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ajk

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Uno de los desafíos fue el aislamiento y cultivo de cultivos bacterianos puros

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Bacterias anaerobias componente microbiano predominante del tracto grastrointestical

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Tampoco podían cultivarse mediante técnica de cultivo anaeróbico convencional:
-Tubo de cultivo anaeróbico Laidlaw
-Frasco al vacío Noguchi
-Contenedor anaeróbico "bomba Mcintosh" Mcintosh y Fildes

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Década 1960 Cajas de guantes anaeróbicos

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Década 1960 Cajas de guantes anaeróbicos

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Creados por Socransky y Rosebury et al facilitó el aislamiento y cultivo de anaerobios principalmente obligados

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Se han aislado cultivos puros de más de 300 especies bacterias orales tanto supragingival como subgingival, sanos y enfermos

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Permite manipular y caracterizar genéticamente los microorganismos importantes (caries y enfermedad periodontal)
-Enfoques genéticos clásicos  (aislamiento y caracterización de mutantes).
-Técnicas de genética molecular (metodología del ADN
-Mapeo genético

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Permiten diseccionar el desarrollo y la función a nivel molecular. Puede ser de una, dos o más especies.
Los estudios demuestran que ciertos organismos virulentos requieren muchos tipos diferentes de genes.
Genes que codifican factores de virulencia, vías general de respuesta al estrés, detección de quórum, dos componentes detectan señales ambientales, adherencias superficiales.

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Una mirada más cercana con La Placa Dental...

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Una mirada más cercana con La Placa Dental...

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Al analizar la placa dental asociada con dientes periodontalmente sanos y enfermos se observo numerosos descubrimientos sobre ella, desde su formación, sus propiedades hasta diferentes tipos de niveles y sus interacciones dando un giro en la comprensión de la etiología de las enfermedades dentales y periodontales.

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Esta teoría impulso a los investigadores a observar más de cerca y en profundidad la placa dental

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Considerado "Padre de las biopelículas" o el "Rey del limo" por inventar la palabra BIOFILM

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Una comunidad  Bacteriana encerrada en una matriz

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Las bacterias son más resilientes y más resistentes a las agresiones externas, hay amplios intercambios de metabolitos, tráfico de señales y diferentes niveles de interacciones entre diferentes especies

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¿Qué es la PLACA DENTAL, BIOFILM o BIOPELICULA?  *Pirámide de Socransky*

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Profesor de la Universidad de Washington, Seattle del departamento de Microbiología

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Dijeron que menos de 1%  de los M.O pueden crecer en condiciones de laboratorio.

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Descubrieron que la conservación, así como la variación dentro de las secuencias de los genes que codifican el ARNr 16S, permite la construcción de árboles evolutivos para las bacterias a nivel de especie. Este hallazgo, en combinación con el desarrollo de métodos de PCR.

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Al estudio y clasificación independientes de la ecología microbiana humana, incluido el análisis microbiano oral.
Técnicas independientes del cultivo han revelado un mundo microbiano nuevo y desconocido dentro de la placa dental con una gran diversidad genética.

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+ de 700 especies bacterianas en cavidad oral humana

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+ de 700 especies bacterianas en cavidad oral humana

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Se han identificado bacterias grampositivas, gramnegativas y arqueas, la mayoría de ellas asociadas con la placa dental.

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Está dominada por bacterias grampositivas, que incluyen que Streptococcus sanguinis, S. mutans, Streptococcus mitis, Streptococcus salivarius, y lactobacilos.

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Está formada principalmente por bacterias anaerobias gramnegativas, comoAggregatibacter (Actinobacillus) actinomycetemcomitans,Tannerella forsythia, Campylobacterspp.,capnocitofogaspp., Eikenella corrodens, Fusobacterium nucleatum, Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermediay espiroquetas orales comoTreponema denticola.

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No son depósitos de células homogéneos y sin estructura, sino comunidades complejas y bien organizadas de células asociadas a la superficie encerradas en una matriz de polímero que contiene canales abiertos de agua y vacíos llenos de líquido.

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Bacterias del sarro dental - dental plaque bacteria

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Sobre la formación y el desarrollo de la placa dental revelaron que, durante el proceso de formación, algunas bacterias orales son colonizadores tempranos que expresan componentes bioquímicos que les permiten adherirse de manera efectiva a los tejidos específicos (dientes o tejido periodontal).

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Los colonizadores posteriores contienen componentes que les permiten adherirse a los colonizadores tempranos, lo que aporta ventajas competitivas metabólicas o ventajas de crecimiento y adhesión.

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Patogenia microbiana basada en la comunidad...

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Patogenia microbiana basada en la comunidad...

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El papel de las bacterias dentro de una COMUNIDAD está dado por las propiedades biológicas de cada población microbiana. Las especies con funciones idénticas en un hábitat compiten por el mismo nicho. La coexistencia de diversas especies en un hábitat se debe a que cada una de ellas tiene una función diferente y se interrelaciona con las otras

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Propuso que solo unas pocas especies específicas, como S. mutans y Streptococcus sobrinus, participan activamente en la enfermedad.

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Streptococcus Mutans son parte de la flora normal 

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Expresan ciertos factores patógenos (como la producción de ácido), un equilibrio dinámico de interacciones tanto sinérgicas como antagónicas con sus bacterias vecinas juega un papel esencial para determinar si estos factores patógenos causan daño o no.

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METAGENÓMICA

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El termino "metagenómica" fue inventado por Handeslman, y se define como "la aplicación de técnicas modernas de genómica al estudio de comunidades de organismos microbianos directamente en sus entornos naturales, evitando la necesidad de aislamiento y cultivo en laboratorio de especies individuales".

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Al realizar análisis de funciones metabólicas en genes identificados a través de un enfoque metagenómico , los investigadores pueden recuperar información sobre que organismos están presentes y lo que es mas importante, que funciones o procesos metabólicos son posibles en esa comunidad en particular.
Usando estudios genéticos comparativos junto con experimentos de expresión  como micromatrices y proteómica, el microbiólogos podrá armar una red metabólica que va mas allá de los limites de las especies y obtener información valiosa sobre el metabolismo dentro de la comunidad.

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Diagnostico de caries dental basado en la evidencia. 

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Diagnostico de caries dental basado en la evidencia. 

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Aunque la naturaleza infecciosa de la caries dental se ha demostrado durante mas de 100 años, en lugar de tratarla como una enfermedad infecciosa, la odontología tradicional todavía domina y se enfoca en tratar el síntoma (reparar el diente dañado) a través de enfoques quirúrgicos.

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En un análisis integral, debe de incluir la detección de bacterias cariogenicas y acidogenicidad de la placa dentobacteriana, seguida de un tratamiento integral de la caries dental que incluya la eliminación de bacterias cariogenicas, la reducción de la acidogenicidad de la placa bacteriana y la mejorar la remineralización dental.

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Se han desarrollado nuevas técnicas de detección de bacterias basadas en anticuerpos o nucleotidos para la detección de bacterias cariogenicas en el consultorio o en e laboratorio. Junto con el desarrollo de la nanotecnología, las pruebas pueden desarrollarse aun más en diferentes formas de nanochips para la detección de múltiples patógenos en el entorno clínico .