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¿CUALES SON LAS TECNICAS PARA IDENTIFICAR MICROORGANISMOS?

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¿CUALES SON LAS TECNICAS PARA IDENTIFICAR MICROORGANISMOS?

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Es importante conocer los métodos en los cuales se basa la identificación
microbiana. No todos los microorganismos se identifican por las mismas técnicas. La mayor
parte de los métodos se realizan en un laboratorio y se busca utilizar el menor número de
procedimientos y ensayos posibles.

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CLASIFICACIÓN DE LOS MÉTODOS DE IDENTIFICACIÓN MICROBIANA 

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CLASIFICACIÓN DE LOS MÉTODOS DE IDENTIFICACIÓN MICROBIANA 

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Los métodos más utilizados para la identificación microbiana, los podemos clasificar en:
1. Métodos basados en criterios morfológicos
2. Métodos basados en tinción diferencial
3. Métodos basados en pruebas bioquímicas
4. Métodos basados en tipificación con fagos
5. Métodos basados en pruebas serológicas
6. Métodos basados en detección molecular

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Métodos basados en criterios morfológicos 

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Métodos basados en criterios morfológicos 

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Los rasgos morfológicos (estructurales) han ayudado a los taxonomistas por muchos años a clasificar organismos. Los organismos superiores tienen rasgos anatómicos tan  diferentes que pueden ser fácilmente utilizados en su clasificación, pero con respecto a  los microorganismos, éstos lucen bajo el microcoscopio tan similares que se dificulta su clasificación Es decir, que estos microorganismos que se ven tan parecidos bajo un microscopio, pueden dierir en propiedades bioquímicas, fisiológicas y/o serológicas

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Sin embargo, aun cuando la morfolo-
gía celular dice poco sobre las relaciones filogené-
ticas, sigue siendo útil para la identificación bacte-
riana. Por ejemplo: la presencia de endosporas y
su localización resulta de mucha utilidad en la
identificación de bacilos esporulados.

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Es posible sacar conclusiones en relación con la
morfología de una bacteria, examinando una lámina
que fue sometida a un proceso de tinción diferen-
cial. Estos criterios morfológicos encabezan las
primeras etapas del proceso de identificación bacte-
riana. La mayor parte de las bacterias, teñidas con
Gram, las podemos clasificar como gram positivas o
gram negativas, otras tinciones diferenciales, como  la ácido resistente, se aplican a otro tipo de bacte-
rias, como por ejemplo micobacterias.

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Las pruebas bioquímicas han sido ampliamente utilizadas para diferenciar bacterias. Estas pruebas se fundamentan en demostrar si el microorganismo es capaz de fermentar azúcares, la presencia de enzimas, la degradación de compuestos, la producción de compuestos coloreados, etc.

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Un examen
microscópico de una lámina teñida por medio de gram o de una tinción diferencial es útil para obtener una información rápida sobre la calidad de un ambiente clínico. Por otro la-
do, un médico también puede obtener suficiente información de un reporte técnico de la-boratorio para comenzar el tratamiento apropiado de un paciente.

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hecho que se
evidencia en el cultivo como zonas claras definidas, de-
nominadas placas, que indican que hubo infección y lisis
celular. El uso de fagos específicos permite identificar y
subclasificar bacterias dentro de una misma especie.

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Métodos basados en tipificación con fagos

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Métodos basados en tipificación con fagos

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La interacción entre un virus bacteriano (fago) y su célula bacteriana sensible es sumamente específica, ya que
el proceso de adsorción se encuentra mediado por receptores específicos tanto en el virus como en la célula
bacteriana. A una placa con medio de cultivo sólido inoculado con un cultivo puro de una determinada bacteria,
se le añade una alícuota de un fago específico; éste
puede ocasionar la lisis de las bacterias.

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Los métodos serológicos, implican la utilización de preparaciones de inmunoglobulinas específicas provenientes del suero o de un reactivo, y que pueden ser de gran utilidad en la identificación microbiana en muestras puras o en muestras biológicas.

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Entre los múltiples métodos de los que se vale el biólogo molecular, cinco han sido pilares en el desarrollo de la biología molecular y son parte esencial de la investigación moderna. Estos métodos son: electroforesis, secuenciación, clonación, hibridación y reacción en cadena de la polimerasa.

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El recuento en placa por siembra en profundidad: que consiste en añadir medio de cultivo fundido y enfriado a 50ºC sobre placa de Petri que contiene una cantidad determinada de la muestra diluida. Se tapa la placa y se rota para mezclar la muestra en el agar. Cuando el agar solidifica se incuban las placas. Las colonias se desarrollan tanto dentro del agar como en la superficie. Es un método generalmente utilizado para el recuento de microorganismos anaerobios facultativos o microaerofilos.