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• Nossa equipe de veterinárias Guvet presta serviços em uma central de reprodução equina, na qual uma égua de 15 anos, da raça Polo Argentino foi encaminhada.
• A égua tem histórico de não produzir embriões nas últimas duas tempo-radas de reprodução e o proprietário gostaria de tentar o acasalamento com um reprodutor que está alojado na Europa, e possui poucas palhetas de sêmen em seu Haras, localizado na Argentina.

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• Coleta de oócito → ICSI → Transferência de embrião

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O QUE É?

• Injeção intracitoplasmática de espermatozóide.

• Técnica de fertilização in vitro

VANTAGENS:
• Não precisa de espermatozóide funcional, capacitado e com reação acrossomal.

• O sêmen pode ser fresco, resfriado ou congelado.

DESVANTAGENS:
• Mais tempo para ser realizada.
• Risco de lise do oócito durante o procedimento.

MÉTODO:
Espermatozóide → Cauda é quebrada → Propriedades citolíticas são liberadas → Injeção do espermatozóide no oócito.

MATERIAIS:

• Micromanipulador de gametas

• Pipeta de injeção espermática
• Microscópio
• Placa de Petri
• Piezo drill

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MATERIAIS:
• Anestésico
• US (transdutor côncavo 5 MHz)
• Sonda metálica de duas vias
• Agulha de punção
• Equipo
• Copo coletor
• Camisa sanitária
• Bomba de vácuo
• Tubo de coleta
• Placas de Petri
• Estero microscópio binocular
• Solução tamponada de heparina

MÉTODO:
• Conter em estação, prender a cauda e higienizar reto e períneo;
• Sedar de forma geral ou local (epidural)
• Palpar via transretal e posicionar os ovários contra o fundo da parede do fundo vaginal;
• Inserção do transdutor de US, acoplado a agulha de punção;
• O folículo é aspirado com a ajuda da bomba de vácuo, com níveis de pressão que variam entre 90mmHg e 400mmHg, e o líquido folicular é depositado no copo coletor através do equipo;
• Folículo é lavado com 100mL de solução tamponada e 10 UI/mL de heparina de 34 a 37°, para evitar coagulação
• Fluído folicular é colocado em placas de Petri;
• Busca por oócitos e classificação em estéreo microscópio binocular;
• Após localizados, são transferidos para meios de conservação específicos, para receberem condições de transferência imediata ou maturação in vitro, ou criopreservação;
• São avaliados pelo complexo cumulus oophorus;

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• CAMARGO JUNIOR, Sergio Luiz da Silveira. Biotecnologias aplicadas à reprodução de éguas velhas. 2009. Trabalho de conclusão de curso (bacharelado - Medicina Veterinária) - Universidade Estadual Paulista, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, 2009. Disponível em: <http://hdl.handle.net/11449/118466>.
• Imagem. Disponível em: <https://adrianadegoes.med.br/injecao-intracitoplasmatica-de-espermatozoide-icsi/ >
• Custo da ICSI. Disponível em: <https://ruralpecuaria.com.br/tecnologia-e-manejo/equinos-muares/genetica-equina-brasil-ja-colhe-frutos-da-tecnica-de-icsi.html#:~:text=De%20acordo%20com%20Perla%20Fleu ry,ICSI%20s%C3%B3%20precisamos%20de%201.&text=Financeiramente%20falando%2C%20a%20veterin%C3%A1ria%20calcula,de%20R%24%2019.000%2C00.>
• TESKE, Juliano. Transferência de embriões em equinos. 2017. Trabalho de conclusão de curso (bachalerado - Medicina Veterinária) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Rurais, 2017. Disponível em:  <https://s3.us-west-2.amazonaws.com/secure.notion-static.com/866307aa-2cc7-4bd9-8732-508a56b71f15/TCC_Juliano_Teske_2017-2_Orienta do_2_verso_repositorio.pdf?X-Amz-Algorithm=AWS4-HMAC-SHA256&X-Amz-Credential=AKIAT73L2G45O3KS52Y5%2F20201003%2Fus-west-2%2Fs3%2Faws4_request&X-Amz-Date=20201003T222308Z&X-Amz-Expires=86400&X-Amz-Signature=0dad6ab5282aa0f2910 b4deae20f732dc2c2c7abdf42fd86c67ee4483d865647&X-Amz-SignedHeaders=host&response -content-disposition=filename%20%3D%22TCC%2520Juliano%2520Teske%25202017-2%2520Orientado%25202%2520vers %25C3%25A3o%2520repositorio.pdf%22>
• BORTOT, Diene do Carmo. ZAPPA, Vanessa. Aspectos da reprodução equina: Inseminação artificial e transferência de embrião: Revisão de literatura. 2013. Revista científica eletrônica de medicina veterinária. Disponível em: <http://faef.revista.inf.br/imagens_arquivos/arquivos_destaque/j1OsKEw0s5EtDHD_2013-8-13-18-21-19.pdf>
• MONTECHIESI, Daniela Fernandez. Transferência de embriões em equinos e os fatores relacionados as taxas de prenhez. Ciência Animal. 2015. Disponível em: <http://www.uece.br/ cienciaanimal/dmdocuments/ palestra15_p187_194.pdf>
• RUA, Miguel da Silva Alejandro et.al. Aspiração folicular, maturação in vitro  e injeção intracitoplasmática em éguas. Pubvet, 2016. Disponível em: file:///E:/%C3%81rea%20de%20Trabalho/aspirac%C3%A3o%20folicular.pdf
• RODRIGUES, Rafael. Aspiração folicular por via transvaginal guiada por Ultra Som em equinos. 2006. Trabalho de conclusão de curso (Pós graduação) - Universidade Federal do Rio Grande do Sul. Disponível em: https://www.lume.ufrgs.br/bitstream/handle/10183/7685/000553644.pdf?sequence=1

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VANTAGENS:
• Ganho na eficiência reprodutiva;
• Prolongamento de vida reprodutiva de éguas de alto valor genético;
• Acelera o aprimoramento das raças;
• Obter potros de fêmeas valiosas sem comprometimento de saúde ou rendimento;
• Mais de um potro da mesma égua por ano;
• Antecipar o ingresso de fêmeas jovens na reprodução;

DESVANTAGENS:
• Alto Custo junto da ICSI;

TRANSFERÊNCIA PARA A ÉGUA RECEPTORA (INOVULAÇÃO):

A maioria dos embriões é transferida de forma não-cirúrgica para receptoras sincronizadas.
• Embriões acondicionados em palhetas de 0,25 ou 0,5 ml ou pipetas de IA;
• Inseridos no corpo do útero com inovulador;
• A ponta da bainha é introduzida na abertura externa da cérvix e o embrião é depositado no corpo uterino ou em um dos cornos uterinos.

MATERIAIS:
• Bainha de Inseminação;
• Inovulador;
• Bainha plástica;
• Camisa sanitária;
• Aplicadores;
• Lubrificante;
• Luva;
• Progesterona.

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Boas receptoras devem atender os seguintes requisitos:
• Ter boa saúde e condição corporal;
• Ser cabresteada e fácil de manusear;
• Ter tamanho semelhante ao da doadora;
• Ter entre 4 e 10 anos de idade;
• Ter boas características ultrassonográficas
• Apresentar ciclos regulares
• Manejo nutricional
• Datas fixas de Ultrassonografia
*A qualidade da receptora é a chave para o sucesso da técnica ICSI e de transferência de embriões, tais procedimentos objetivam atingir altos índices de prenhez pós inovulação.

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• A produção de uma gestação através da ICSI gira em torno de 19 mil.