación de la Recuperación de Nitrógeno

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Verificación de la Recuperación de Nitrógeno

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(a) Pérdida de nitrógeno.
(b) Eficacia de la digestión

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Nitrógeno, % = [1.4007 x (Vs - Vb) x N)]/W

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Valores de repetibilidad y reproducibilidad

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Valores de repetibilidad y reproducibilidad

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r = 0.038 y R = 0.049.

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Método de destilación por Digestor de bloques

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Método de destilación por Digestor de bloques

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Aparato utilizado para digerir los más diversos tipos de muestras, como plantas, alimentos, bebidas, hules, entre otros; para posterior análisis de nitrógeno/proteína.

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(a) Bloque de digestión.
(b) Tubos de bloque de digestión.
(c) Tubos de digestión de 250 ml
(d) Matraz de titulación de destilación.
(e) Buret de titulación.

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Valores de repetibilidad y reproducibilidad

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Valores de repetibilidad y reproducibilidad

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r = 0.038 y R = 0.049.

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Barbano, D. M., Clark, J. L., Dunham, C. E., & Flemin, R. J. (1990). Kjeldahl method for determination of total nitrogen content of milk: collaborative study. Journal of the Association of Official Analytical Chemists, 73(6), 849-859.

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Barbano, D. M., Clark, J. L., Dunham, C. E., & Flemin, R. J. (1990). Kjeldahl method for determination of total nitrogen content of milk: collaborative study. Journal of the Association of Official Analytical Chemists, 73(6), 849-859.