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As hemácias não possuem mitocôndrias, por isso a via glicolítica é vital para sintetizar ATP pra manter a integridade da membrana; tranformar meta-hemoglobina em hemoglobina; formar 2-3-difosfoglicerato, que regula a afinidade da hb pelo O2.

2147H487 Hematologia básica [recurso eletrônico] / Adriana DalpicolliRodrigues... [et al.] ; [revisão técnica: Liane Nanci Rotta]. – 2.ed. – Porto Alegre: SAGAH, 2019.

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Controle de qualidade interno dos reagentes

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Controle de qualidade interno dos reagentes

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Dentre as atividades mais importantes no setor de imuno-hematologia é garantir que os reagentes utilizados estão desempenhando as características necessárias para um resultado confiável tais como: reatividade, avidez e titulo.

È importante que essa atividade seja feita sistematicamente (lote remessa e diario), desde a escolha dos fornecedores, o cuidado no transporte, recebimento, armazenamento.

E sempre analisar as bulas dos reagentes!

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Olá alunos,

Como parte de avaliação de aprendizagem vocês deverão criar um GLOSSÁRIO (como um dicionário ou Wikipédia) - contendo termos, definições, conceitos abordados nas aulas, e também, desafios criados pelas professoras.

Vocês deverão postar AQUI neste padlet .

NÃO SE ESQUEÇA DE FAZER ACESSO COM SEUS DADOS OU IDENTIFICAR O SEU TRABALHO COM SEU NOME E SOBRENOME!

VALOR TOTAL DESTA ATIVIDADE: 100 PONTOS.

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Coisas a fazer ATÉ A NOSSA PRÓXIMA AULA: 

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Coisas a fazer ATÉ A NOSSA PRÓXIMA AULA: 

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Nossa avaliação será SOMATIVA e construida ao longo de nossos encontros. Por isso, dividam-se em 4 grupos de trabalho e mãos à obra!

Primeiramente, assitam ou revejam as aulas gravadas. A seguir, ampliem os estudos revendo conceitos importantes de Imunologia, Genética e Hematologia que possam favorecer a sua compreensão nos temas abordados em nossa disciplina.

Agora é hora de trabalhar! Nosso PADLET (MURAL) será permanente. Todas as orientações das professoras estarão AQUI.

Localize o seu link para o PADLET do grupo e trabalhem até o final de nossa disciplina. Cada encontro daremos orientações sobre os conteúdos a serem criados.

Elaborar o PADLET em grupo sobre:

1) AULA DOS DIAS 10 E 11/11/2023

Capítulo 1:

Bases da Imuno-hematologia

Síntese e degradação da Hemoglobina

Sistema ABO

Importância clínica dos anticorpos ABO e o mecanismo de hemólise in vivo.

Bons estudos!

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Figura representando os antígenos H, B e A Conceitos básicos e aplicados em imuno-hematologia -  Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira

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Figura representando os antígenos H, A e B. Conceitos básicos e aplicados em imuno-hematologia - Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira - 2013

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O genes ABO se localizam no braço longo do cromossomo 9 (posição 9q34.1‐q34.2). Foram definidos quatro genes: A1, A2, B, O.
Esses genes codificam a produção de duas enzimas glicosiltransferases A e B.
A transferase A α (1,3 N acetilgalactosaminil transferase), que adiciona o açúcar N acetil galactosamina e produz o antígeno A; e a transferase B (α1,3 galactosil transferase), que adiciona a galactose e produz o antígeno B num substrato precursor na membrana da hemácia, o antígeno H. O gene O não produz transferase ativa.
A sequência de DNA do gene O é idêntica ao do gene A, exceto pela deleção (G‐261) na região N‐terminal, o que codifica uma proteína truncada.
O gene alelo A2 difere de A1 pela simples deleção de uma base na região C‐terminal, na posição 467, sendo o nucleotídeo T em A2 e C em A1; o gene A2 produz uma transferase A2 que tem uma atividade reduzida, quando comparada com a transferase A1. Referência: Imuno‐hematologia laboratorial / Ministério da Saúde, Secretaria de Atenção à Saúde, Departamento de Atenção Hospitalar
e de Urgência. – Brasília : Ministério da Saúde, 2014.

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Características da imunidade inata e adaptativa

Referência: Abbas A, Lichtman A.H., Pober J.S. Imunologia Celular & Molecular – 7a edição - Ed. Elsevier. Rio de Janeiro. 2013

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Figura das funções de diferentes células apresentadoras de antígenos

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Referência: Abbas A, Lichtman A.H., Pober J.S. Imunologia Celular & Molecular - 7a edição. Ed Elsevier. Rio de Janeiro.2013

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O sangue é um tecido conjuntivo fluido de composição única, consistindo em plasma e elementos figurados. 2147H487  Hematologia básica [recurso eletrônico] 2019

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Figura dos antígenos do grupo sanguíneo ABO

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Referência: Abbas A, Lichtman A.H., Pober J.S. Imunologia Celular & Molecular - 7a edição. Ed Elsevier. Rio de Janeiro.2013

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Figura de ligação do antígeno ao anticorpo

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Referência: Abbas A, Lichtman A.H., Pober J.S. Imunologia Celular & Molecular - 7a edição. Ed Elsevier. Rio de Janeiro.2013

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Referência: Oliveira M.B.S.C., Ribeiro F.C., Vizzoni A.G. Conceitos básicos e aplicados em imuno-hematologia . Rio de Janeiro.2013

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Referência: Stephens P.R.S., Ribeiro F.C., Silva. V.L., Marques M.A.P. Hematologia e imunologia aplicadas em imuno- hematologia . Rio de Janeiro.2013

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A hemoglobina é classificada como hemoproteína. Esse grupo heme está ligado a átomos de ferro, que são responsáveis pela ligação da hemoglobina ao oxigênio, através do anel pirólico.

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Degradação da hemoglobina

https://youtu.be/v2EomNSMR-E?si=CjOnlOOh_dWQiesO

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A hemoglobina é a principal proteína intracelular da hemácia e a molécula responsável pela verdadeira função de troca gasosa. A hemoglobina é uma molécula esférica, composta por 2 pares de cadeias de globina diferentes, com um grupo heme, a ferroprotoporfirina IX, ligado de forma covalente a um sítio específico em cada cadeia.5 A principal hemoglobina do adulto, a hemoglobina A, é formada a partir de um par de cadeias alfa (cada uma contendo 141 aminoácidos) e um par de cadeias beta (contendo 146 aminoácidos cada), sendo representada como alfa-2-beta-2.Artigo original: Means Jr., RT. Red blood cell function and disorders of iron metabolism. ACP Medicine. 2008;1-18.

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Figura: Tabela - Resolvendo Discrepâncias ABO

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Referências: Misson, P.P.A, 2012. Blog -Tudo Sobre Sangue.

Endereço de acesso: htpp://tudosobresangue.blogspot.com.br

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Monitora a estabilidade dos processos e procedimentos aumentando a confiança nos resultados e tem várias funções, como:

controlar o desempenho de materiais, equipamentos e métodos

Identificar mudanças na estabilidade

Identificar necessidade de melhorias

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obedecer as instruções do fabricante

Amostras controle positiva e negativa

Obrigatoriamente utilizar o controle Rh e soro anti-D do mesmo fabricante para fenotipagem rhD

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Controle de Qualidade dos Reagentes Imunohematológicos.

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Controle de Qualidade dos Reagentes Imunohematológicos.

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https://youtu.be/9T3IjsXAgN4?si=q9FxwnaUxz78U4Ht

Aula sobre o Controle de Qualidade dos Reagentes Imunohematológicos. Fundação Pró Sangue

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Controle de Qualidade de Reagentes Imunohematológicos na Agência Transfusional

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antissoro

Lectinas

Reagentes eritrocitários

Potencializadores

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A Hemoterapia vem buscando incansavelmente o aumento da segurança Transfusional. Para chegarmos a esta segurança é necessário padronizarmos os testes que comprovem a qualidade dos reagentes utilizados nos serviços Hemoterápicos. O controle de qualidade é essencial e indispensável para a obtenção de resultados confiáveis nos ensaios as quais se destinam. Os reagentes devem ser testados rotineiramente , por ocasiões de aquisição e ou/ quando do armazenamento e durante o seu uso, uma vez que vários fatores como transporte, armazenamento, temperatura ,podem alterar a qualidade desses produtos.

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guia do ministério da saúde para inspeção visual que devem ser realizados nos hemocomponentes para maior segurança do processo de transfusão.

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https://youtube.com/watch?v=bY4OciOS6a0&si=vgv-sB6ZCspBQ6BX

Aula sobre controle de qualidade em imuno-hematologia e sorologia - fundação pró sangue.

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Importância clínica dos anticorpos ABO e o mecanismo de hemólise in vivo

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Importância clínica dos anticorpos ABO e o mecanismo de hemólise in vivo

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Glossário:                                                              Especificidade: característica inerente ao anticorpo que o torna capaz de reconhecer apenas hemácias portadoras do antígeno correspondente.                          Avidez:  afinidade do anticorpo pelo antígeno. Define o quanto o anticorpo é complementar ao antígeno por meio da velocidade e intensidade com as quais o antígeno e o anticorpo reagem. Imuno‐hematologia laboratorial / Ministério da Saúde, Secretaria de Atenção à Saúde, Departamento de Atenção Hospitalar
e de Urgência. – Brasília : Ministério da Saúde, 2014.                                                   A produção de anticorpos contra os componentes da membrana eritrocitária pode causar anemias hemolíticas. Essa condição, que pode ser hereditária ou adquirida, resulta do aumento no ritmo de destruição dos eritrócitos. Dentre as anemias hemolíticas adquiridas, podemos citar as autoimunes, aloimunes (reações hemolíticas em transfusões de sangue) e aquelas associadas ao uso de drogas.
As anemias hemolíticas autoimunes são causadas pela produção de anticorpos contra proteínas da membrana dos eritrócitos do próprio organismo. Essas proteínas são reconhecidas pelos anticorpos como antígenos, como um corpo estranho, e isso leva, então, à des- truição das hemácias. O autoanticorpo liga-se a estruturas da membrana dos eritrócitos, principalmente da circulação periférica. Esses anticorpos são principalmente IgM bastante eficientes na fixação de complemento, ocorrendo hemólise extra e intravascular.
As anemias hemolíticas aloimunes são observadas em reações a transfusões de sangue, quando os anticorpos produzidos pelo doador reagem com os eritrócitos do receptor da transfusão. Os anticorpos do doador reconhecem as estruturas da membrana da hemácia – proteínas, carboidratos etc. – como um antígeno, e isso ocasiona a destruição das hemácias.  Anemias hemolíticas também podem ser induzidas por alguns fármacos. A penicilina, por exemplo, pode ligar-se à membrana dos eritrócitos, e dessa forma induzir a produção de anticorpos contra o complexo penicilina + eritrócito, levando a um quadro de hemólise. Referência: Conceitos básicos e aplicados em imuno-hematologia. / Organização de
Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira, Flávia Coelho Ribeiro e Alexandre Gomes Vizzoni. - Rio de Janeiro: EPSJV, 2013.

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Nós do GRUPO 1, após visitarmos todos os Padlets e revisar o conteúdo publicado pelos colegas, avaliamos este Padlet com 4 estrelas. 
Muito bom!

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Os antígenos eritrocitários do sistema de grupo sanguíneo RH são codificados por dois genes altamente homólogos, RHD e RHCE, sendo que os rearranjos gênicos são responsáveis pelas variantes de antígenos por eles codificados, conforme ilustrado na imagem acima.

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TESTE DE ANTIGLOBULINA DIRETA ( COOMBS DIRETO)

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TESTE DE ANTIGLOBULINA DIRETA ( COOMBS DIRETO)

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Video: https://youtu.be/MrLMkQ4wong?si=EgkLnsWGGY1MZCmE

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TESTE DE ANTIGLOBULINA INDIRETA (COOMBS INDIRETO)

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TESTE DE ANTIGLOBULINA INDIRETA (COOMBS INDIRETO)

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Vídeo: https://youtu.be/E-Koy1GV0Z0?si=y7ozHjY6KQijRwvO

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LIVE GSH TEMA Doença Hemolítica Perinatal (DHPN)

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O teste de Coombs direto é utilizado para determinar se há anticorpo (IgG) ou complemento (C3) presentes nas membranas das hemácias.
Amostra de hemácias são incubadas com anticorpos anti-IgG humana e C3 (soro de coombs poli específico). Se houver a presença de IgG ou o C3 ligados às membranas das hemácias, ocorre aglutinação, ou seja, um resultado positivo.
Resultado falso positivo pode ocorrer e nem sempre equivale à hemólise. Por isso, a clínica deve ser considerada, para que haja correlação entre os sinais e sintomas clínicos e os achados laboratoriais.

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O teste de Coombs indireto ou Pesquisa de anticorpos irregulares serve para detectar anticorpos IgG antieritrócitos.
Nesse teste, o plasma/soro ou Eluato do paciente é incubado com hemácias comerciais. Uma primeira leitura é realizada a temperatura ambiente. Incuba-se a 37 graus celsius. Posteriormente é adicionado um anticorpo contra IgG humana ou anti-IgG humana, na presença de um potencializador, como por exemplo, o PEG (em placa, o potencializador já vem acoplado as hemácias do kit teste).
Se ocorrer aglutinação, anticorpos IgG (anticorpos ou aloanticorpos) contra eritrócitos estão presentes. Em testes negativos, o resultado deve ser conformado utilizando controle de coombs (nessa fase deve ser observada a aglutinação, confirmando a negatividade do teste. Caso não ocorra, deve se repetir a técnica, pois a mesma foi inválida)

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Revisão da literatura do Teste de imunoglobulina humana realizado em 2015 por VIZZON, Alexandre Gomes; SILVA, Flavia Regina Medeiros da.

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Eritroblastose Fetal- Doença Hemolítica Perinatal -DHPN

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Eritroblastose Fetal - Doença Hemolitica Perinatal - DHPN

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Eritroblastose Fetal - Doença Hemolitica Perinatal - DHPN

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A doença hemolítica perinatal consiste em uma destruição por hemólise dos eritrócitos fetais , ocasionada por anticorpos da classe IGG, na grande maioria Anti D, provenientes de uma aloimunização previa da mãe, que se manifesta quando mãe e bebê possuem sangue incompatíveis. Nesses casos, se faz necessária a adoção de uma série de medidas para evitar complicações que vão desde a anemia até o aborto. Isso acontece depois do primeiro contato da mãe com um sangue de Rh positivo. Esse contato pode ter acontecido somente na gravidez, ou ter ocorrido anteriormente, onde houve a sensilibilização da mãe. O diagnóstico toma por base exames de sangue da mãe e em algumas vezes do pai. tem como prevenção a administração de imunoglobulina à mãe durante a gestação para ajudar a prevenir essa doença no recém-nascido. Utiliza-se como tratamento, transfusões de sangue para o feto antes do parto e para o recém-nascido após o parto caso sejam necessárias. Clinicamente, pode apresentar-se como anemia hemolítica leve, hiperbilirrubinemia, hepatomegalia, ou manifestar-se como anemia grave com hidropsia fetal( acúmulo anormal de líquido em dois ou mais compartimentos fetais, danos cerebrais (o kernicterus) e morte fetal.

O processo hemolítico pode iniciar na 16ª semana de gestação . Esta anemia gradativa leva com o que o organismo faça várias tentativas de compensar a destruição das hemácias, liberando assim os eritoblastos (hemácias imaturas) para a circulação periférica e a um processo de hematopoese extramedular.

Devido a continuidade do quadro de anemia é comum o aparecimento da hidropisia (causado pela hipoproteinemia), que  é  o edema generalizado  do feto.

O tratamento do feto consiste em transfusões sanguíneas intraútero e no recém-nascido a exsanguineotransfusão. Como prevenção à aloimunização dessa mãe, é possível a administração de uma imunoglobulina humana anti-Rh (D),aproximadamente na 28ª semana de gestação e novamente 72 horas após o parto.

Referências: INÁCIO, J.; GATTI, L. Doença hemolítica perinatal: Um levantamento dos aspectos imunológicos. In: CONGRESSO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA. 2008.

Artigo:https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/8313/2/69594.pdf

Artigo : Doença Hemolítica Perinatal: como identificar e prevenir enfermidade que pode prejudicar a gravidez

Produção de anticorpos da mãe que tem sangue Rh negativo e bebê Rh positivo é um risco ao feto
Disponível em : GOV.BR

https://www.gov.br . Atualizado em 12/01/2023.

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Eritroblastose Fetal- Doença Hemolítica Perinatal -DHPN

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Caracterizada pela redução da sobrevida de hemácias fetais, a DHPN é decorrente de um quadro de hemólise imune desencadeado pela ligação de anticorpos de procedência materna com antígenos fetais herdados do pai.

A forma mais grave da DHPN é decorrente da aloimunização RhD, ou seja, mãe RhD negativa com filhos RhD positivos. A DHPN pelo sistema ABO é praticamente limitada às mães do grupo sanguíneo O, com filhos do grupo A ou B, e que possuem predomínio de anticorpos anti-A e anti-B da classe IgG.

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POTENCIALIZADORES DE AGLUTINAÇÃO - ENZIMAS PROTEOLÍTICAS 

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POTENCIALIZADORES DE AGLUTINAÇÃO - ENZIMAS PROTEOLÍTICAS 

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A imunoglobulina anti-RhD é uma alternativa para evitar a aloimunização materna.

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Doença Hemolítica Perinatal (DHPN) (fiocruz.br)

Na bula da imunoglobulina anti-D segue as seguintes indicações:

1. INDICAÇÕES

Prevenção da isoimunização ao RhD em mulheres RhD-negativo.

Profilaxia pré-natal:

-Gravidez/Profilaxia pré-natal na gestação de uma criança RhD-positivo;

-Abortamento/ameaça de abortamento, gravidez ectópica ou mola hidatiforme;

-Hemorragia transplacentária resultante de hemorragia antes do parto, amniocentese, biópsia coriônica, procedimentos de manipulação obstétrica, por exemplo, versão externa ou trauma abdominal. Profilaxia pós-parto:

-Parto de uma criança RhD-positivo (D, Dfraco, Dparcial). É considerado que a gravidez tem incompatibilidade RhD quando o feto/bebe é RhD-positivo ou RhD desconhecido ou se o pai é RhD-positivo ou RhD-desconhecido. Tratamento de pessoas RhD-negativo após transfusões incompatíveis de sangue RhD-positivo ou outros produtos contendo células vermelhas do sangue.

TEXTO DE BULA (cslbehring.com)

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Segundo a Portaria de consolidação numero 5 de 2017 em reações positivas com o soro-controle RhD, decorrente da presença eventual de anticorpos aderidos às hemácias ou proteínas séricas anormais, a tipagem RhD é considerada inválida. Em anexo segue tabela da Biorad sobre como resolver discrepâncias na tipagem RhD.

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A eluição é um processo de recuperação de anticorpos ligados aos eritrócitos através da quebra das forças de ligação entre antígenos e anticorpos. O eluído ou eluato, obtido a partir das células sensibilizadas “in vivo” ou “in vitro”, pode ser utilizado para vários fins, sendo o mais comum a identificação de anticorpos que revestem glóbulos vermelhos em pacientes com Teste de Antiglobulina Direta (TAD) Positivo. Sandra Mota

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Gamma EGA Kit_IFU_3023ptbr-5 (fresenius-kabi.com)

Manual prático de imuno-hematologia MARIA SOUSA E SANDRA MOTA Escola Superior de Saúde – P. Porto 2020

Manual Prático de Imunohematologia (ipp.pt)