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Cada kit comercial disponível possui certas características e vantagens. Aqui neste artigo há uma compilação dos kits mais utilizados para extração e purificação do DNA, mencionando a tecnologia, aplicação, rendimento e vantagens associadas. Os kits são utilizados em materiais provenientes de mamíferos, microrganismos e plantas.

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Como extrair DNA - Vivian Isabelle Oliveira e Gabriela

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Como extrair DNA - Vivian Isabelle Oliveira e Gabriela

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Para a extração o DNA precisa de máximo isolamento da célula, e para qualquer isolamento é necessário que:

1. A extração seja eficiente

2. As quantidades do DNA extraído sejam suficientes para processos downstream

3. Seja feita a remoção de contaminantes

4.Tenha qualidade e pureza de DNA.

Os passos básicos envolvidos na extração do DNA consistem de:

1. Lise celular, que envolve a quebra da célula para acessar o DNA.

2. Remoção de lipídios. Consiste na separação da membrana  e restos celulares.

3. Desproteinação do extrato celular. Após a desnaturação, as proteínas são separadas do extrato celular.

4. Remoção do RNA. A remoção do RNA rapidamente degrada RNA em subunidades ribonucleotídeas.

5.Precipitação/agregação/eluição de DNA

Os métodos de extração de DNA comumente existentes são:

1. Extração orgânica. É amplamente utilizado e é o método convencional para extração de DNA.

2. Tecnologia baseada em sílica. O DNA adsorve especificamente a membranas/superfícies/partículas de sílica em presença de certos sais e em um determinado pH.

3. Separação magnética. Este método é baseado na ligação reversível do DNA a uma superfície sólida/grânulo/partícula magnética, que foi revestida com anticorpo de ligação ao DNA ou a grupo funcional que interage especificamente com o DNA

4. Tecnologia de troca iônica. Este método é baseado na interação específica entre fosfatos carregados negativamente do acido nucleico e moléculas carregadas positivamente na superfície do substrato.
http://www.labome.com.br/method/DNA-Extraction-and-Purification.html

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COMO EXTRAIR DNA DE ALIMENTOS - Rebecca, João Pedro, Thaís e Luara

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COMO EXTRAIR DNA DE ALIMENTOS - Rebecca, João Pedro, Thaís e Luara

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Materiais:
Saco plástico (tipo zip loc);
Banana;
Tubos de ensaio;
Bastão de vidro ou palito de madeira;
Álcool etílico gelado;
Béquer ou copo de vidro;
Conta-gotas;
Lâmina e lamínula;
Microscópio;
Aparato filtrante (gases ou papel de filtro);
Funil; Aproximadamente 10ml de solução extratora de DNA;
Água (de preferência mineral);

Procedimento
1. Coloque a fruta, previamente lavada em saco plástico zip loc e esmague-a com o punho (cuidado para não rasgar o saco) até ficar um extrato homogêneo;
2. Adicione a solução extratora ao conteúdo do saco, misture tudo apertando com as mãos homogeneizando;
3. Derrame o extrato no filtro com o aparato filtrante e deixe filtrar num recipiente (béquer ou copo);
4. Encha a menos da metade, um tubo de ensaio com o filtrado;
5. Derrame devagar o álcool gelado do tubo de ensaio (deixando-o escorrer vagarosamente pela borda) a fim de se formar duas fases, a superior, alcoólica e a inferior, a aquosa. O volume adicionado do álcool deve ser aproximadamente o mesmo volume do filtrado;
6. Mergulhe o bastão ou palito dentro do tubo até o local onde se encontra a solução mais turva (o filtrado com moléculas de DNA);
7. Retire um pouco dos filamentos e coloque-os em uma lâmina, pingue uma gota da solução extratora, cubra com uma lamínula e em seguida observe ao microscópio. 8. Desenhe em forma de esquema o observado.

Análise O detergente dissolve as membranas lipídicas além de desintegrar os núcleos e os cromossomos das células da cebola, liberando o DNA. Com a ruptura das membranas, o conteúdo celular, incluindo DNA e proteínas, se soltam e se dispersam na solução. A adição de sal, no início da experiência, proporcionou ao DNA um ambiente favorável. O sal contribui com íons positivos Na+ que neutralizam a carga negativa do DNA. Nessa forma, O DNA precipita na solução aquosa. O álcool gelado, além de proporcionar uma mistura heterógena (bifásica), em ambiente salino, faz com que as moléculas de DNA se aglutinem, formando uma massa filamentosa e esbranquiçada. O DNA não se dissolve no álcool, na concentração e na temperatura que se usou neste experimento. Pelo fato do DNA ser menos denso que a água e a mistura aquosa dos restos celulares, ele se localiza na interface da fase alcoólica e aquosa.

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O  DNA  Forense é usado hoje na esfera criminal, para a investigação criminal e na esfera civil, para investigação de paternidade. O DNA Forense é aplicado na identificação de suspeito em casos de crimes sexuais (estupro, atentado violento o pudor, ato libidinoso diverso da conjugação carnal); identificação de cadáveres carbonizados, em decomposição, utilados, tc.; relação entre instrumento lesivo e vítima;

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Materiais:

1 saco plástico tipo “zip loc”

1 morango (fresco ou congelado)

10 ml de solução de extração de DNA (veja como fazer abaixo)

Aparato filtrante: 1 filtro de papel com funil ou 1 filtro de pano ou gaze

Álcool etílico gelado (pode ser álcool 70º g.l.)

1 tubo de ensaio limpo

1 bastão de vidro ou 1 palito de madeira (tipo pau-de-laranjeira, para manicure, encontrado em drogarias)

Preparo das soluções e outras notas sobre os materiais

O saquinho tipo “zip loc” deve ser bem espesso. Quanto mais espesso mais resistente e geralmente os saquinhos utilizados para embalar comidas no freezer são apropriados.

Os morangos podem ser frescos ou congelados. Se for usar morangos congelados, deixar descongelar completamente antes de realizar o experimento. Outras frutas macias como Kiwi ou banana podem ser usadas, mas não fornecem ao final tanto DNA.

Solução de extração de DNA (suficiente para 100 grupos)

100 ml de xampu (não contendo condicionador)

15 gramas de NaCl (sal de cozinha) = 2 colheres de chá

900 ml de água (H2O), de preferência mineral

50 ml de detergente podem substituir o xampu (de preferência sem corantes)

O álcool etílico (etanol) deve ser de, no mínimo, 90º g.l. e deve estar gelado. Se for usar gaze, corte-a em quadrados e dobre em 2 camadas. Corte-a grande o suficiente para poder ficar presa no funil ou na boca do tubo.

Método

1. Coloque um morango, previamente lavado e sem as sépalas (as folhinhas verdes) em um saco zip loc.

2. Esmague o morango com o punho por, no mínimo, 2 minutos.

3. Adicione a solução de extração ao conteúdo do saco.

4. Misture tudo, apertando com as mãos, por 1 minuto.

5. Derrame o extrato no aparato filtrante e deixe filtrar diretamente dentro do tubo. Não encha totalmente o tubo (encha somente até 1/8 do seu volume total).

6. Derrame devagar o álcool gelado no tubo, até que o mesmo esteja cheio pela metade.

7. Mergulhe o bastão de vidro ou o pau-de-laranjeira dentro do tubo no local onde a camada de álcool faz contato com a camada de extrato.

8. Mantenha o tubo ao nível dos olhos para ver o que está acontecendo.

Dayana, João Gabriel, Matheus, Maria e Pietra. :)

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Grupo:Danilo,Fabio, Gustavo,Rafael.

Foi em 26 de fevereiro de 1869 que o suíço Johann Friedrich Miescher. O estudo era feito com pus de feridas. O uso desse material se justificava porque essas células tem núcleo maior e são mais fácil de isolar, o tal material ácido tinha muito fósforo e nitrogênio, pobre em enxofre. Na época, Miescher chamou essa substância de nucleía. E escreveu uma carta para seu tio relatando sua nova descoberta, na Universidade de Tübingen, na Alemanha. Friedrich, como era conhecido, descobriu uma substância que estava presente no núcleo de todas as células, e que possuía uma característica química diferente das proteínas ou outro componente celular conhecido como D.N.A. Sem saber do valor desse achado, o jovem médico iniciou uma das maiores revoluções científicas, que, anos mais tarde, iria mudar completamente a compreensão do conceito de vida, além de promover inúmeros avanços médicos.

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Como é utilizado o DNA na perícia criminal - Caio, Jaime, Pedro Lucas 

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Como é utilizado o DNA na perícia criminal - Caio, Jaime, Pedro Lucas 

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O primeiro passo na análise de um vestígio biológico que é coletado em cena de crime é a verificação do perfil de STRs da amostra de DNA contida neste vestígio, utilizando para isso kits comerciais padronizados vendidos para isso.
Quando o perfil de STRs não é o mesmo daquele que existe em um banco de dados criminais para comparação, qualquer informação adicional é extremamente valiosa, até testes de predição de fenótipos específicos.

Em nossa atividade prática vamos utilizar os seguintes materiais:

Uma cebola grande;

Faca de cozinha;

Uma colher de sopa;

Uma colher de chá;

Dois copos;

Água filtrada;

Sal de cozinha;

Detergente;

Álcool gelado;

Bastão fino de vidro ou madeira bastão;

Filtro de café;

Gelo moído;

Local para se fazer banho-maria.

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DNA recombinante e da genômica são essenciais para o diagnóstico de distúrbios genéticos sendo possível determinar os genótipos e rastrear o genoma humano. A terapia Gênica é utilizada para tratar doenças genéticas através da transferência de cópias clonadas de alelos funcionais para tecido-alvo.

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Como Extrair O D.N.A  Humano - Luara, Thaís, João P e Rebecca

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Como Extrair O D.N.A  Humano - Luara, Thaís, João P e Rebecca

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Para a coleta do D.N.A será necessário os  seguintes  materiais:
* 2 copos americanos com agua;
* 1L de alcool (92 inpm);
* 1 detergente liquido incolor;
* 50g de sal de cozinha;
*corante de cozinha ;
* 2 copos americanos;
*2 colheres de sopa;
* um recipiente transparente de 300ml;

Como extrair o D.N.A:
Pegue dois copos com água e coloque em um recipiente, em seguida acrescente uma colher de sal e misture bem.
Para o próximo passo separe três colheres da mistura feita acima e faça um bochecho durante 1 minuto, durante o bochecho separe mais ou menos meio copo de álcool e coloque duas gostas de corante.
Apos bochechar, cuspa o liquido em um copo e acrescente uma gota de detergente, e misture devagar para não formar bolhas.
Por fim misture o álcool com o liquido bochechado e espere agir dois minutos. O D.N.A começara aparecer, observe a imagem abaixo :

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COMO EXTRAIR SEU PRÓPRIO DNA- Gabriela Garcia, Isabelle Oliveira e Vivian.

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COMO EXTRAIR SEU PRÓPRIO DNA- Gabriela Garcia, Isabelle Oliveira e Vivian.

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1. Passe a sua língua pelo interior de suas bochechas para que algumas células de pele se soltem. Depois, cuspa em um tubo transparente, ou em um copo pequeno e limpo.

2. Em seguida, adicione detergente (aproximadamente a mesma quantidade da saliva). Isso irá abrir as células e desintegrar a membrana. Assim, o núcleo da célula, que contém o DNA, será exposto.

3. Em seguida, adicione sal (cerca de uma colher de chá). Isso ajuda a unir as moléculas.

4. Agora, chegou a parte do álcool. O DNA é insolúvel em álcool. Coloque a bebida gelada com cuidado, de preferência com um conta-gotas.

5. Depois de alguns minutos, você começará a ver as fitas de seu DNA.

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Dayana, João Gabriel, Maria, Matheus, Pietra
DNA ou ADN em português, é a sigla para acido desoxirribonucleico, que é um composto orgânico cujas moléculas contem as instruções genéticas que coordenam o desenvolvimento e funcionamento de todos os seres vivos e de alguns vírus.

É no DNA que contem informações que instrui o desenvolvimento e funcionamento de todos os organismos vivos, seu papel principal é armazenar as informações necessárias para a construção das proteínas e ARNs .
Os genes são segmentos de ADN que são responsáveis por carregar informações genéticas.
São constituído por uma pentose (desoxirribose) e bases nitrogenadas (adenina citosina, rubianina timina), o conjunto resulta em acido fosfórico e base nitrogenada .
Ele se encontra no núcleo da célula de um organismo, no interior dos cromossomos.

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Nasceu em 13 de agosto de 1844 na cidade de Baileia na Suíça e faleceu no dia 26 de agosto de 1895 na ciade de Davos tambem na Suíça.  Inicialmente queria ser padre, mas seu pai se opôs a ideia, então Miescher acabou ingressando na escola de medicina.  Friedrich formou-se médico e por influencia de seu tio, professor de fisiologia na Universidade de Basiléia, na Suíça, inclinou-se para o ladoda bioquímica,no qual seu tio acreditava que as questões relacionadas com o desenvolvimento dos tecidos somente seriam resolvidas com base química. Foi discípulo do professor Ernest Felix Immanuel Hoppe-Seyler, famoso químico da época;trabalhavam com bandagens de feridos durante a guerra da Criméia. Desde então fez muitas descobertas, por exemplo a nucleína e o D.N.A.

Grupo: Gustavo, Danilo, Fabio, Rafael.

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Quando foi descoberto o D.N.A - Beatriz Campos

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Quando foi descoberto o D.N.A - Beatriz Campos

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A descoberta do DNA ocorreu em 1869 e foi feita pelo bioquímico alemão Johann Friedrich Miescher¹ (1844 – 1895). Miescher buscava determinar os componentes químicos do núcleo celular e usava os glóbulos brancos contidos no pus para suas pesquisas. Os glóbulos brancos eram um bom material pois são células que apresentam núcleos grandes e fáceis de serem isolados do citoplasma. Além disso, o pús era muito fácil de se conseguir na época em ataduras usadas em ferimentos.

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A história do descobrimento do DNA começa no ano de 1869. Quem descobriu foi Johann Friedrich Miescher, bioquímico suíço. A descoberta aconteceu por meio da análise do núcleo de células vindas dos glóbulos brancos. O estudo era feito com pus de feridas. O uso desse material se justificava porque essas células tem núcleo maior e são mais fácil de isolar. Em meio as pesquisas, foi notada a presença de algo ácido e desconhecido. O tal material ácido tinha muito fósforo e nitrogênio, pobre em enxofre. Na época, Miescher chamou essa substância de nucleía.
Fonte: http://biologia-molecular.info/dna.html

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Laura Camargo - Quando o DNA foi descoberto:

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Laura Camargo - Quando o DNA foi descoberto:

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Apesar de ser uma da moléculas mais importantes para a biologia, o DNA foi descoberto mais tarde. Antes foram encontradas apenas regularidades subjacentes da hereditariedade, pelo biólogo Gregor Mendel, foi então que quase um século depois, cientistas redescobriram o trabalho de Mendel e assim perceberam que a vida de certa forma está codificada em genes. Geneticistas do mundo todo procuravam pelas moléculas que carregavam as informações genéticas dos seres vivos. Sabia-se que as células continham vários tipos diferentes de moléculas, mas não o quanto elas eram capazes de armazenar  e transferir informações para novas células.
Em 1953, James Watson e Francis Crick trabalharam arduamente e perceberam que os ácidos nucleicos são organizados em uma escada retorcida, com dois corredores feitos de fosfatos de açúcares e uma série de degraus feitos de componentes orgânicos conhecidos como bases.

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Hoje em dia o DNA tem a função de diagnósticar distúrbios sendo possível e rastrear o genoma humano.
Em questão de farmacologia o DNA tem função de produzir vários produtos, por exemplo, a insulina.
O DNA tambem é muito utilizado em testes de paternidade para descobrir quem é o pai da criança (Isso só é possível porque há transferência de características hereditárias dos pais aos seus descendentes.)
E o mais próximo ao assunto é o uso de DNA para descobrir quem é o criminoso através do material biológico preservado.

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Natalia Passos - Histórico do D.N.A (Quando foi descoberto)

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Natalia Passos - Histórico do D.N.A (Quando foi descoberto)

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Aconteceu em 1869 e descoberto por Johann Friedrich Miescher, um bioquímico suíço.
Tudo aconteceu devido um estudo da análise do núcleo de células vindas dos glóbulos brancos.
O estudo era feito com pus de feridas. A partir disso foi notada uma certa substancia: um material ácido, que tinha muito fósforo e nitrogênio, porém,  pobre em enxofre. Na época, Miescher chamou essa substância de nucleía.
Com o desinvolver das pesquisas, em 1943, Oswald Avery, junto a sua equipe, fizeram uma experiencia, alterando o DNA de uma bactéria. Notou-se que essas alterações poderiam fazer com que bactérias não infecciosas passassem a ser infecciosas. Essa mudança pôde comprovar que o DNA é responsável pela formação das características de ser. Até que, em sete de março de 1953, James Watson e Francis Crick descobriram a estrutura do DNA, com isso, essa grande descoberta se tornou muito importante para a nossa vida.