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Cromatografia é uma técnica utilizada para isolar e identificar os elementos presentes em uma mistura. Este método baseia-se na migração dos compostos da mistura, que possuem diferentes interações entre duas fases distintas:

Fase móvel: nesta fase, os componentes a serem separados se deslocam através de um solvente, que pode ser tanto líquido quanto gasoso.

Fase estacionária: aqui, o componente que está sendo analisado se adere à superfície de um outro material, que pode ser líquido ou sólido.

O procedimento cromatográfico envolve a movimentação da fase móvel sobre a fase estacionária, seja em uma coluna ou sobre uma placa. Dessa forma, os componentes da mistura são separados com base nas diferenças em suas afinidades por essas duas fases.

A clorofila é facilmente reconhecível nas plantas, pois confere a elas a color ação verde. A clorofila a é a forma predominante dentro do reino vegetal. O carotenóide mais famoso é o B-Caroteno, que está amplamente presente tanto no reino animal quanto no vegetal, sendo comumente encontrado nas plantas, juntamente com a clorofila.

No experimento realizado, foi feita a extração das clorofilas e carotenos contidos no pimentão, utilizando o reagente hexano para aplicar técnicas cromatográficas que permitem a visualização e separação desses compostos.

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-> β-CAROTENO

MATERIAIS UTILIZADOS:

- Almofariz de vidro

- Pistilo de vidro

- Proveta

- Coluna

- Béquer

REAGENTES UTILIZADOS:

- Sílica em gel (SiO2)

- Hexano (C₆H₁₄)

PARTE I: PREPARO DA AMOSTRA

- Para realizar a cromatografia em coluna com pimentão vermelho, começamos amassando um pedaço de pimentão em um almofariz. Em seguida, adicionamos hexano à mistura e misturamos bem para extrair os pigmentos do pimentão. Após a extração, filtramos a mistura para remover os sólidos, obtendo um líquido colorido que contém os pigmentos.

1. NA COLUNA

-Esse líquido é transferido para uma bureta, onde será realizado o processo de cromatografia. Preparar a coluna é o próximo passo: colocamos um pouco de algodão no fundo da coluna para evitar que a sílica escape, e em seguida, adicionamos a sílica gel, que servirá como fase estacionária.

- Uma vez que a coluna está pronta, despejamos cuidadosamente o extrato filtrado no topo da coluna e, em seguida, adicionamos hexano novamente como fase móvel. O hexano começa a descer pela coluna, arrastando os pigmentos do pimentão. À medida que o solvente avança, os diferentes pigmentos se separam com base em suas interações com a fase estacionária (sílica) e a fase móvel (hexano).

- O processo é monitorado e o solvente é coletado em frascos à medida que passa pela coluna, permitindo a observação da separação dos pigmentos.

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-> CLOROFILA

MATERIAIS UTILIZADOS:

- Almofariz de vidro

- Pistilo

- Proveta

- Coluna

- Béquer

- Giz

REAGENTES UTILIZADOS:

- Sílica em gel (SiO₂₎

- Hexano (C₆H₁₄)

- Clorofila (folha)

PARTE I: PREPARO DA AMOSTRA

- Com o auxilio de um almofariz juntamente com o pistilo, fizemos a maceração das folhas.

- Após tal processo, acrescentamos 10ml de hexano, cujo principal objetivo era extrair a clorofila (pigmento responsável por captar a luz)

PARTE II: SEPARAÇÃO DE COR

Pode ser feito por meio de dois principios, sendo eles

1. NA COLUNA

- Em uma coluna foi inserido a Sílica em gel considerada a fase estacionária, ou seja, a fase fixa onde a substância que está sendo separada ou identificada permanece na superfície de outro material. Logo em seguida foi adicionado o extrato da clorofila obtido na coluna e observamos fazer a separação de cor.

- Os componentes da amostra (clorofila +hexano) é separada através da interação diferenciada com o solvente que é considerado a fase móvel e o adsorvente que é a fase estacionária, no caso da nossa experiência, a sílica em gel.

2. NO GIZ

- Em um béquer, colocamos hexano no béquer+substância extraída e fechamos.

- Logo em seguida deixamos o giz no béquer e fechamos novamente, observando suas alterações. Percebemos que a mistura é aplicada na fase estacionária (GIZ) e, posteriormente, a fase móvel (HEXANO) é colocada. Ao entrar em contato, o giz arrastou os componentes e devido as diferentes afinidades que as substâncias de mistura possuem com a fase móvel, obtém-se uma separação, quanto mais percorrer o componente, maior será sua interação com a fase móvel.

- De tal modo, o amarelo do carotenoide interage muito mais com a fase móvel (Hexano) sendo apolar quando comparada a clorofila que possui maior afinidade com a fase estacionária.

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Foi extraído pigmentos do pimentão e utilizando uma coluna com algodão e sílica em gel como fase estacionária. Após aplicar o extrato, foi adicionado hexano como fase móvel. Ao abrir a torneira, observamos a descida de uma coloração amarela para um translúcido, indicando a separação dos componentes do pigmento conforme suas polaridades e afinidade com a fase estacionária e móvel. Além do líquido o algodão que estava segurando a sílica em gel também estava ganhando uma colocarão puxada pro rosa, este rosa extraído estava interagindo mais com a parte estacionária e já no caso do carotenoide interagiu mais com a parte móvel.

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A separação de compostos em cromatografia ocorre com base na afinidade que eles apresentam com a fase móvel ou com a fase estacionária, se esta for maior com a fase estacionária ele tende a ficar mais retido, no entanto se for maior com a fase móvel ele tenderá a se deslocar mais com ela. Após a eluição foi possível identificar duas áreas com coloração distintas no giz: uma verde e outra amarelada, correspondendo respectivamente à clorofila e carotenos.

A fase estacionaria no experimento foi o giz e a fase móvel o hexano, essa cromatografia do tipo liquido - solido, ela ocorre por absorção porque a medida que o hexano é absorvido, consegue observar a separação das cores que a compõe.

Podemos observar que após colocar o giz no hexano e esperar um momento, conseguimos observar essa separação das cores, ao colocar ele no sol e esperar um tempo, ficou mais nítido a separação das cores destacando o amarela que separou do verde no giz.

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Ao final do experimento, temos a oportunidade de adquirir conhecimentos e observar a cromatografia, uma técnica empregada na análise, identificação e separação dos componentes de uma mistura. Essa técnica se baseia na separação dos elementos de uma mistura, levando em conta as interações de cada um deles com a fase estacionária e a fase móvel.

Durante o experimento com giz, identificamos que um dos pigmentos encontrados nas folhas das plantas é a clorofila, essencial para o processo de fotossíntese. No pimentão, o outro pigmento observado foi o carotenoide, que são pigmentos lipossolúveis importantes.