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Tinción de Gram🔬 | Enseñanza de química, Microbiología, Enfermería farmacología

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21-ago-2018 - Jhan Carlos descrubrió este Pin. Descubre (y guarda) tus propios Pines en Pinterest.

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Repaso de Tinción de Gram:

Las bacterias se tiñen por ósmosis, al añadir Violeta cristal, tanto gram negativas y positivas.

Luego se añade Yodo Lugol, este actúa como mordiente, es decir, fijador y forma el complejo, peptidoglicano – Lugol, haciendo que el peptidoglicano sea más fuerte.

Luego se añade el alcohol acetona, por 3-5 segundos, las Gram positivos se mantienen morados por su peptidoglicano, y el alcohol degrada los lípidos, y en las Gram – se destiñe el Violeta cristal.

Para Observar se debe Observar en 100+ aceite de inmersión, con el condensador elevado.

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Secreciones de heridas, úlceras, , abscecos y tejidos.

Procesamiento de las muestras

Diagrama para procesamiento de muestras

Jerarquización de las muestras

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LIMPIEZA, DESINFECCIÓN Y TOMA DE MUESTRAS DE LAS INFECCIONES DE LA PIEL 

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LIMPIEZA, DESINFECCIÓN Y TOMA DE MUESTRAS DE LAS INFECCIONES DE LA PIEL 

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Lo primordial es la limpieza y desinfección del área

clorhexidina al 2% o etanol al 70%

providona iodada al 10%

etanol

toma de muestra

en caso de abscesos cerrados: aspiración con jeringa

en heridas abiertas: con una torunda y muestrear un área de aproximadamente 1 cm2 del tejido celular subcutaneo y si es en heridas secas se impregna con solución salina.

en el caso de tejidos: con un sacabocados y también punción o aspiración

quemaduras: realizar 2 incisiones paralelas de unos 1-2cm de longitud, es importante recoger 2 muestras de diferentes zonas de la herida.

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Potenciales patógenos que se encuentran

Streptococcus B hemolíticos

Stahphylococcus Aureus

Enterococcus spp.

Pseudomona Aeruginosa

Enterobacterias

Los que son parte de la microbiota de la piel

Corynobacterium spp

Stphylococcus Coagulasa negativo

Mirococcus spp.

Neisseria spp. no Gonorrhoeae

Streptococcus a hemolítico

Patogenos anaerobios subcutaneos

Bacteroides

Propionibacterium spp.

Peptostreptococcus spp.

Tipos de infecciones de la piel

Máculas

Pústulas

Celulitis

Hericida abierta

Angioderma

Infecciones eritematosas superficiales

Erisipelas (erysipeloides rhusiopathiae)

Celulitis (sthaphylococcus grupo A)

Impétigo (sthaphy. Aureus y Enterococcus del grupo A)

Mionecrosis

Causadas por clostridium spp.

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¿que examenes se le puede realizar a un líquido croporal?

citológicos

bioquímicos

microbiológicos

tipos de análisis de líquidos y su matriz de trabajo

en muestra total: se hacen análisis citológicos y contra muestra de estudios genétcios

en sobrenadante: se le hacen los análisis químicos y pruebas inmunológicas

sedimento: coloraciones y preparaciones microbiológicas, cultivos bacterias aerobios y anaerobios, micobacterias y hongos.

dato importante: en toma de muestra de cualquier líquido corporal es importante tomar más de un tubo con cantidad mínima de 3cm3

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LABORATORIO, SET, HEMOCULTIVO, COLONIA DE CANDIDAS PURAS, TINCIÓN KOH, GRAM Y FRESCO 

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LABORATORIO, SET, HEMOCULTIVO, COLONIA DE CANDIDAS PURAS, TINCIÓN KOH, GRAM Y FRESCO 

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en este vídeo todas realizabamos diferentes cosas, marla y mi persona, nos correspondio realizar el gram a el hemocultivo

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GRAM DEL LAB DE SET,HEMOCULTIVO,COLONIA DE CANDIDA PURA

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GRAM DEL LAB DE SET,HEMOCULTIVO,COLONIA DE CANDIDA PURA

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Que es LCR: se elabora a partir del tejido que reviste los ventrículos (espacios huecos) en el cerebro. Fluye dentro del cerebro y la médula espinal y alrededor de estos para ayudar a amortiguarlos en caso de una lesión y para proporcionar nutrientes

en exámen físico y citológio:

color: incoloro, Xantocrómico

aspecto: límpido, lig turbio, turbio, sangunolento, coagulado

recuento celular: se realiza en cámara de neubauer

recuento diferencial: se hace un frotis, se tiñe con wright y se hace recuento de 100 células

exámen químico: determinación de glucosa y proteínas

también se le hace coloración de gram, tinta china

en cultivos: se realiza en cultivo de Agar sangre, MackConckey, Agar chocolate.

HEMOCULTIVO

El hemocultivo de anaerobios es un procedimiento microbiológico que se realiza para detectar la presencia de bacterias anaerobias en la sangre. Las bacterias anaerobias son organismos que pueden crecer en ausencia de oxígeno. Este tipo de hemocultivo es importante porque algunas infecciones causadas por bacterias anaerobias pueden ser graves y requerir un tratamiento específico.

Procedimiento de muestra:

1. Obtención de la muestra: Se toma una muestra de sangre del paciente utilizando técnicas asépticas. Generalmente, se extrae la sangre mediante venopunción, y se utiliza un par de frascos de hemocultivo para maximizar la detección de bacterias.

2. Inoculación del medio de cultivo: La muestra de sangre se inocula en un medio de cultivo especial para anaerobios. Este medio se caracteriza por tener condiciones de cultivo que favorecen el crecimiento de bacterias anaerobias, como la ausencia de oxígeno y la presencia de nutrientes específicos.

Tinción Gram: La tinción Gram es una técnica de laboratorio utilizada para clasificar bacterias en función de las características de su pared celular. Las bacterias pueden ser Gram-positivas (retienen el color violeta) o Gram-negativas (se tiñen de color rojo).

Para realizar la tinción Gram en el contexto del hemocultivo de anaerobios, se podrían seguir los siguientes pasos:

1. Se realiza un extendido de la muestra en un portaobjetos.

2. Se fija la muestra con calor suave.

3. Se aplica cristal violeta para teñir todas las bacterias.

4. Se lava el exceso de cristal violeta y se aplica yodo, formando un complejo con el cristal violeta.

5. Se lava nuevamente y se aplica alcohol o acetona para descolorar.

6. Se vuelve a lavar y se aplica safranina para teñir las bacterias restantes.

Patógenos que se pueden encontrar: En los hemocultivos de anaerobios, se pueden encontrar diversos patógenos, siendo algunos de los más comunes:

1. Bacteroides spp.: Incluye diversas especies de bacterias anaerobias Gram-negativas, que pueden causar infecciones en distintas partes del cuerpo.

2. Clostridium spp.: Otra familia de bacterias anaerobias Gram-positivas, algunas de las cuales pueden producir toxinas que causan enfermedades graves.

3. Peptococos y Peptostreptococos: Estos son microorganismos anaerobios Gram-positivos que pueden causar infecciones en diferentes sitios del cuerpo.

4. Fusobacterium spp.: Bacterias anaerobias Gram-negativas que están asociadas con infecciones de la cavidad oral y otras áreas.

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se realizan exámenes: físicos, químicos y microbiolígicos

interpretación: amarillo pajizo= normal

amarillo: presencia de bilirrubina

verde: contaminación con meconio

castaño: hemólisis severa

rojizo: presencia de eritrocitos

Aspecto:

turbio: normal

transparente: puede ser orina

exámen químico

calcio, cloruro, CO2, creatinina, glucosa, pH, K, Na, proteínas, albumina, urea, ácido úrico.

infecciones en líquido amniotico

vías de entrada

hemtógenas

ruptura de membrana

en el proceso de amniocentesis

o trabajo de parto prolongado

microorganismos usuales

treponema pallidum

listeria monocytogenes

micobacterium tuberculosis

toxoplasma gondii

virus herpes o rubéola o VIH

citomegalovirus.

coloracíon y cultivo

se le realiza tincón gram

se trabaja mas que todo el sedimento líquido

conteo de bacterias y células inmunologicas por crueces

cultivo: agar sangre, agar chocolate, agar MacConkey y caldo nutritivo o tioglicolato

incubación de 72 horas a 35 C°

si hay sospecha de hongos enn agar saboraud

sospecha de micobacterium: agar de lowestein-jensen o caldo middlebrook 7H9 o caldo ogawa

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líquido pleural:

acumulacion de liquidos en organos cercanos

asociados: a neoplasias, infecciones, embolia pulmonar, infarto, pancreatitis, artritis reumatoide, lupus eritematoso.

agentes etiologicos frecuentes

S. pheumoniae

S. aureus

enterobacterias

h. influenzae

p. aeruginosa

anaerobios

m. tuberculosis

líquido pericardico

proceso es la pericardocentesis

se le realiza exámen físico, no se debe realizar exámen químico ni celular porque no están muy definidos los parametros

agentes etiologicos:

virus: coxasackie A y B, influenza, adenovirus

hongos: Aspergillus, Candida sp

bacterias: S. viridans, M. tuberculosis, S. aureus, S. pneuoniae, enterobacterias

parasitos: entamoeba hystolitica, toxoplasma gondii

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informe de laboratorio de gram, set, hemocultivo, colonia de candida pura 

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informe de laboratorio de gram, set, hemocultivo, colonia de candida pura 

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La fosfomicina es un antibiótico de amplio espectro que se utiliza para tratar infecciones bacterianas. Su mecanismo de acción impide la formación de la pared celular bacteriana, lo que resulta en la inhibición del crecimiento y la reproducción de las bacterias. Este medicamento se ha utilizado comúnmente para tratar infecciones del tracto urinario, así como otras infecciones causadas por bacterias sensibles a la fosfomicina. La fosfomicina se administra principalmente por vía oral y ha demostrado ser efectiva contra una variedad de patógenos, incluyendo algunas cepas resistentes a otros antibióticos. Es importante seguir las indicaciones médicas precisas al utilizar este medicamento para garantizar su eficacia y minimizar el riesgo de resistencia bacteriana.

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HISTORIA NATURAL DE BORNAVIRUS Y PAPILOMAVIRUS 

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HISTORIA NATURAL DE BORNAVIRUS Y PAPILOMAVIRUS 

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líquido sinovial

procedimiento: artroscentesis

contiene: glucosa, proteínas, electrolitos, ácido hialurónico

función: nutrir y lubricar

características físicas:

incoloro

transparente

recuento de células: 100 a 200 células

viscosidad: filamentos largos de ácido hialurónico

estudio microbiologico

muestra: tubo seco o jeringa sin heparina

coloración: gram, exudado directo

siembra: aerobios hongos, TBC

reporte de cultivo: negativo a las 72 horas, positivo para (nombre del microorganismo)

sobrenadante: factor reumatoide, anticuerpos, antinucleares, niveles de complemento.

líquido peritoneal

ultrafiltrado de plasma

procedimiento: paracentesis

tipos: exudado y trasudado

características físicas

color amarillo pálido

aspecto: transparente

exámenes químicos:

analitos, proteinas, albúmina, glucosa, triglicéridos, colesterol, amilasa, LDH

peritonitis primaria en niños y adultos

niños: S. pneumoniae, S. grupo A, enterobacterias, Saureus

adultos: enterobacterias, S. pneumoniae, N. gonorrhoeae, M. tuberculosis, Candida sp.

peritonitis secundaria niños y adultos

Enterobacterias(E. coli)

Streptococcus sp.

anaerobios (bacteroides, peptostreptococos, Clostridium)

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medios de cultivo: estimulan el crecimiento de los microorganismos

se clasifican en:

líquidos, sólidos y semisólidos

pueden ser: nutritivos, enriquecidos, selectivos y diferenciales

su origen: sinteticos o naturales

medios líquidos de enriquecimiento

tioglicolato, o caldo nutritivo

medios de transporte

medio de cary blair y medio amies con carbón

Agar sangre: es un agar diferencial y enriquecido

Agar columbia: medio selectivo y diferencial y permite mejor crecimiento a microorganismos como S. pneumoniae, E. faecalis entre otros

Agar chocolate: es una variante de sangre agar, puede presentar variante de antibióticos (medio de thayerin martin)

Agar MacConkey: es un medio selectivo, con sales biliares y cristal violetta y es de diferenciacion para los microorganismos lactosa positivo y negativo

Agar MacConkey sorbitol: recomendado para aislamiento de echerichia coli O157:H7, es como agar MacConkey pero la lacotsa es sustituida por el sorbitol

Agar XLD xilosa, lisina, dexosicolato: para la diferenciacion primarioa de shiguella y salmonella

Agar salmonella/Shigella: selectivo diferencial para el aislamiento de bacilos entéricos patógenos que pertenecen al género salmonella

Agar TCBS (tiosulfato, citrato, sales biliares): favorecen el crecimiento de Vibrio Cholerae

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The Petri dish project, 2012. #microbiology | Microbiology, Petri dishes, Medical laboratory science

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Jun 7, 2013 - The Petri dish project, 2012. #microbiology

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1. Triple Sugar Agar (TSA): Este medio de cultivo diferencia bacterias basándose en su capacidad para fermentar tres azúcares: glucosa, lactosa y sacarosa. Proporciona información sobre la fermentación de carbohidratos y la producción de gases.

2. Lisina Hierro Agar (LIA): Utilizado para identificar bacterias enterobacterianas, el LIA permite evaluar la capacidad de la bacteria para desaminar la lisina y producir sulfuros. Además, muestra la producción de gas y la alcalinización del medio.

3. Movilidad Indol Ornitina (MIO): Este medio triple evalúa la movilidad bacteriana, la producción de indol a partir del triptófano y la desaminación de la ornitina. Se utiliza para distinguir entre géneros de Enterobacteriaceae.

4. Citrato: La prueba de citrato examina la capacidad de una bacteria para utilizar el citrato como única fuente de carbono. Un cambio de color en el medio indica la utilización del citrato, lo que puede ser útil en la identificación bacteriana.

5. Urea: Esta prueba determina si una bacteria puede hidrolizar la urea, produciendo amoníaco. Un cambio de color en el medio indica la capacidad de la bacteria para realizar esta reacción, siendo útil en la identificación de ciertos géneros bacterianos.

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poster de priones

Los priones son agentes infecciosos únicos y atípicos compuestos principalmente por proteínas mal plegadas. A diferencia de los virus, no contienen material genético, pero tienen la capacidad de inducir mal plegamiento en proteínas normales, llevando a la formación de estructuras anómalas. Este proceso conduce a trastornos neurodegenerativos graves, como la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob en humanos y la encefalopatía espongiforme bovina en ganado. La resistencia a métodos convencionales de desinfección y la falta de tratamiento efectivo hacen que los priones sean una preocupación significativa en la salud pública y la agricultura.

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MICOLOGÍA (introducción al estudio de los hongos)

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MICOLOGÍA (introducción al estudio de los hongos)

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La micología es la rama de la biología que se centra en el estudio de los hongos. Estos organismos desempeñan roles cruciales en diversos ecosistemas como descomponedores, simbiontes y patógenos. Algunos hongos tienen aplicaciones beneficiosas en la industria alimentaria, farmacéutica y biotecnológica, mientras que otros pueden causar enfermedades en plantas, animales y humanos. La investigación en micología aborda la diversidad, biología, ecología y aplicaciones de los hongos, contribuyendo al entendimiento de su impacto en la salud humana y el medio ambiente.

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Importancia de las levaduras

Capacidad para realizar la descomposición mediante fermentación de diversos compuestos orgánicos, principalmente los azúcares o hidratos de carbono.

A veces pueden estar unidos entre sí formando cadenas

SACCHAROMYCES CEREVISIAE

La levadura más conocida. Tiene la facultad de crecer en forma anaeróbica realizando la fermentación alcohólica.

LEVADURAS DE IMPORTANCIA

Candida (se puede ver mucho en vías urinarias, tropismo a esa área)

Cryptococcus neoformans (se ve en LCR, tiene tropismo)

Malassezia furfu

Geotrichum

Trichosporon

Rhodotorula spp (Imagen: R. Glutinis)

INFECCIONES POR LEVADURAS

Superficial: Limitada a la capa más externa de la piel y pelo.

Infecciones en mucosas: Oral, vulvovaginal, glande (Candidiasis oral)

Sistémicas:Órganos, cerebro

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de donde quiero recuperar los hongos

especímes clínicos,

secreción vías respiratorias bajas

secrecíon heridad

biopsias

orina

muestras de piel: método de raspado

método de cinta, tinción con azul de lactofenol o azul algodón.

muestras de uñas: utilización de bisturís o pinzas, recuperando la mayor cantidad de material posible de las uñas.

lesiones den la piel o nódulos: toma de muestra drealizada por un médico, se puede utilizar bisturís, cucharillas para ir extrayendo el material del sitio de la lesión.

muestras de fluidos biólogicos

liquidos biologicos: sedimento

tejidos: cortes de tejido

exudado: aspiración directo, hisopado: directo.

técnicas de tinción en micología

tinta china

preparación de KOH

coloración Giemsa

Cultivo: agar glucosado Sabouraud

agar mycosel

agar sangre

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hongos filamentosos , hialinos

distribución mundial

predominan en zonas tropicales

queratinofilicos

asociados al suelo, animales e humanos

infecciones cutáneas

dermatofitos, dermatofitomicosis, tiñas o tiñas,

dermatofitomicosis o epidemoficas llamadas tambien tiñas o tiñas

afecta areas superficiales, piel y sus anexos uñas pelos,

son causadas por hongos parasitos de la queratina llamados dermatofitos, tambien afecta el cuero cabelludo, pie de atleta , producen casos clinicos muy variados, desde sintomas leves hasta lesiones inflamatorias intensas

agentes: microsporum, trichophyton, epidermophyton

MICROSPORUM:

macronidios (abundantes)

paredes rugosas gruesas, fusiforme de tamaño variable multiseptadas (1-15 septos)

micronidios: sésiles, pedicilados o clavados, escasos o ausentes

TRICHOPYTON

macroconidios

microconidios (abundantes)

racimos de uvas

EPIDERMOPHYTON
macronidios ampliamente clavados extremos clavadas extremas redondeadas y no tendran microconidias

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son infecciones por hongos cuya puerta de entrada al cuerpo es: un sitio profundo, mucosas, un organo interno, como el pulmón, tracto gastrointestinal, senos paranasales

se clasifican en

micosis sitemicas por hongos

micosis oportunistas

las micosis sistemicas son producidad por hongos verdaderos

histoplasmosis

blastomicosis norteamericana

paraccocidioidomicosis

coccidioidomicosis

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hongos que causan micosis subcutaneas

fonsecaea pedroso: cromomicosis

phialosphora verrucosa

cladosporium carrionii

exophiala

E. jeanselmei patógeno: es un hongo oportunista.

1. esporotricosis: enfermedad ocupacional para granjeros, cultivadores de rosas, trabajadores de viveros.

agente: Sporothrix schenckii.

1. Eumicetomas:

Agentes Causales: Diversos hongos, como Madurella, Scedosporium, Pseudallescheria, entre otros.

Características: Son infecciones crónicas que afectan principalmente las extremidades, causando la formación de masas granulomatosas. Las eumicetomas suelen resultar de la implantación traumática de esporas fúngicas en la piel.

2. Feohifomicosis:

Agentes Causales: Diversos hongos dematiáceos, como Exophiala, Cladophialophora, y Bipolaris.

Características: Infecciones cutáneas o subcutáneas causadas por hongos pigmentados. Pueden presentar una variedad de manifestaciones clínicas, desde lesiones cutáneas hasta enfermedad sistémica en casos más graves, especialmente en individuos inmunocomprometidos.

3. Hialohifomicosis:

Agentes Causales: Hongos de características hialinas, como Fusarium, Scopulariopsis, y Acremonium.

Características: Infecciones causadas por hongos que presentan hifas hialinas. Estas pueden afectar la piel, las uñas o incluso invadir tejidos más profundos. Las manifestaciones clínicas varían según el agente causal y la inmunidad del huésped.

4. Zigomicosis:

Agentes Causales: Hongos del filo Zygomycota, como Rhizopus, Mucor, y Absidia.

Características: Infecciones invasivas causadas por hongos que suelen afectar a personas inmunocomprometidas. Pueden presentar manifestaciones cutáneas, pulmonares o sistémicas. La enfermedad puede progresar rápidamente y tener consecuencias graves si no se trata adecuadamente.

Cromoblastomicosis:

Agente Causal: Diversos hongos dematiáceos del género Fonsecaea, Cladophialophora, y otros.

Características: Infección crónica de la piel, adquirida principalmente por traumatismos con material vegetal. Se caracteriza por la formación de lesiones verrugosas y nodulares, principalmente en las extremidades.