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ZULUAGA, A. F.; AGUDELO, M.; RODRIGUEZ, C. A.; VESGA, O. Application of microbiological assay to determine pharmaceutical equivalence of generic intravenous antibiotics. BMC Clinical Pharmacology, vol 9 nº 1, p. 1 - 11, 2009.

ESMERINO, L. A., PEREIRA, A. V., ANDAMOWICZ, T., BORGES, D. M., TALACIMON, E. A., SCHELESKY, M. E. Método Microbiológico para determinação da potencia de antimicrobianos. Publ. UEPG. Ciên. Biológicas e da Saúde, Ponta Grossa, v 10 (1), 9. 53 - 60, 2004.

FARAGO, P. V., ESMERINO. L. A., PAULA, J.P., JACOB, J. S., SERVAT, L. Método Microbiológico para o Doseamento da Potência da Amoxicilina em Suspensões Orais. Acta Farm. Bonaerense, v 25 (1), p 112 - 116, 2006,

PINTO, T. J. A.; Controle total e Garantia de Qualidade de Produtos Farmacêuticos, Correlatos e Cosméticos. In PINTO, T.J.A., KANEKO, T.M., OHARA, M.T. Controle biológico de qualidade de produtos farmacêuticos, correlatos e cosméticos. 3º.ed. São Paulo: Atheneu, p. 663-693, 2010

HEWITT, W. Microbiological Assay I. Orlando: Academic Press. p.1 - 16. 1977

OSTROSKY, E. A. Métodos para avaliação de atividade antimicrobiana e determinação da concentração mínima inibitória (CMI) de plantas medicinais. Revista Brasileira de Farmacognosia, v. 12, n. 2, p. 301 - 307. 2009

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Técnica de gotas ou depósito em superfície 

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Técnica de gotas ou depósito em superfície 

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Adiciona-se 2 a 3 µL da solução P e A na superfície do ágar
com microsseringa,

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Os discos podem ser colocados manualmente com auxílio de
pinça estéril sobre a superfície do meio ou através de
equipamento apropriado sobre o meio inoculado.

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São perfurados pequenos poços no meio de cultura através
de instrumento adequado de maneira que forme um cilindro
embutido no meio sólido

Os halos podem ser irregulares se o instrumento que servirá
para a construção dos orifícios não for padronizado

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Cilindros de vidro, porcelana, aço inoxidável, alumínio

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Técnica de cilindros em placas

Técnica de orifícios ou poçinhos

Técnica de disco ou papel

Técnica de gotas ou depósito em superfície

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Conteúdo de água presente no meio

Qualidade do ágar

Densidade do inóculo

pH do meio e das soluções utilizadas

Tempo e temperatura de incubação

Forma ativa da substância

Coeficiente de difusão da substância e velocidade de
crescimento do microrganismo

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As técnicas de cilindro e de orifício são mais trabalhosas e
necessitam de cuidados extremos no manuseio das placas

Suspensões interferem nas técnicas de cilindro e de disco

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Em todas as técnicas deste método as amostras não
precisam estar estéreis

As técnicas de cilindro e de orifício mostram-se mais
sensíveis à pequenas concentrações que a de disco

Técnica de disco é mais simples, rápida e de melhor
precisão, além de permitir o ensaio com altas concentrações
de solvente orgânico

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Qual a importância da metodologia do doseamento de antibióticos por difusão em agar? 

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Qual a importância da metodologia do doseamento de antibióticos por difusão em agar? 

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Apesar da resistência bacteriana ser um problema real e crescente, a prescrição dos antibióticos vem aumentando gradativamente. Diante disso, a preocupação com a qualidade dos medicamentos também é crescente. (ZULUAGA et al., 2009)
A eficácia dos tratamentos, principalmente aqueles realizados com antimicrobianos, depende da concentração plasmática que o medicamento atinge após sua administração, a dose do fármaco deve ser suficiente para produzir efeito farmacológico esperado (FARAGO et al, 2006). Para avaliar esta situação a indústria farmacêutica vem acompanhando a evolução tecnológica desde o inicio da produção até a liberação do produto final e, para isso, a confirmação da eficácia terapêutica de produtos medicamentosos deve ser realizada (PINTO et al., 2010).
No estudo dos antimicrobianos  os conceitos de sensibilidade e resistência bacteriana se fundamentam na correlação entre a concentração inibitória mínima (CIM) e os níveis plasmáticos alcançados com o antimicrobiano administrado. Para se obter concentrações plasmáticas que se caracterizem com atividade biocida ou biostática é necessário que nas formulações farmacêuticas a potência do antimicrobiano esteja adequada. (ESMERINO et al., 2006).
Atualmente, existem dois métodos para a determinação da potência dos antimicrobianos, o método de difusão em ágar e o método turbidimétrico, ambos se baseiam na comparação quantitativa do efeito de duas substancias no crescimento de microrganismos suscetíveis em um meio nutriente, (HEWITT, 1977)
O teste de difusão de ágar, é um método no qual um microrganismo é utilizado como revelador e utilizado contra uma substancia biologicamente ativa em meio de cultura solido. É relacionado o tamanho da zona de inibição de crescimento do microrganismo e desafiando com a concentração da substancia ensaiada. (OSTROSKY, 2009). O método avalia a capacidade de um dado microrganismo de se multiplicar na presença de concentrações presumíveis de uma substancia antimicrobiana.