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Confeccção dos meios de cultura e coleta das bactérias

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Confeccção dos meios de cultura e coleta das bactérias

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A primeira etapa da confecção do meio de cultura foi a pesagem e mistura dos componentes (12g de gelatina incolor, 0,5g de caldo de carne, 1g de dextrose, 5mg de cetoconazol e 0,5g de cloreto de sódio), para fazer um meio de cultura eficaz e que nele crescecem apenas bactérias, e não fungos.

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Maria Clara da Silva e Vinicius Rocha

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As bactérias são seres unicelulares e procariontes e microscópicos que compôem cerca de 90% das células do organismo.

Se alimentam de compostos orgânicos como proteínas e glicídios

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Maria Clara

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Vinicius Rocha

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Em relação aos formatos, as bactérias podem ser classificadas como Coccos (formato esférico), Bacillus (formato de bastonete) ou Espirilo (formato de espiral).

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A microbiota compreende ao conjunto de microorganismos (principalmente bactérias) que vivem em diferentes regiões do corpo humano.

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Vinícius ficará responsável pela produção do meio de cultura, realização da coloração de Gram, microscopia e apresentação

Maria Clara ficará responsável pela coleta das amostras, cronometria e atualização do padlet.

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A microbiota é fundamental para o bom funcionamento do organismo, a microbiota intestinal por exemplo, garante uma boa digestão, a microbiota presente na pele garante proteção contra infecções na epiderme.

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Hipóteses para as bactérias que irão ser cultivadas.

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Hipóteses para as bactérias que irão ser cultivadas.

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Nossa hipótese é que iremos encontrar bactérias do gênero Estafilococos de maioria gram-positiva

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Em seguida, a mistura homogênea foi disposta em camadas finas em três placas de Petri, onde cada uma seria utilizada para cultivar bactérias coletadas dos respectivos meios: Boca, nariz e pele.

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Coleta das bactérias e inoculação ao meio de cultura.

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Coleta das bactérias e inoculação ao meio de cultura.

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Em seguida foram feitas as coletas das bactérias com a utilização de swabs estéreis. Vinícius realizou a coleta das bactérias da cavidade nasal.

Após isso, foi realizada a inoculação destas bactérias ao meio de cultura, passando o swab em ziguezague por toda a superfície da placa.

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Para prepararmos as lâminas utilizamos três processos: A coleta de parte da colônia, a fixação e a coloração de gram.

Para coletar as amostras utilizamos uma haste plástica para coletar e espalhar a amostra sobre a lâmina, que em seguida foi passada algumas vezes sobre a chama da lamparina para fixar a amostra.

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Tivemos algumas pequenas intercorrências ligadas a microscopia, a lente objetiva que estávamos utilizando estava suja, logo o que achávamos que estávamos observando (supostamente bactérias do gênero Estreptobacilos e Diplococos) eram apenas sujeira da lente.

Após a limpeza da lente objetiva e um pequeno ajuste na distância da lâmina, conseguimos observar as bactérias presentes.

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O processo da coloração de Gram foi o último processo para a preparação da lâmina, por meio dele podemos visualizar as bactérias e saber se são gram-positivas ou negativas.

O processo se iniciou com a aplicação do corante cristal violeta, que foi deixado sobre a amostra por um intervalo de 1 minuto, após isso, o corante foi lavado com água. Em seguida, foi adicionado o lugol, que seguiu o mesmo protocolo de 1 minuto de pausa seguido da lavagem com água. Logo após foi adicionado o álcool, que foi imediatamente lavado com água, e por último, foi adicionado o corante safranina, que foi deixado pelo intervalo de 30 segundos e lavado com água.

Após isso, a lâmina foi suavemente secada com papel toalha e a amostra recebeu uma gota de óleo de imersão, para ajudar a visualização no microscópio. Então foi posta a lamínula sobre a amostra e a mesma foi posta no microscópio para a microscopia.

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Ao realizar a análise, foi possível observar uma grande colônia de bactérias gram-positivas do gênero Bacilos e alguns poucos Diplobacilos, todos gram-positivos.

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Ao comparar com as hipóteses, se confirmou a predominância de bactérias gram-positivas, um vez que o indivíduo do qual foi realizada a coleta estava saudável (bactérias gram-positivas são em sua grande maioria não patogênicas).

Em relação a sua morfologia, todas as bactérias presentes na amostra foram do gênero Bacilos, que devido a coleta ter sido feita da região da cavidade nasal, que provavelmente podem ser bactérias da espécie Corynebacterium spp., uma vez que essas são extremamente comuns na microbiota nasal, devido a sua importância para a produção da mucosa da região.

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Para experimentos futuros, seria interessante deixar os meios de cultura em repouso por mais tempo e de preferência dentro de uma estufa, talvez isso possa gerar um maior crescimento de colônias. Além disso, testes mais aprofundados como o teste de catalase e meios de cultura mais seletivos (como o ágar sangue) seriam interessantes.