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Hans Christian Gram responsável pelo desenvolvimento do método de coloração de Gram, nasceu em 13 de setembro de 1853 na Cidade de Copenhague, Dinamarca.

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O corante púrpura e o iodo se combinam no citoplasma de
cada bactéria, corando-a de violeta escuro ou púrpura. As bactérias que retêm essa cor após a tentativa de descolori-las com álcool são classificadas como gram-positivas; as bactérias que perdem a cor violeta escuro ou púrpura após a descoloração são classificadas
como gram-negativas. Como as bactérias gram-negativas são incolores após a lavagem com álcool, elas não são mais visíveis. É por isso que o corante básico safranina é aplicado; ele cora a bactérias gram-negativas de rosa. Os corantes como a safranina, que possuem uma cor contrastante com a coloração
primária, são denominados contra corantes. Como as bactérias gram-positivas retêm a cor púrpura original, não são afetadas pelo contra corante safranina.

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1) a) - Qual diagrama representa uma bactéria gram-positiva? Como você pode saber?

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1) a) - Qual diagrama representa uma bactéria gram-positiva? Como você pode saber?

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O método da coloração de Gram é baseado na capacidade das paredes celulares de bactérias Gram-positivas de reterem o corante cristal violeta no citoplasma durante um tratamento com etanol-acetona enquanto que as paredes celulares de bactérias Gram-negativas não o fazem.

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1) b) - Explique como a coloração de Gram funciona para diferenciar entre estes dois tipos de paredes celulares

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1) b) - Explique como a coloração de Gram funciona para diferenciar entre estes dois tipos de paredes celulares

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Os diferentes tipos de bactérias
reagem de modo distinto à coloração de Gram, pois diferenças estruturais em suas paredes celulares afetam a retenção ou a liberação de uma combinação de cristal violeta e iodo, denominada complexo cristal violeta-iodo (CV-I).
Entre outras diferenças, as bactérias gram-positivas possuem uma parede celular de peptideoglicano mais espessa (dissacarídeos e aminoácidos) que as bactérias gram-negativas. Além disso, as bactérias gram-negativas contêm uma camada de lipopolissacarídeo (lipídeos e polissacarídeos) como parte de sua parede celular.
Gram-positiva: Quando aplicados a células gram-positivas e gram-negativas, o cristal violeta e o iodo penetram facilmente nas células. Dentro das mesmas o cristal violeta e o iodo se combinam para formar o CV-I. Esse complexo é maior que a molécula de cristal violeta que penetrou na célula e, devido a seu tamanho, não pode ser removido da camada intacta de peptideoglicano das células gram-positivas pelo álcool. Consequentemente, as células gram-positivas retêm a cor do corante cristal violeta.
Gram-negativo: Nas células gram-negativas, contudo, a lavagem com álcool rompe a camada externa de lipopolissacarídeo, e o complexo CV-I é removido através da camada delgada de peptideoglicano. Como resultado, as células gram-negativas permanecem incolores até serem contracoradas com a safranina, quando adquirem a cor rosa.

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TORTORA, FUNKE & CASE. Microbiologia. 8ª. ARTMED. 2005