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Deve anteceder o uso de antifúngico sistêmico. Procedimento realizado por equipe médica especializada.
Fragmento com 3,0 a 5,0 mm é suficiente, devendo ser acondicionado no momento da coleta em frasco com salina estéril.

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Coletados assepticamente por profissional médico, em frascos com água destilada ou Solução Salina estéril.
Auxílio de um bisturi estéril ou maceração (gânglio) com pistilo em almofariz, pode ser feito dentro de uma placa de Petri estéril.

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1. A escolha do teste microbiológico baseia-se na suspeita clínica do agente causador. Logo para determinar o melhor teste precisa ser o mais adequado, melhor sítio ativo e o momento clínico favorável para o coletamento da amostra.
2. A escolha do melhor método baseia-se na suspeita potencial do agente causador. Logo é preciso ter um meio de transporte específico.
3. O procedimento de coleta da amostra deve  proceder previamente á terapia medicamentosa para que não haja interferência na viabilidade dos microrganismos.
4. O volume de amostra coletado interfere na sensibilidade dos testes microbiológicos. Logo, o material obtido deve ser suficientemente  para aplicação dos procedimentos solicitados, pois amostras insuficientes podem culminar falso-positivos.
5. Sempre informar de maneira clara e objetiva o procedimento necessário para coleta do material microbiológico.
6. Os laboratórios de microbiologia clínica devem disponibilizar as informações necessárias perante técnicas de assepsia, coleta (frascos estéreis),  transporte da amostra para diagnóstico.

7. O frasco de coleta deve estar devidamente identificado e nunca sobre tampas ou rótulos.
8. Para identificação da amostra correta, bem como, seu sítio de origem e suspeita clínica, precisam estar constatadas na requisição para análise de procedimentos de meios de culturas adequador e execução dos procedimentos.
9. O transporte das amostras, semeadura e execução dos procedimentos, quanto mais rápidos é fundamental para viabilidade do microrganismo.
10. Atenção para manuseio de microrganismos que são sensíveis a condições ambientais, como a temperatura.
11. Para evitar comprometimento da eficácia do exame é preciso se atentar aos seguintes fatores, tais como, informações incompletas, requisição inadequada, coleta e transporte inadequados da amostra clínica, falhas técnicas no processamento da amostra, demora na liberação do resultado e má interpretação dos resultados.
12. O laboratório microbiológico deve fornecer treinamento e incentivo específico para equipe além de realizar a  reciclagem periódica.
13. Utilização de EPI para manuseio das amostras potencialmente infectantes.

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1. Identificação incorreta da amostra, não devidamente interpretadas, etc.
2. Quantidade do material coletado insuficiente para cultura e diagnóstico.
3. Transporte inadequado (frascos não estéreis), não compatível com o sítio informado e frascos fechados inadequadamente.
4. Amostra incompatível com os exames solicitados.
5. Coleta, conservação e transporte inadequados.
6. Requisição inadequada da análise laboratorial.

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Resultados questionáveis, principalmente quando são amostras de secreções colhidas através de swab:

Queimadura;

Úlcera de decúbito;

Abscesso perirretal;

Lesão de gangrena;

Lesão periodontal;

Úlcera varicosa.

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BRASIL, SECRETARIA DA SAÚDE DO ESTADO DE GOIÁS. Manual de Procedimentos: Coleta, Acondicionamento e Transporte de Amostras Biológicas. Goiás, 2010

LACAZ C.S.; Porto, E.; MARTINS, J.E.C.; HEINS-VACCARI, E.M.; MELO, N.T. Tratado de Micologia Médica, 9a ed., Sarvier, São Paulo, 2002.

Brasil. Agência Nacional de Vigilância Sanitária Microbiologia Clínica para o Controle de Infecção Relacionada à Assistência à Saúde. Módulo 8: Detecção e identificação de fungos de importância médica /Agência Nacional de Vigilância Sanitária.– Brasília: Anvisa, 2013

Manual de Microbiologia Clínica para o Controle de Infecção em Serviços de Saúde. Procedimentos Laboratoriais: da Requisição do Exame à Análise Microbiológica, Salvador, 30 de agosto a 3 de setembro de 2004.

MÓDULO 1: Noções Gerais para Boas Práticas em Microbiologia Clínica.

Disponível em: < http://www.anvisa.gov.br/servicosaude/controle/rede_rm/cursos/boas_praticas/modulo1/importancia.htm>.

Acesso: 18/09.

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Segundo o Módulo 8 da ANVISA sobre detecção e Identificação de Fungos de Importância Médica, também,  Procedimentos Laboratoriais da Requisição do Exame à Análise Microbiológica além da revisão do  MÓDULO VIII – MICOLOGIA da Secretaria de Saúde no Estado de Goiás (SUS).
Foi possível, sintetizar que a coleta dos espécimes clínicos é a primeira etapa para análise microbiológica. Com isso, é necessário que as amostras sejam coletas de maneira adequada, fazer a suspensão do uso da terapia medicamentosa como de antifúngicos oral por 20 (vinte) dias ou tópico por pelo menos 10 (dez) dias anterior ao procedimento devendo estar em conformidade com os formulários padrões, contendo dados epidemiológicos e clínicos do paciente.
Ficha de aferição deve conter:
Identificação, origem, residência, tempo de evolução da doença, localização e aspectos clínicos da lesão, possível contato com animais, uso de drogas antifúngicas nos últimos 30 dias e suspeita clinica, quando informado pelo médico etc.

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Deve anteceder o uso de antifúngico sistêmico.
Primeira expectoração da manhã, após gargarejo com água limpa ou fervida, em frasco de boca larga, esterilizado. Não deve conter saliva.
Colher aproximadamente 5,0 mL da amostra.
Suspeita de infecção por micobactérias ou fungos, coletar pelo menos três amostras, em dias consecutivos (somente uma amostra por dia).

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Acompanhamento de técnico e nebulização com solução salina hipertônica a 3%, durante 05 a 20 minutos, posterior forçar a tosse para a coleta de escarro.
Colher aproximadamente 5,0 ml da amostra.

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Lavado brônquico/lavado bronco alveolar e aspirado traqueal

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Lavado brônquico/lavado bronco alveolar e aspirado traqueal

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Executada por equipe médica especializada.
Colher as alíquotas em recipientes distintos e aproximadamente 5,0 ml da amostra.

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Frasco estéril de boca larga.
Nebulização com solução salina hipertônica a 3%.
Broncoscopia.

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O transporte da espécime deve ser realizado em pote plástico de boca larga com tampa de rosca para os escarros e lavados. Para  bronquinho no caso de lavados e aspirados.

Enviar em até 02 horas à temperatura ambiente.
Acima desse período, sob-refrigeração (2 a 8°C) e encaminhar em até 12 horas.

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Deve anteceder o uso de antifúngico tópico ou sistêmico.
Raspagem e escarificação com lâmina de bisturi descartável as lesões crostosas ou verrucosas.
Aspirado do pus e/ou a biópsia são mais apropriados para o exame.  Sendo que, para coletamento do pus ocorre pela drenagem, com agulha ou seringas estéreis pela equipe médica especializada.
Grãos e/ou pontos negros visíveis na lesão e pus, devem ser coletados.

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Lâmina de bisturi descartável.
Agulha e seringa estéreis.
Coleta de swab (desde que retire material profundo e evite encostar nas bordas e pele adjacentes) em  caso de lesões de difícil aspiração.

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O transporte da espécime deve ser realizado em frasco estéril, caixa apropriada e a temperatura ambiente.
Manter a temperatura ambiente por até 02 horas, caso contrário, manter sob-refrigeração (2 a 8°C) por até 24 horas.

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Deve anteceder o uso de antifúngico tópico ou sistêmico pelo menos por 07 dias, também cabelos e pele não devem conter cremes, pomadas e as unhas deverão estar livres de esmaltes.

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Descontaminar a pele com álcool a 70%.
Obter as escamas superficiais das lesões (do centro em direção as bordas) por raspagem, com lâmina de bisturi descartável ou lâmina de microscopia estéril.

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Raspagem com bisturi descartável ou lâmina de microscopia estéril, amostras de áreas de alopecia, lesões descamativas e granulomatosas.
Coletar também “tocos” de cabelos e folículos capilares, podendo usar pinça estéril se necessário.

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Lesão for ao longo dos cabelos, como nódulos aderidos, esses devem ser coletados através de corte num pequeno “tufo” de cabelo/pelo com tesoura estéril.

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Descontaminar a(s) superfície(s) da unha(s) com álcool a 70%.
Limpeza prévia das unhas escovando com água e sabão.
Raspar com bisturi descartável a porção externa até obter material de áreas profundas e verificar se há comprometimento das áreas periungueal e subungueal e daí coletar também desses locais.

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Auxílio de um swab descartável, coletar secreção vaginal (se possível, utilizar espéculo e colher material de fundo de saco) ou de placas brancas e/ou eritematosas da mucosa bucal.

# data[].attributes.body
Lâmina de bisturi descartável ou lâmina de microscopia estéril.
Pinça estéril e tesoura estéril.
Swab descartável.

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O transporte da espécime deve ser realizada em placas de petri estéreis para transporte de raspados e amostras secas, vedada com parafilme ou fita adesiva em caixa apropriada à temperatura ambiente. Para as membranas mucosas é através de um tubo de rosca com salina estéril, em caixa apropriada.
Raspados e amostras secas podem ser mantidos à temperatura ambiente por até 07 dias, mas o envio imediato deve ser estimulado.
Membranas mucosas manter a temperatura ambiente para transporte em até 02 horas, caso contrário, manter sob-refrigeração (2 a 8°C) por até 24 horas.

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O transporte da espécime deve ser realizado em frasco estéril com salina em TA e ao abrigo da luz ou em caixa sob-refrigeração (2 a 8°C).
Enviar em até 02 horas à temperatura ambiente. Para períodos maiores, manter sob-refrigeração (2 a 8°C), por até 12h.

# data[].attributes.body
Deve anteceder o uso de antifúngico sistêmico.
Fazer antissepsia da pele que circunda o local de inserção do cateter.
Remover assepticamente o cateter, cortar aproximadamente 5 cm da parte mais distal.

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Aspergilose, Histoplasmose, Criptococose etc.

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Esporotricose, Paracoccidioidomicose, Micetoma etc.

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Dermatofitoses (tineas), onicomicose, Pitiríase versicolor etc.

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Deve anteceder o uso de antifúngico sistêmico.
Procedimento realizado por equipe médica especializada e  coletar de 3 a 5 mL.
Fazer antissepsia rigorosa no local da punção.

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Tubo estéril.
Agulha através da punção da coluna lombar.

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O transporte da espécime deve ser realizado em um tubo estéril e nunca refrigerar.
É necessário que seja levado a amostra imediatamente ao laboratório, acompanhada de pedido médico adequadamente preenchido, nos casos de paciente com idade crítica

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Granulomatose criptocócica (torulose), Blastomicose Americana, Esporotricose etc.

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Cateteres.

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O transporte da espécime deve ser realizado em frasco estéril à temperatura ambiente, em caixa apropriada.
Manter em temperatura ambiente até o envio, que deve ser imediato.

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Fungos patogênicos oportunistas.

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Deve anteceder o uso de antifúngico tópico ou sistêmico pelo menos por 07 dias.
Na membranas mucosa com auxílio de um swab descartável, coletar secreção vaginal (se possível, utilizar espéculo e colher material de fundo de saco) ou de placas brancas e/ou eritematosas da mucosa bucal.

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Swab descartável.
Espéculo vaginal.

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O transporte da espécime deve ser realizado em meio de Stuart ou tubo de rosca com salina estéril, em caixa apropriada e a temperatura ambiente por até 02 horas após a coleta. Para tempo superior (não ultrapassar 24 horas), transportar em caixa com gelo reciclável

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BRASIL, SECRETARIA DA SAÚDE DO ESTADO DE GOIÁS. Manual de Procedimentos: Coleta, Acondicionamento e Transporte de Amostras Biológicas. Goiás, 2010

LACAZ C.S.; Porto, E.; MARTINS, J.E.C.; HEINS-VACCARI, E.M.; MELO, N.T. Tratado de Micologia Médica, 9a ed., Sarvier, São Paulo, 2002.

Brasil. Agência Nacional de Vigilância Sanitária Microbiologia Clínica para o Controle de Infecção Relacionada à Assistência à Saúde. Módulo 8: Detecção e identificação de fungos de importância médica /Agência Nacional de Vigilância Sanitária.– Brasília: Anvisa, 2013

Manual de Microbiologia Clínica para o Controle de Infecção em Serviços de Saúde. Procedimentos Laboratoriais: da Requisição do Exame à Análise Microbiológica, Salvador, 30 de agosto a 3 de setembro de 2004.

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Cândida albicans etc.

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Deve anteceder o uso de antifúngico tópico ou sistêmico.
Umedecer um swab com salina estéril e colher material do conduto auditivo externo e médio.
Material advindo do conduto auditivo interno é coletado pelo médico.

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Curetagem da lesão ou com swab estéril.

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O transporte da espécime deve ser realizado em Stuart ou tubo de rosca com salina estéril, em caixa apropriada e a temperatura ambiente.
Enviar em até 12 horas, mantendo em temperatura ambiente até o envio.

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Otomicose (Aspergillus e Candida) etc.

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A amostra biológica mais apropriada para o diagnóstico de micose do trato urinário é obtida por sondagem ou citoscopia.
Deve anteceder o uso de antifúngico sistêmico.
Executar técnica de coleta de jato médio, priorizando a 1ª urina da manhã, com prévia higiene da área íntima com água e sabão, desprezar o primeiro jato de urina da manhã, e colher 3 a 5 mL de urina em frasco estéril.

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Frasco estéril de boca larga com tampa de rosca

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O transporte da espécime deve ser realizado frasco estéril de boca larga com tampa de rosca em caixa apropriada com o gelo reciclável.
Enviar ao laboratório em até 30 minutos após a coleta, caso contrário, manter sob-refrigeração (2 a 8°C) por até no máximo 12 horas.

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Candidíase, Aspergillus sp, Mucoraceae sp, Histoplasma capsulatum

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Fazer lavagem prévia da região anal com água e sabão, coletar porções de fezes em recipiente estéril com tampa ou swab anal, mergulhar o swab em salina estéril.
Coletar de 2 a 4 g de fezes em frasco limpo, seco, de boca larga e com tampa de rosca, dar preferência às partes mucopurulentas e com sangue.

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Swab descartável.
Frasco estéril.

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O transporte da espécime deve ser realizado em meio para transporte (Cary Blair ou salina glicerinada tamponada).
Amostra deve ser entregue ao imediatamente ao laboratório em até uma hora, caso não ocorra conservar em geladeira a 4ºC, no máximo por um período de 12 horas.

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Cândida sp etc.

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Deve anteceder o uso de antifúngico tópico ou sistêmico.
As secreções da parte interna da pálpebra inferior (desconsiderar secreções superficiais) são coletadas com swab umedecido em salina estéril e colocado em meio de Stuart.
Em caso de coleta feita pelo médico: raspado corneal, aspirado de líquido intraocular, solicitar ao LACEN-GO com antecedência os ágares Sabouraud e Mycosel para que a amostra seja semeada imediatamente no local da coleta.

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Swab umedecido em salina estéril

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O transporte da espécime deve ser realizado em  seus respectivos meios, em caixa apropriada e a temperatura ambiente.
Amostra inoculada em Stuart: enviar em até 12 horas, mantendo em temperatura ambiente até o envio.
Amostra semeada em ágares Sabouraud e Mycosel: enviar em até 12 horas, mantendo em temperatura ambiente.

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Ceratomicoses ou ceratites fúngicas.

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Deve anteceder o uso de antifúngico sistêmico. Procedimento realizado por equipe médica especializada.
Fazer assepsia rigorosa no local da punção.
Coletar cerca de 5 a 10mL de líquido em tubo de ensaio estéril.

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Agulha para punção percutânea ou cirúrgica.

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O transporte da espécime deve ser realizado em frasco estéril, caixa apropriada e a temperatura ambiente.
Enviar em até 02 horas à temperatura ambiente. Acima desse período, sob-refrigeração (2 a 8°C) e encaminhar em até 12 horas.

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Fungos patogênicos oportunistas.

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BRASIL, SECRETARIA DA SAÚDE DO ESTADO DE GOIÁS. Manual de Procedimentos: Coleta, Acondicionamento e Transporte de Amostras Biológicas. Goiás, 2010

LACAZ C.S.; Porto, E.; MARTINS, J.E.C.; HEINS-VACCARI, E.M.; MELO, N.T. Tratado de Micologia Médica, 9a ed., Sarvier, São Paulo, 2002.

Brasil. Agência Nacional de Vigilância Sanitária Microbiologia Clínica para o Controle de Infecção Relacionada à Assistência à Saúde. Módulo 8: Detecção e identificação de fungos de importância médica /Agência Nacional de Vigilância Sanitária.– Brasília: Anvisa, 2013

Manual de Microbiologia Clínica para o Controle de Infecção em Serviços de Saúde. Procedimentos Laboratoriais: da Requisição do Exame à Análise Microbiológica, Salvador, 30 de agosto a 3 de setembro de 2004.

MÓDULO 1: Noções Gerais para Boas Práticas em Microbiologia Clínica.

Disponível em: < http://www.anvisa.gov.br/servicosaude/controle/rede_rm/cursos/boas_praticas/modulo1/importancia.htm>.

Acesso: 18/09.

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BRASIL, SECRETARIA DA SAÚDE DO ESTADO DE GOIÁS. Manual de Procedimentos: Coleta, Acondicionamento e Transporte de Amostras Biológicas. Goiás, 2010

LACAZ C.S.; Porto, E.; MARTINS, J.E.C.; HEINS-VACCARI, E.M.; MELO, N.T. Tratado de Micologia Médica, 9a ed., Sarvier, São Paulo, 2002.

Brasil. Agência Nacional de Vigilância Sanitária Microbiologia Clínica para o Controle de Infecção Relacionada à Assistência à Saúde. Módulo 8: Detecção e identificação de fungos de importância médica /Agência Nacional de Vigilância Sanitária.– Brasília: Anvisa, 2013

Manual de Microbiologia Clínica para o Controle de Infecção em Serviços de Saúde. Procedimentos Laboratoriais: da Requisição do Exame à Análise Microbiológica, Salvador, 30 de agosto a 3 de setembro de 2004.

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BRASIL, SECRETARIA DA SAÚDE DO ESTADO DE GOIÁS. Manual de Procedimentos: Coleta, Acondicionamento e Transporte de Amostras Biológicas. Goiás, 2010

LACAZ C.S.; Porto, E.; MARTINS, J.E.C.; HEINS-VACCARI, E.M.; MELO, N.T. Tratado de Micologia Médica, 9a ed., Sarvier, São Paulo, 2002.

Brasil. Agência Nacional de Vigilância Sanitária Microbiologia Clínica para o Controle de Infecção Relacionada à Assistência à Saúde. Módulo 8: Detecção e identificação de fungos de importância médica /Agência Nacional de Vigilância Sanitária.– Brasília: Anvisa, 2013

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BRASIL, SECRETARIA DA SAÚDE DO ESTADO DE GOIÁS. Manual de Procedimentos: Coleta, Acondicionamento e Transporte de Amostras Biológicas. Goiás, 2010

LACAZ C.S.; Porto, E.; MARTINS, J.E.C.; HEINS-VACCARI, E.M.; MELO, N.T. Tratado de Micologia Médica, 9a ed., Sarvier, São Paulo, 2002.

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BRASIL, SECRETARIA DA SAÚDE DO ESTADO DE GOIÁS. Manual de Procedimentos: Coleta, Acondicionamento e Transporte de Amostras Biológicas. Goiás, 2010

LACAZ C.S.; Porto, E.; MARTINS, J.E.C.; HEINS-VACCARI, E.M.; MELO, N.T. Tratado de Micologia Médica, 9a ed., Sarvier, São Paulo, 2002.

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BRASIL, SECRETARIA DA SAÚDE DO ESTADO DE GOIÁS. Manual de Procedimentos: Coleta, Acondicionamento e Transporte de Amostras Biológicas. Goiás, 2010

LACAZ C.S.; Porto, E.; MARTINS, J.E.C.; HEINS-VACCARI, E.M.; MELO, N.T. Tratado de Micologia Médica, 9a ed., Sarvier, São Paulo, 2002.

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BRASIL, SECRETARIA DA SAÚDE DO ESTADO DE GOIÁS. Manual de Procedimentos: Coleta, Acondicionamento e Transporte de Amostras Biológicas. Goiás, 2010

LACAZ C.S.; Porto, E.; MARTINS, J.E.C.; HEINS-VACCARI, E.M.; MELO, N.T. Tratado de Micologia Médica, 9a ed., Sarvier, São Paulo, 2002.

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BRASIL, SECRETARIA DA SAÚDE DO ESTADO DE GOIÁS. Manual de Procedimentos: Coleta, Acondicionamento e Transporte de Amostras Biológicas. Goiás, 2010

LACAZ C.S.; Porto, E.; MARTINS, J.E.C.; HEINS-VACCARI, E.M.; MELO, N.T. Tratado de Micologia Médica, 9a ed., Sarvier, São Paulo, 2002.

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BRASIL, SECRETARIA DA SAÚDE DO ESTADO DE GOIÁS. Manual de Procedimentos: Coleta, Acondicionamento e Transporte de Amostras Biológicas. Goiás, 2010

LACAZ C.S.; Porto, E.; MARTINS, J.E.C.; HEINS-VACCARI, E.M.; MELO, N.T. Tratado de Micologia Médica, 9a ed., Sarvier, São Paulo, 2002.

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BRASIL, SECRETARIA DA SAÚDE DO ESTADO DE GOIÁS. Manual de Procedimentos: Coleta, Acondicionamento e Transporte de Amostras Biológicas. Goiás, 2010

LACAZ C.S.; Porto, E.; MARTINS, J.E.C.; HEINS-VACCARI, E.M.; MELO, N.T. Tratado de Micologia Médica, 9a ed., Sarvier, São Paulo, 2002.

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LACAZ C.S.; Porto, E.; MARTINS, J.E.C.; HEINS-VACCARI, E.M.; MELO, N.T. Tratado de Micologia Médica, 9a ed., Sarvier, São Paulo, 2002.

Brasil. Agência Nacional de Vigilância Sanitária Microbiologia Clínica para o Controle de Infecção Relacionada à Assistência à Saúde. Módulo 8: Detecção e identificação de fungos de importância médica /Agência Nacional de Vigilância Sanitária.– Brasília: Anvisa, 2013

Manual de Microbiologia Clínica para o Controle de Infecção em Serviços de Saúde. Procedimentos Laboratoriais: da Requisição do Exame à Análise Microbiológica, Salvador, 30 de agosto a 3 de setembro de 2004.

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BRASIL, SECRETARIA DA SAÚDE DO ESTADO DE GOIÁS. Manual de Procedimentos: Coleta, Acondicionamento e Transporte de Amostras Biológicas. Goiás, 2010

LACAZ C.S.; Porto, E.; MARTINS, J.E.C.; HEINS-VACCARI, E.M.; MELO, N.T. Tratado de Micologia Médica, 9a ed., Sarvier, São Paulo, 2002.

Brasil. Agência Nacional de Vigilância Sanitária Microbiologia Clínica para o Controle de Infecção Relacionada à Assistência à Saúde. Módulo 8: Detecção e identificação de fungos de importância médica /Agência Nacional de Vigilância Sanitária.– Brasília: Anvisa, 2013

Manual de Microbiologia Clínica para o Controle de Infecção em Serviços de Saúde. Procedimentos Laboratoriais: da Requisição do Exame à Análise Microbiológica, Salvador, 30 de agosto a 3 de setembro de 2004.

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Micologia - Características Gerais - Professora Andréa Mendonça

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Conselho Regional de Farmácia do Estado do Paraná

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Palestra - "Micologia: Diagnóstico Laboratorial de Micoses Superficiais e Cutâneas"