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Biotecnologia III - Teste de DNA e DNA Fingerprint

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Como é feito um TESTE DE DNA? #Boravê no laboratório DE VERDADE!

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O resultado do exame de DNA realizado na cidade de Uberlândia confirmou que a recém-nascida Isadora Cristina, que foi brutalmente arrancada da barriga da mãe, na cidade de João Pinheiro, deverá permanecer sob a guarda do pai Edmar Cardoso. A confirmação da paternidade foi confirmada nesta quarta-feira (31/10), na cidade de Uberlândia.

Segundo informações do tio da garotinha, Cristiano Ribeiro, 31 anos, a garota já estava temporariamente com o pai, até que fosse feito o exame a pedido da justiça. Ele conta que a confirmação foi a que todos da família e amigos já aguardavam. Isadora é realmente filha do marido de Mara Cristina Ribeiro da Silva. Cristino em conversa com o Portal de Notícias Patos 1, disse que pessoas mal intencionadas tentaram denegrir a imagem de sua irmã, mas que o exame serviu para comprovar o respeito que Mara tinha pelo marido.

A outra filha da Mara e Edmar, que tem um ano de idade também está com o pai, contou Cristiano. Ele ressaltou que sua irmã havia se separado do pai das crianças e estava morando com a suspeita de tê-la matado, mas que Maria tinha deixado o marido poucos dias antes do homicídio. "A gente tinha alertado ela várias vezes. Sabíamos que essa mulher tinha vários crimes, mas a minha irmã não acreditava e achava que elas eram amigas", relatou o irmão.

No dia 25 de outubro o inquérito sobre a morte de Mara foi encerrado. De acordo com a assessoria de imprensa da Polícia Civil a suspeita Angelina Ferreira Rodrigues, de 40 anos, foi indiciada pelos crimes de dar parto alheio como próprio, subtração de incapaz e homicídio qualificado pelo motivo fútil, meio cruel, à traição e mediante emboscada e ocultação de outro crime.

Somados, os crimes podem chegar a até 38 anos de prisão, porém, pelas leis brasileiras, o máximo que um condenado fica preso é 30 anos.

Fonte e foto: Wanderley Gontijo

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Exame de DNA confirma paternidade e recém-nascida Isadora Cristina continua com o pai

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O resultado do exame de DNA realizado na cidade de Uberlândia confirmou que a recém-nascida Isadora Cristina, que foi brutalmente arrancada da barriga da mãe, na cidade de João Pinheiro, deverá permanecer sob a guarda do pai Edmar Cardoso. A confirmação da paternidade foi confirmada nesta quarta-feira (31/10), na cidade de Uberlândia.

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https://youtu.be/uT0AgjHmrtk

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BioNuclear - Laboratório de Exames - Sexagem Fetal, Paternidade, DNA, Laboratório, Mineralograma, Exame, Sangue, Gravidez - Ribeirão Preto - SP

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O que é o teste de DNA?

O teste de DNA é basicamente é a leitura dos genes de uma pessoa. Saber qual é a sua estrutura, em quais cromossomos estão localizados, se estão modificados ou danificados.

Esse exame também recebe o nome de mapeamento genético

Como é feito o teste de DNA

É necessário coletar amostras de algum fluido corporal que pode ser o sangue, saliva, unhas, fios de cabelo ou esperma.

Usando sofisticadas técnicas de laboratório, o DNA das amostras é isolado e então é procedido o mapeamento, que é feito por equipamentos chamados "Sequenciadores de DNA".

Os primeiros sequenciadores levavam meses para fazer o mapeamento genético e o custo era de milhares de dólares. Mas as coisas estão mudando nessa área. O mais novo sequenciador de DNA do momento, o NGS (sigla para Next Generation Sequencing), é capaz de mapear o genoma humano de dezenas de pessoas de uma só vez, com um resultado absolutamente preciso. O prazo de entrega do resultado cada vez é menor: certas leituras de DNA pela tecnologia NGS podem ser realizadas em menos de 24 horas.

Nos testes de paternidade, o exame é realizado com amostras de DNA da criança, da mãe e do suposto pai. É possível também fazer o teste de paternidade na mulher ainda grávida de duas formas: testes não invasivos e testes invasivos.

Já o teste invasivo consegue pegar mais detalhes sobre o bebê, verificando doenças hereditárias e genéticas que ele pode ter.

Quanto tempo demora para sair o resultado?

Tudo depende do que está sendo analisado no teste de DNA. Sequenciamentos de todo o DNA, como os feitos nos testes de paternidade, podem demorar até 2 semanas. Já exames que procuram mudanças específicas no DNA podem demorar até menos de 24 horas.

Cuidados antes do teste de DNA

Não é necessário preparo especial antes da coleta das amostras para o exame de DNA. No caso de mulheres gestante, é preciso que seja uma gravidez de pelo menos 10 semanas (no caso do teste não invasivo) para que o resultado seja exato.

O material coletado deve ser acondicionado em um kit apropriado que o laboratório oferece para esse fim. A amostra deve ser conservada em temperatura ambiente e enviada ao laboratório com uma ficha preenchida com os dados da paciente e respectivo termo de consentimento informado.

Fatores que alteram o resultado do teste de DNA

Como o DNA de uma pessoa é único, ele não consegue ser alterado por drogas, álcool, medicamentos, alimentos, idade ou estilo de vida, nem mesmo por procedimentos cirúrgicos. No entanto, caso o paciente já tenha feito transfusão de sangue, isso deve ser avisado ao laboratório.

Possíveis resultados do teste de DNA

Normalmente o laudo de um exame de DNA trará quais os genes e cromossomos foram estudados e a análise do geneticista sobre eles. Os resultados são apresentados em relatórios simples e claros.

Em exames para definir a paternidade o resultado é sempre comparativo. Metade do DNA do bebê vem da mãe e a outra metade do pai biológico. Depois de especificar os DNAs do pai e da mãe, faz-se a comparação com o DNA do bebê.

É preciso primeiramente tentar excluir a paternidade com as informações obtidas no laboratório, após a caracterização de várias regiões do DNA. Quando quatro ou mais discrepâncias são verificadas, a hipótese de paternidade é excluída por ser impossível.

No entanto, se não há a exclusão da paternidade, aí então começam os cálculos para pesquisar a inclusão ? o resultado positivo de paternidade.

O teste de DNA para paternidade pode dar um resultado falso-positivo ou falso-negativo?

Os testes de paternidade podem ter resultados falsos - tanto positivos, quanto negativos.

Os falso-negativos podem ocorrer devido à troca de amostras, ou negligência na operacionalização do exame, gerando interpretação duvidosa. Outra razão para um falso-negativo pode ser a ocorrência de mutações genéticas, mas este é um fato muito raro que não passa despercebido por um perito experiente, que usará mais marcadores genéticos até que o resultado - positivo ou negativo - seja inequívoco: acima de 99,999%.

Já os resultados falso-positivos são muito mais raros, mas podem ocorrer devido interpretação mal-feita pelo perito, uso de técnica inadequada ou pelo baixo número de marcadores genéticos utilizados.

Um bom laboratório de genética utiliza mais de 15 marcadores para garantir o nível de certeza de 99,999%.

Qual médico eu preciso procurar para solicitar um exame de DNA?

Resposta: Para realizar um exame de paternidade, não é necessário passar por uma consulta médica. Basta procurar por um laboratório de sua confiança e agendar o exame. Caso tenha mais dúvidas sobre genética e hereditariedade, um médico geneticista é o mais indicado.

É possível fazer teste de DNA ainda na gravidez? Como ele é realizado?

Resposta: Sim, é possível realizar o exame de paternidade antes mesmo do nascimento do bebê. O teste pode ser feito de duas maneira, a invasiva e a não invasiva. No exame invasivo, há a coleta de líquido amniótico ou do vilo coriônico por um ginecologista, e esse material é analisado pelo laboratório. No exame não-invasivo, coleta-se sangue materno, como em uma coleta de sangue normal. Nesse caso são analisados pequenos fragmentos de DNA do bebê que circulam na corrente sanguínea da mãe.

Quanto costuma custar um teste de DNA?

Resposta:Os testes de DNA costumam variar entre 400 e 1.000 reais. Essa diferença pode se dar pela localidade do laboratório, o número de marcadores genéticos analisados, ou o prazo do exame.

Fios de cabelo servem como material para teste de DNA?

Resposta: Sim, alguns laboratórios conseguem analisar materiais como fios de cabelo e unhas para estabelecer o vínculo biológico entre pessoas.Como o DNA é praticamente o mesmo em todas as células de nosso corpo, o exame pelo bulbo capilar e pelo sangue dará o mesmo resulta.

É preciso ordem médica ou judicial para fazer o teste de DNA?

Resposta: Ao contrário de exames ligados à saúde, não é necessário pedido médico ou judicial para realizar o exame de DNA em laboratórios privados, basta agendar em um laboratório de sua confiança. No entanto, ordens judiciais costumam ser necessárias para realizar os testes custeados pelo governo.

Revisado por: Ciro Martinhago, geneticista, CRM 102030/SP

Ricardo di Lazzaro Filho, geneticista, CRM 168524/SP

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Teste de DNA: entenda como são feitos os exames de paternidade

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O que é o teste de DNA? O teste de DNA é basicamente é a leitura dos genes de uma pessoa. Saber qual é a sua estrutura, em quais cromossomos estão localizados, se estão modificados ou danificados.

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O (ácido desoxirribonucleico) é um dos ácidos nucleicos e pode ser encontrado tanto no interior quanto no exterior das células. Embora o tenha se tornado conhecido apenas nas últimas décadas devido à popularização dos exames para identificação de paternidade duvidosa, ele já era conhecido no meio científico desde o início da década de 1950, quando ficou comprovado que o é o material que constitui os genes. Através do DNA é possível identificar pessoas para esclarecer uma possível participação em um crime e também na realização de testes de paternidade. É importante lembrar que, com exceção dos gêmeos univitelinos, o DNA de cada pessoa é único.

O teste de DNA, chamado de DNA figerprint ou impressão digital genética, fornece um grau de confiabilidade bastante alto, ultrapassando 99,9% de certeza em seu resultado. Devido a isso, esse teste é muito empregado na determinação de paternidade e na resolução de crimes.

Para que haja a identificação de uma pessoa através de seu DNA são utilizadas sondas capazes de detectar sequências do DNA humano. Essas sequências de DNA são chamadas de VNTR (Variable Number of Tandem Repeats - número variável de repetições em sequência) e são compostas por sequências curtas de nucleotídeos que se repetem ao longo de trechos da molécula de DNA. Cada pessoa tem um padrão específico de repetição dessas unidades e esse padrão é herdado de seus pais.

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Quando amostras de DNA são obtidas através de pelos, sangue, pedaços de pele, esperma etc., é possível o isolamento do DNA utilizando enzimas de restrição. Após o uso das enzimas, o DNA fica fragmentado, ou seja, separado em pequenos pedacinhos. Em seguida, esses pequenos pedaços são separados em um processo chamado de eletroforese, que utiliza corrente elétrica. Após o término da eletroforese, um equipamento que utiliza luz ultravioleta e corante específico traduz a imagem do DNA, que então poderá ser estudada pelos pesquisadores.

As faixas observadas são únicas para cada pessoa e por isso ela é chamada de impressão digital de DNA ou impressão digital genética.

Por Paula Louredo
Graduada em Biologia

A eletroforese é a técnica aplicada para a identificação dos fragmentos do DNA

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Testes de DNA. Como são feitos os testes de DNA - Brasil Escola

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O (ácido desoxirribonucleico) é um dos ácidos nucleicos e pode ser encontrado tanto no interior quanto no exterior das células. Embora o tenha se tornado conhecido apenas nas últimas décadas devido à popularização dos exames para identificação de paternidade duvidosa, ele já era conhecido no meio científico desde o início da década de 1950, quando ficou comprovado que o é o material que constitui os genes.

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Dois homens gêmeos idênticos foram condenados no último dia 21 pelo Juiz de Direito Filipe Luis Peruca, do Tribunal de Justiça de Goiás, a assumir simultaneamente a paternidade biológica de uma menina de 8 anos, residente em Cachoeira Alta (GO). O Juiz certamente enfrentou um dilema; é impossível que ambos os condenados sejam pais biológicos da criança, mas também não seria possível dizer qual dos dois é o pai, pois, até quanto se sabia, gêmeos "idênticos" possuem exatamente o mesmo DNA, e, portanto, um teste de DNA não conseguiria afirmar qual dos dois é o pai.

De fato, os dois supostos pais se submeteram a exames de DNA. Como gêmeos univitelinos, no entanto, o resultado do teste de DNA realizado foi inclusivo para ambos. Para o magistrado, um dos dois se beneficiou de semelhança física e genética com o irmão, de má-fé, para evitar responsabilidade com a filha. Este certamente não foi o primeiro caso no Brasil nem no mundo aonde tal situação complexa ocorreu, mas sim um dos poucos que se tornou público.

Em 2007 tornou-se público uma decisão judicial de um caso semelhante ocorrido nos Estados Unidos, envolvendo o Estado de Missouri e Holly Marie Adams vs. Raymon e Richard Miller. Neste caso, o teste de DNA realizado demonstrou que ambos os gêmeos, supostos pais, tinham um índice combinado de paternidade de 814.445, gerando uma probabilidade de paternidade de 99.999% admitindo-se uma probabilidade a priori de paternidade de 50%. As decisões nestes casos acabam sendo baseadas e em evidências não genéticas, com grande chance de que uma injustiça seja feita, com consequências para uma vida toda.

Mas você sabia que a ciência já dispõe de recursos para estabelecer com segurança quem é o verdadeiro pai biológico em casos assim?

Nos últimos cinco anos, o colossal avanço na capacidade de analisar mais profundamente o material genético, tem demonstrado com evidências científicas, que nem sempre gêmeos idênticos tem exatamente o mesmo DNA. E, sim, é possível identificar diferenças entre eles, que podem ser utilizadas na Medicina forense, seja na identificação de qual de dois gêmeos esteve presente na cena de um crime, seja na identificação da paternidade biológica entre gêmeos supostos pais.

O que são gêmeos "idênticos"?

Dois óvulos apresentam material genético diferente entre si, assim como dois espermatozoides. Gêmeos dizigóticos ("não-idênticos") são gerados a partir da fecundação de dois óvulos por dois espermatozoides e, portanto, o zigoto, primeira célula resultante da fecundação, apresentará a mesma similaridade genética daquela entre irmãos não gêmeos, possuindo, em média, 50% de seus genes em comum, e podendo apresentar sexos iguais ou até discordantes, de acordo com a carga genética dos espermatozoides que fecundaram os respectivos óvulos. Nestes casos os gêmeos podem, inclusive, ter pais diferentes, se os óvulos forem fecundados por espermatozoides de homens diferentes.

Mas quatro em cada mil nascimentos são de gêmeos monozigóticos, ou seja, cerca de 8 em cada mil homens serão gêmeos monozigóticos, por fatores ainda pouco conhecidos. Gêmeos monozigóticos ocorrem por uma divisão inesperada do zigoto gerado pela fecundação de um único espermatozoide por um único óvulo, quase sempre antes de nove dias após a fecundação, quando o embrião tem entre 40 e 150 células. Estes gêmeos monozigóticos, tem extrema similaridade de seu patrimônio genético e como são fecundados por um único espermatozoide que carrega ou um cromossomo X ou um Y, são sempre do mesmo sexo. Popularmente são chamados de "gêmeos idênticos", inclusive porquê a aparência física em vida será, via de regra, muito semelhante (mas também não idêntica).

Como podem gêmeos oriundos da fecundação de um único óvulo por um único espermatozoide ter diferenças ao nível do DNA?

Para que uma célula se divida, ela tem que dobrar o seu genoma de 3 bilhões de bases nitrogenadas, para depois dividi-lo ao meio criando duas células-filhas com o DNA exatamente igual ao da célula que as deu origem. A Natureza faz este processo de forma rápida e altamente eficiente, mas pode copiar algumas letras bioquímicas erradas. Ciente disto, o próprio organismo tem uma maquinaria de reparo dos erros genéticos que podem ocorrer na divisão celular. Porém, com uma frequência bastante baixa, mesmo após a correção pela maquinaria de reparo, estes erros genéticos podem se perpetuar nas subsequentes divisões celulares.

Já se sabe a mais de uma década que erros genéticos ocorrem também nas divisões de zigotos provenientes da fecundação de um óvulo por um único espermatozoide, após a separação do embrião em dois zigotos, nas divisões independentes que ocorrerão em cada um deles por toda a vida intra e extrauterina. De especial interesse para o futuro reprodutivo destes recém-gêmeos monozigóticos, destacam-se algumas destas variantes genéticas; aquelas que serão transmitidas para a próxima geração, e que podem ocorrer em uma curta janela de tempo, logo após a separação do zigoto em dois, mas ainda antes de se iniciarem divisões celulares que darão origem a células de tecidos do corpo da pessoa que não serão utilizadas no futuro para formação de óvulos e espermatozoides.

Estas últimas variantes não serão transmitidas aos filhos. Em 98% dos casos as células do embrião já sofreram 7 divisões antes de se separar em dois embriões monozigóticos. A cada divisão, uma oportunidade para geração de novas variantes genéticas. Estas variantes no DNA que surgiram antes do zigoto se dividir em dois, estarão presentes, no futuro, no DNA dos dois gêmeos, e, portanto, não serão úteis para distingui-los futuramente ao nível do DNA. Entretanto, no final da segunda semana de gestação cerca de 15 mil células de cada um dos dois embriões terão sofrido mais 15 divisões independentes.

São algumas destas variantes que podem ocorrer nestas divisões, que estarão, no futuro, presentes nos espermatozoides de um dos gêmeos monozigóticos, mas não do outro. São essas novas variantes, geradas exatamente neste período embriológico, que os modernos testes de genética conseguem captar. Interessante que esta "janela embriológica" aonde estas "mutações discriminantes" podem ocorrer, fazem com que elas possam estar presentes nos futuros espermatozoides dos gêmeos, também nas células da saliva deles, mas muitas vezes já não estão presentes nas células do sangue, aonde tradicionalmente os testes de DNA são feitos.

Identificadas estas "mutações discriminantes" através de testes no esperma, saliva e sangue dos supostos pais gêmeos monozigóticos, e testando-as no sangue do filho(a) e de sua mãe, consegue-se, na maioria das vezes, discernir mesmo entre gêmeos monozigóticos, quem é o Pai e quem é o Tio paterno. A análise do DNA da mãe serve quase como um controle, para comprovar que estas "mutações discriminantes" não foram herdadas da mãe.

Testes tradicionais não conseguem detectar diferenças tão sutis entre o DNA de gêmeos monozigóticos

Os testes de DNA para determinação de paternidade utilizados rotineiramente há quase 30 anos, provocaram uma verdadeira revolução na capacidade de discriminar indivíduos que são, daqueles que não são os pais biológicos de alguém, fazendo com que outras provas circunstanciais fossem colocadas em segundo plano. Importante enfatizar que os Testes de DNA tradicionais são absolutamente seguros e eficientes.

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Uma das pouquíssimas limitações da tecnologia do DNA na determinação da paternidade biológica era justamente nos casos em que supostos pais são gêmeos monozigóticos. Importante ressaltar que mesmo nestes casos, aonde os testes de DNA tradicionais realmente não conseguem encontrar "as diferentes agulhas nos dois palheiros genéticos dos gêmeos", eles conseguem ao menos excluir ambos os gêmeos monozigóticos de serem os pais biológicos (caso realmente não sejam) ou conseguem concluir que um dos dois gêmeos (e mais nenhum outo homem) é o pai biológico (caso realmente um dos dois seja o pai biológico).

Em 2012, o pesquisador alemão Michael Krawczak já havia previsto teoricamente que assim que uma nova geração de tecnologia do DNA estivesse disponível, seria possível resolver inclusive estas disputas de paternidade (ou criminais) entre gêmeos monozigóticos, em mais de 80% das vezes demonstrando ao menos uma única letra bioquímica genética diferente entre eles, e em cerca de 53% das vezes demonstrando diferença de ao menos duas letras bioquímicas genéticas entre eles, sendo a segunda situação ainda mais segura quanto ao resultado do exame do que a primeira.

Aqui cabe ressaltar que como o "teste tradicional de DNA" já assegura previamente que apenas um dos gêmeos monozigóticos (e mais nenhum homem) é o pai biológico da criança, mesmo a detecção de uma única letra bioquímica diferente entre os gêmeos já tem enorme valor discriminatório, diferente dos casos de determinação de paternidade habituais em que se exige ao menos duas ou três diferenças para concluir pela exclusão de paternidade.

Caso o teste de DNA "tradicional" aponte com segurança que que um dos dois gêmeos (e mais nenhum outo homem) é o pai biológico, pode-se dar continuidade ao exame usando técnicas mais modernas de análise do DNA, chamadas de "sequenciamento de última geração com profunda cobertura do genoma", aonde as 3 bilhões de letras bioquímicas de todo o genoma serão determinadas e analisadas, e não apenas 10-20 locais do genoma que são tradicionalmente analisados e suficientes para resolver casos mais simples de identificação biológica.

Além desta análise muito mais ampla, as novas tecnologias de análise do DNA permitem analisar todo o genoma repetindo o sequenciamento por mais de 50-100 vezes na mesma amostra, o que aumenta a eficácia e a confiabilidade da detec��ão de raras "mutações discriminantes". Estes avanços foram elegantemente demonstrados em 2014 por um grupo de pesquisadores alemães liderados por Jacqueline Weber-Lehmann, quando publicaram no periódico científico "Forensic Science International" um relato de caso selecionado pelos próprios autores, de gêmeos monozigóticos, no qual, porem, não havia qualquer dúvida sobre qual deles era o pai biológico da criança. Foi possível detectar 5 novas variantes genéticas discriminatórias, presentes em um dos gêmeos e não no outro, não presentes na mãe da criança e presentes na criança ( https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=finding+and+needle+and+haystack+differentiating+identical+twins), demonstrando a eficácia da nova técnica.

Já há evidência estatística para auxiliar os Peritos e os Juízes nestes casos. O obstáculo não é mais técnico-científico, mas sim financeiro.

Em artigo científico publicado em Dezembro de 2018 na prestigiosa revista científica PLOS Genetics, o geneticista Michael Krawczak e sua equipe desenvolveram análises estatísticas para o cálculo da probabilidade de Paternidade nesta situação em que poucas diferenças ao nível do DNA poderão ser encontradas entre gêmeos monozigóticos. A partir daí os laboratórios equipados com esta tecnologia de ponta já podem oferecer tais análises.

Mas aí chegamos ao obstáculo que talvez seja maior do que o científico, visto que este último acaba de ser ultrapassado; Pela complexidade das análises necessárias, pela tecnologia de última geração a ser utilizada, pela necessidade de que quatro pessoas sejam testadas (mãe, filho (a) e dois supostos pais), e pela importância de realizar os exames não só no sangue, mas também na saliva e espermatozoide dos supostos pais gêmeos, o custo deste tipo de analise no Brasil pode chegar a cem mil Reais, ao passo que um teste em uma situação mais trivial (mãe, filho(a) e um suposto pai) custa em torno de cem vezes menos.

Apesar de que são casos raros, quem vai assumir esta conta? O Estado brasileiro? O Ministério Público? Todas as partes envolvidas? Quem solicitou a prova pericial? O Estado paga o laboratório e depois do resultado cobra do pai biológico? Ou devido ao alto custo do sofisticado exame os casos devem ficar sem solução? Ou deve-se atribuir a paternidade a dois homens, sabendo que um está sendo injustiçado?

A nova geração de técnicas de análise do DNA possibilitou mais uma quebra de paradigma, o de que não é possível diferenciar o DNA entre gêmeos "idênticos". As poucas, mais importantes mutações somáticas pós-zigóticas que surgem logo após a separação do embrião em dois, podem ser agora diferenciadas, inclusive em casos criminais aonde amostras biológicas como gotas de sangue, pele, cabelo, esperma ou saliva são deixadas nas cenas de crime.

Os gêmeos idênticos sempre intrigaram a humanidade, como fonte de superstição e fascinação, desde os bíblicos Jacó e Esaú até os mitológicos fundadores de Roma, Rômulo e Remo. Com o avanço das técnicas de análise de DNA, mesmo entre gêmeos idênticos, a partir de agora Pai é Pai, Tio é Tio!

Quem faz Letra de Médico

Adilson Costa, dermatologista
Adriana Vilarinho, dermatologista
Ana Claudia Arantes, geriatra
Antonio Carlos do Nascimento, endocrinologista
Antônio Frasson, mastologista
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Claudia Cozer Kalil, endocrinologista
Claudio Lottenberg, oftalmologista
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David Uip, infectologista
Edson Borges, especialista em reprodução assistida
Eduardo Rauen, nutrólogo
Fernando Maluf, oncologista
Freddy Eliaschewitz, endocrinologista
Jardis Volpi, dermatologista
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Luiz Rohde, psiquiatra
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Mauro Fisberg, pediatra
Roberto Kalil, cardiologista
Ronaldo Laranjeira, psiquiatra
Salmo Raskin, geneticista
Sergio Podgaec, ginecologista

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Gêmeos "idênticos"? Nem tanto! | Letra de Médico

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Sim, é possível detectar diferenças entre DNA de gêmeos univitelinos

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TESTE DE DNA

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A genética pode parecer um tema árido, mas o fato é que cada vez mais faz parte da medicina. Hoje, os exames de DNA são usados, entre outras várias possibilidades, para identificar o sexo do bebê antes de ele nascer, para detectar eventuais enfermidades e até para identificar particularidades do câncer que o tornam mais ou menos suscetível a determinado tratamento.

Ainda assim, sobram dúvidas sobre quando considerar esses exames. E, mais do que isso, sobre como eles são feitos de fato.

Daí porque a SAÚDE foi até o laboratório Mendelics, em São Paulo, gravar um vídeo sobre o assunto - originalmente transmitido ao vivo no nosso Facebook no final de 2017. Diretor da instituição, o geneticista David Schlesinger faz um passeio pelas instalações do local para mostrar todo o passo a passo do teste, além de resolver diversas dúvidas sobre o assunto. "Antes de tudo, é importante saber se a pessoa de fato vai se beneficiar de um exame genético", antecipa.

Para acompanhar nossas transmissões ao vivo, basta ficar de olho nas nossas redes sociais. Se não for possível, fique tranquilo! Todos os nossos vídeos estão na TV SAÚDE. Clique aqui para ver!

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Como exames de DNA são feitos - e o que eles fazem pela saúde

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A genética pode parecer um tema árido, mas o fato é que cada vez mais faz parte da medicina. Hoje, os exames de DNA são usados, entre outras várias possibilidades, para identificar o sexo do bebê antes de ele nascer, para detectar eventuais enfermidades e até para identificar particularidades do câncer que o tornam mais ou menos suscetível a determinado tratamento.

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O que é o teste de DNA?

O teste de DNA é basicamente é a leitura dos genes de uma pessoa. Saber qual é a sua estrutura, em quais cromossomos estão localizados, se estão modificados ou danificados.

Outros nomes

Esse exame também recebe o nome de mapeamento genético

Como é feito o teste de DNA

É necessário coletar amostras de algum fluido corporal que pode ser o sangue, saliva, unhas, fios de cabelo ou esperma.

Usando sofisticadas técnicas de laboratório, o DNA das amostras é isolado e então é procedido o mapeamento, que é feito por equipamentos chamados "Sequenciadores de DNA".

Os primeiros sequenciadores levavam meses para fazer o mapeamento genético e o custo era de milhares de dólares. Mas as coisas estão mudando nessa área. O mais novo sequenciador de DNA do momento, o NGS (sigla para Next Generation Sequencing), é capaz de mapear o genoma humano de dezenas de pessoas de uma só vez, com um resultado absolutamente preciso. O prazo de entrega do resultado cada vez é menor: certas leituras de DNA pela tecnologia NGS podem ser realizadas em menos de 24 horas.
Testes de paternidade
Nos testes de paternidade, o exame é realizado com amostras de DNA da criança, da mãe e do suposto pai. É possível também fazer o teste de paternidade na mulher ainda grávida de duas formas: testes não invasivos e testes invasivos.

Já o teste invasivo consegue pegar mais detalhes sobre o bebê, verificando doenças hereditárias e genéticas que ele pode ter.

Quanto tempo demora para sair o resultado?

Tudo depende do que está sendo analisado no teste de DNA. Sequenciamentos de todo o DNA, como os feitos nos testes de paternidade, podem demorar até 2 semanas. Já exames que procuram mudanças específicas no DNA podem demorar até menos de 24 horas.

Cuidados antes do teste de DNA

Não é necessário preparo especial antes da coleta das amostras para o exame de DNA. No caso de mulheres gestante, é preciso que seja uma gravidez de pelo menos 10 semanas (no caso do teste não invasivo) para que o resultado seja exato.

O material coletado deve ser acondicionado em um kit apropriado que o laboratório oferece para esse fim. A amostra deve ser conservada em temperatura ambiente e enviada ao laboratório com uma ficha preenchida com os dados da paciente e respectivo termo de consentimento informado.

Fatores que alteram o resultado do teste de DNA

Como o DNA de uma pessoa é único, ele não consegue ser alterado por drogas, álcool, medicamentos, alimentos, idade ou estilo de vida, nem mesmo por procedimentos cirúrgicos. No entanto, caso o paciente já tenha feito transfusão de sangue, isso deve ser avisado ao laboratório.

Possíveis resultados do teste de DNA

Normalmente o laudo de um exame de DNA trará quais os genes e cromossomos foram estudados e a análise do geneticista sobre eles. Os resultados são apresentados em relatórios simples e claros.

Em exames para definir a paternidade o resultado é sempre comparativo. Metade do DNA do bebê vem da mãe e a outra metade do pai biológico. Depois de especificar os DNAs do pai e da mãe, faz-se a comparação com o DNA do bebê.

É preciso primeiramente tentar excluir a paternidade com as informações obtidas no laboratório, após a caracterização de várias regiões do DNA. Quando quatro ou mais discrepâncias são verificadas, a hipótese de paternidade é excluída por ser impossível.

No entanto, se não há a exclusão da paternidade, aí então começam os cálculos para pesquisar a inclusão ? o resultado positivo de paternidade.
O teste de DNA para paternidade pode dar um resultado falso-positivo ou falso-negativo?
Os testes de paternidade podem ter resultados falsos - tanto positivos, quanto negativos.

Os falso-negativos podem ocorrer devido à troca de amostras, ou negligência na operacionalização do exame, gerando interpretação duvidosa. Outra razão para um falso-negativo pode ser a ocorrência de mutações genéticas, mas este é um fato muito raro que não passa despercebido por um perito experiente, que usará mais marcadores genéticos até que o resultado - positivo ou negativo - seja inequívoco: acima de 99,999%.

Já os resultados falso-positivos são muito mais raros, mas podem ocorrer devido interpretação mal-feita pelo perito, uso de técnica inadequada ou pelo baixo número de marcadores genéticos utilizados.

Um bom laboratório de genética utiliza mais de 15 marcadores para garantir o nível de certeza de 99,999%.

Perguntas frequentes
Qual médico eu preciso procurar para solicitar um exame de DNA?
Resposta: Para realizar um exame de paternidade, não é necessário passar por uma consulta médica. Basta procurar por um laboratório de sua confiança e agendar o exame. Caso tenha mais dúvidas sobre genética e hereditariedade, um médico geneticista é o mais indicado.
É possível fazer teste de DNA ainda na gravidez? Como ele é realizado?
Resposta: Sim, é possível realizar o exame de paternidade antes mesmo do nascimento do bebê. O teste pode ser feito de duas maneira, a invasiva e a não invasiva. No exame invasivo, há a coleta de líquido amniótico ou do vilo coriônico por um ginecologista, e esse material é analisado pelo laboratório. No exame não-invasivo, coleta-se sangue materno, como em uma coleta de sangue normal. Nesse caso são analisados pequenos fragmentos de DNA do bebê que circulam na corrente sanguínea da mãe.
Quanto costuma custar um teste de DNA?
Resposta: Os testes de DNA costumam variar entre 400 e 1.000 reais. Essa diferença pode se dar pela localidade do laboratório, o número de marcadores genéticos analisados, ou o prazo do exame.
Fios de cabelo servem como material para teste de DNA?
Resposta: Sim, alguns laboratórios conseguem analisar materiais como fios de cabelo e unhas para estabelecer o vínculo biológico entre pessoas.Como o DNA é praticamente o mesmo em todas as células de nosso corpo, o exame pelo bulbo capilar e pelo sangue dará o mesmo resulta.
É preciso ordem médica ou judicial para fazer o teste de DNA?
Resposta: Ao contrário de exames ligados à saúde, não é necessário pedido médico ou judicial para realizar o exame de DNA em laboratórios privados, basta agendar em um laboratório de sua confiança. No entanto, ordens judiciais costumam ser necessárias para realizar os testes custeados pelo governo.

Referências

Revisado por: Ciro Martinhago, geneticista, CRM 102030/SP

Ricardo di Lazzaro Filho, geneticista, CRM 168524/SP

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Teste de DNA: entenda como são feitos os exames de paternidade

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O teste de DNA é basicamente é a leitura dos genes de uma pessoa. Saber qual é a sua estrutura, em quais cromossomos estão localizados, se estão modificados ou danificados. Esse exame também recebe o nome de mapeamento genético É necessário coletar amostras de algum fluido corporal que pode ser o sangue, saliva, unhas, fios de cabelo ou esperma.

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Assistam os vídeos e leiam as postagens para enriquecer seus conhecimentos.

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Assistam os vídeos e leiam as postagens para enriquecer seus conhecimentos.

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Como é um DNA, mesmo?

O DNA, sigla para Ácido Desoxirribonucleico, é uma molécula que carrega todas as informações genética de um ser vivo. Todo ser vivo tem, no núcleo de cada célula, o DNA.

O DNA é composto por duas longas fitas torcidas em espiral, a dupla hélice.

Essas duas fitas são ligadas por pares de bases nitrogenadas identificadas pelas letras A (adenina), T (timina), C (citosina) e G (guanina).

O DNA do ser humano é formado por 3 bilhões de pares dessas bases.

Dentro do núcleo da célula, esse DNA se organiza de forma compactada em estruturas chamadas de cromossomos.
Nós, humanos, temos 46 cromossomos (recebemos 23 da mãe e 23 do pai).

Todo esse conjunto é chamado de genoma humano.

EXAME DE CARIÓTIPO

Quando, na década de 1950, os cientistas identificaram pela primeira vez os cromossomos, foi possível perceber que o número deles podia mudar de uma pessoa para outra e que isso estava ligado a doenças. É assim, contando cromossomos, que se confirma o diagnóstico da Síndrome de Down, por exemplo - os portadores da Síndrome têm três cromossomos no par 21, em vez de dois.

EXAME DE MLPA

Nesse exame, os médicos buscam em um trecho específico do DNA se há duplicação de genes ou microdeleção, ou seja, se está faltando uma parte do gene, o gene inteiro ou centenas de genes.

A Síndrome de Williams, por exemplo, ocorre por uma microdeleção no braço longo do cromossomo 7, o que leva o portador a ter problemas cardíacos, além de alterações faciais e comportamentais.

MICROARRANJO DE DNA

A técnica é usada quando há a suspeita de que o quadro clínico vem de uma microdeleção ou duplicação, mas não se sabe exatamente onde. Funciona assim:

O DNA do paciente é sobreposto a um DNA modelo e ambos recebem marcadores em toda a sua extensão.

Quando um marcador se liga no DNA modelo e não no do paciente, significa que há um pedaço faltando.

Essa ausência é comparada com bases de dados e com os pais do paciente, para saber se o quadro tem a ver com o caso clínico ou não.

MÉTODO DE SANGER

Nas décadas de 1970 e 1980, os médicos passaram a sequenciar qualquer parte do DNA, ou seja, a identificar os trechos de letras (A, T, C e G).

O teste compara a sequência de letras de um trecho específico da amostra do paciente com um modelo de referência.

SEQUENCIAMENTO DE NOVA GERAÇÃO

Em casos mais complexos, o teste utilizado é o sequenciamento do exoma, ou seja, do conjunto dos nossos genes (os cerca de 20 mil trechos do DNA que dão instruções para o organismo sintetizar proteínas e executar suas funções).

O DNA do paciente é extraído dos linfócitos.

É preciso colher cerca de 9 ml de sangue.

Essa reconstituição é feita a partir de vários núcleos, da mesma maneira que um sistema de torrent reconstrói um arquivo digital a partir de vários outros arquivos iguais.

O DNA do paciente é comparado com um genoma-padrão.
As variantes encontradas são comparadas com os bancos de dados disponíveis, literatura médica, hipóteses diagnósticas e o quadro clínico.

Para realizar qualquer teste genético molecular, o cliente assina um formulário de consentimento.
O Fleury oferece um serviço de aconselhamento pré-teste para esclarecer o método usado e as possibilidades de resultado.
Pegar o cabelo de uma pessoa para fazer o teste de paternidade? Só em novela.
O exame de paternidade pode ser usado para identificar pais e mães, vivos ou falecidos, e também irmãos. É necessário que os envolvidos estejam presentes e todos atestem a origem das amostras. É a chamada cadeia de custódia. Além disso, testemunhas também assinam uma documentação.

A amostra pode ser obtida com uma pequena quantidade de sangue em um papel filtro.

Infográfico: Everton Augusto, Fábio Gomide , Luiz Felipe Monteiro, Maíra Termero, Ricardo Gonçalves e Sergio Scattolini Amatucci.

Fontes: Dr. Wagner A. R. Baratela, coordenador de Genética Médica do Fleury e Dr. Ismael Dale, médico assessor sênior na Biologia Molecular do Fleury.

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Como funciona o exame de DNA | Revista Fleury Ed. 33 › Notícias | Fleury Medicina e Saúde

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Como é um DNA, mesmo? O DNA, sigla para Ácido Desoxirribonucleico, é uma molécula que carrega todas as informações genética de um ser vivo. Todo ser vivo tem, no núcleo de cada célula, o DNA. O DNA é composto por duas longas fitas torcidas em espiral, a dupla hélice.

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O (ácido desoxirribonucleico) é um dos ácidos nucleicos e pode ser encontrado tanto no interior quanto no exterior das células. Embora o tenha se tornado conhecido apenas nas últimas décadas devido à popularização dos exames para identificação de paternidade duvidosa, ele já era conhecido no meio científico desde o início da década de 1950, quando ficou comprovado que o é o material que constitui os genes. Através do DNA é possível identificar pessoas para esclarecer uma possível participação em um crime e também na realização de testes de paternidade. É importante lembrar que, com exceção dos gêmeos univitelinos, o DNA de cada pessoa é único.

O teste de DNA, chamado de DNA figerprint ou impressão digital genética, fornece um grau de confiabilidade bastante alto, ultrapassando 99,9% de certeza em seu resultado. Devido a isso, esse teste é muito empregado na determinação de paternidade e na resolução de crimes.

Para que haja a identificação de uma pessoa através de seu DNA são utilizadas sondas capazes de detectar sequências do DNA humano. Essas sequências de DNA são chamadas de VNTR (Variable Number of Tandem Repeats - número variável de repetições em sequência) e são compostas por sequências curtas de nucleotídeos que se repetem ao longo de trechos da molécula de DNA. Cada pessoa tem um padrão específico de repetição dessas unidades e esse padrão é herdado de seus pais.

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Quando amostras de DNA são obtidas através de pelos, sangue, pedaços de pele, esperma etc., é possível o isolamento do DNA utilizando enzimas de restrição. Após o uso das enzimas, o DNA fica fragmentado, ou seja, separado em pequenos pedacinhos. Em seguida, esses pequenos pedaços são separados em um processo chamado de eletroforese, que utiliza corrente elétrica. Após o término da eletroforese, um equipamento que utiliza luz ultravioleta e corante específico traduz a imagem do DNA, que então poderá ser estudada pelos pesquisadores.

As faixas observadas são únicas para cada pessoa e por isso ela é chamada de impressão digital de DNA ou impressão digital genética.

Por Paula Louredo
Graduada em Biologia

A eletroforese é a técnica aplicada para a identificação dos fragmentos do DNA

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Testes de DNA. Como são feitos os testes de DNA - Brasil Escola

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O (ácido desoxirribonucleico) é um dos ácidos nucleicos e pode ser encontrado tanto no interior quanto no exterior das células. Embora o tenha se tornado conhecido apenas nas últimas décadas devido à popularização dos exames para identificação de paternidade duvidosa, ele já era conhecido no meio científico desde o início da década de 1950, quando ficou comprovado que o é o material que constitui os genes.

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Júlia lima martins

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BioNuclear - Laboratório de Exames - Sexagem Fetal, Paternidade, DNA, Laboratório, Mineralograma, Exame, Sangue, Gravidez - Ribeirão Preto - SP

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O teste de DNA é feito com o objetivo de analisar o material genético da pessoa, identificando possíveis alterações no DNA e verificando a probabilidade do desenvolvimento de algumas doenças. Além disso, o teste de DNA utilizado nos testes de paternidade, podendo ser feito com qualquer material biológico, como saliva, fios de cabelo ou saliva.

O preço do exame varia de acordo com o laboratório em que é realizado, objetivo e marcadores genéticos avaliados e o resultado pode ser liberado em 24 horas, quando o objetivo é avaliar o genoma total da pessoa, ou algumas semanas quando o teste é feito para verificar o grau de parentesco.

O exame de DNA pode identificar possíveis alterações no DNA da pessoa, podendo indicar a probabilidade do desenvolvimento de doenças e a chance de ser transmitida para as futuras gerações, além de ser útil para saber suas origens e seus ancestrais. Assim, algumas doenças que o teste de DNA pode identificar são:

- Vários tipos de câncer;

- Diabetes tipo 1 e tipo 2;

- Síndrome das pernas inquietas;

- Intolerância à lactose;

Além de ser utilizado na investigação de doenças, o exame de DNA também pode ser utilizado no aconselhamento genético, que é um processo de quem como objetivo identificar alterações no DNA que possam ser transmitidas para a futura geração e a probabilidade dessas alterações resultarem em doença. Entenda o que é e como é feito o aconselhamento genético.

Exame de DNA para teste de paternidade

O exame de DNA também pode ser realizado para verificar o grau de parentesco entre pai e filho. Para realizar esse teste, é preciso que seja coletada uma amostra biológica da mãe, do filho e do suposto pai, que é enviada para o laboratório para que seja feita a análise.

Apesar do exame ser mais frequentemente realizado após o nascimento, também pode ser feito ainda durante a gestação. Veja como é feito o teste de paternidade.

O teste de DNA pode ser feito a partir de qualquer amostra biológica, como sangue, fios de cabelo, esperma ou saliva, por exemplo. No caso do teste de DNA realizado com sangue, é necessária que a coleta seja realizada em um laboratório de confiança e a amostra seja enviada para a análise.

No entanto, existem alguns kits para coleta domiciliar que podem ser adquiridos pela internet ou em alguns laboratórios. Nesse caso, a pessoa deve esfregar o cotonete contido no kit na parte interna das bochechas ou cuspindo dentro de um recipiente próprio e enviar ou levar a amostra para o laboratório.

No laboratório, são realizadas análises moleculares para que possa ser analisada toda a estrutura do DNA humano e, assim, verificar possíveis alterações ou compatibilidade entre as amostras, no caso da paternidade, por exemplo.

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Exame de DNA: para que serve e como é feito

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O teste de DNA é feito com o objetivo de analisar o material genético da pessoa, identificando possíveis alterações no DNA e verificando a probabilidade do desenvolvimento de algumas doenças. Além disso, o teste de DNA utilizado nos testes de paternidade, podendo ser feito com qualquer material biológico, como saliva, fios de cabelo ou saliva.

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