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1. Homogeneizar por agitação o conteúdo dos tubos das diluições

2. Identificar as placas de Petri de Ágar Padrão para Contagem em Placa

3. Transferir, com auxílio de um micropipetador 0,1 mL (100  µL ) de cada diluição 10-3; 10-4 para a superfície dos meios de cultura da placa, previamente identificada ( duplicatas)

4. Espalhar, o inoculo com a alça de Drigalski fazendo movimentos em três

5. Esperar o meio solidificar

6. Incubar as placas na posição invertida na estufa a  37ºC – 24/48h

7. Fazer a leitura dos resultados contando o número de colônias em cada placa

8.  Determinar a Contagem de Bactérias, em ufc/mL pela fórmula

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Solução Salina 0,9%

Tubos de diluição

Estufa

Micropipetador

Alça de Drigalski

Extrato vegetal seco

Placas de Petri

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3 - Crescimento das colônias somente na superfície do meio

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2 - Espalhamento do inóculo em toda a superfície

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1 - Adição do inóculo em placa contendo meio de cultura

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Consiste em espalhar o material (suspensão de células) com o auxílio de uma alça de Drigalski (para obtenção de colônias isoladas após diluição), fazendo a semeadura por toda a superfície da placa de Petri.

Deve-se ter o cuidado de garantir que toda a superfície da placa seja semeada, evitando regiões sem semeadura.

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TÉCNICA DE ESPALHAMENTO EM PLACA (SPREAD PLATE)

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TÉCNICA DE ESPALHAMENTO EM PLACA (SPREAD PLATE)